《血液病学》
慢病毒载体介导的shRNA对小鼠T细胞CD28基因表达的影响
发表时间:2010-06-17 浏览次数:541次
引 用:
关 键 词:
shRNA;慢病毒载体;CD28;移植物抗宿主病
作者:
程娜娜 桑威
作者单位:
出版年份:
0
期刊页数:
收录者:
知网,万方
摘要:
目的 探讨编码针对小鼠CD28的短发卡状RNA(short hairpin RNA, shRNA)的慢病毒载体对小鼠T细胞CD28基因表达的影响。方法 设计并合成3对靶向小鼠CD28的特异性干扰序列和1对非特异性干扰序列,亚克隆入慢病毒载体pLB中,构建出重组慢病毒干扰质粒,行PCR鉴定并进一步测序证实。分别将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞, 生产慢病毒颗粒, 并依据绿色荧光蛋白(GFP)表达水平检测病毒滴度。慢病毒感染小鼠脾淋巴细胞,实时荧光定量RT-PCR和Western blot技术分