Grp78基因转染肝细胞癌SMMC-7721克隆筛选及鉴定
发表时间:2010-06-28 浏览次数:568次
Grp78;基因转染;克隆筛选
谷燕娇, 高志安
0
知网,万方
目的 用Grp78基因转染人肝细胞癌SMMC-7721,筛选阳性克隆并鉴定。方法 利用真核表达载体pcDNA3.1+Grp78转染SMMC-7721,pcDNA3.1+Grp78与转染试剂的比例(μg/μL)分别为2∶3、2∶4、2∶5、2∶6、2∶7、2∶8、2∶9, 400 μg/mL G418筛选阳性克隆后,传代扩增,Western Blot鉴定克隆的Grp78表达情况。应用pcDNA3.1空载体作为阴性对照。结果 Western Blot显示,转染后的SMMC-7721经G418筛选,除一个克隆不