应用纤维结合素建立新型兔腰椎间盘退变模型

刘海飞,张晗,乔光曦,等.应用纤维结合素建立新型兔腰椎间盘退变模型[J].中华外科杂志,2013,51(4):362-366.

疾病模型,动物 腰椎 椎间盘 纤维结合素

刘海飞 张晗 乔光曦 陶昊 陈峰 扈延龄 王德春 胡有谷

266003,青岛大学医学院附属医院骨科 266003,青岛大学医学院附属医院内科

2013

362-366.

知网,万方

目的 应用兔椎间盘内显微注射纤维结合素片段(Fn-f)的方法建立新型动物椎间盘退变模型.方法 34只新西兰大白兔随机分为3组:实验组(16只),L1～2,L2～3,L3～4,L4～5椎间盘髓核内显微注射30 kDa的Fn-f 25 μl；对照组(16只)相应髓核内注射磷酸盐缓冲液(PBS) 25 μl;空白组(2只)不做处理.术后4、8、12周处死实验组及对照组各4只兔,对髓核组织切片行番红O染色和HE染色,采用35S整合分析法检测髓核蛋白多糖合成.实验组和对照组中各取4只兔分别于术前及术后4、8、12和16周行腰椎数字化X射线摄影(DR)检查,测量计算椎间盘高度指数(DHI),术后16周处死,行番红O染色、HE染色和蛋白多糖合成测定.空白组2只兔处死后检测髓核蛋白多糖合成.结果 实验组兔椎间盘髓核细胞数目进行性减少,内层纤维环结构紊乱、破坏；髓核区4周后出现进行性缩小,术后16周髓核区消失,与内层纤维环组织不能分辨.实验组兔椎间盘蛋白多糖合成率进行性下降(F =263.241,P=0.000)；术后各时间点,实验组兔椎间盘蛋白多糖合成率均较对照组显著降低(t=-27.010～-2.833,P＜0.05).术后8周DR示造模椎间隙开始出现明显狭窄,进行性加重,12周时椎间盘及临近椎体前方出现骨赘,16周时骨赘增生明显.术后4周,实验组与对照组DHI百分比(DHI％)分别为96.5％±1.7％和97.4％±1.2％,差异无统计学意义(P＞0.05)；术后8、12和16周,实验组DHI％分别为85.6％±3.8％、77.2％±3.5％和65.5％±5.6％,均较对照组明显减低(t=-21.225 ～-10.795,P＜0.01).结论 显微注射Fn-f可使兔腰椎间盘发生缓慢的、进行性的、与人椎间盘自然退变过程相似的退变,具有较好的模拟性和重复性,为椎间盘退变分子水平的研究提供了一种新型的、实用的动物模型.