血液增菌肉汤、双相血培养瓶与全自动血培养系统应用对比

　　作者：郭 民 孟 伟 　　作者单位:661000云南省个旧市人民医院检验科 

　　【关键词】 血液增菌

　　1  材料和方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  标本来源

　　本院2000年1月～2002年12月门诊及住院患者的血液及骨髓标本。

　　1.1.2  培养基

　　法国生物梅里埃公司的miniVITAL专用需氧血培养瓶、上海奥普生物技术公司的双相需氧血培养瓶、浙江军区后勤部卫生防疫检验所的血液增菌肉汤。

　　1.1.3  仪器

　　法国生物梅里埃公司的miniVITAL全自动血培养系统及VITEK32全自动微生物分析系统。

　　1.2  方法

　　成人采血5～10ml，婴幼儿采血1～3ml，骨髓采1～2ml，2000年1～12月标本449份注入血液增菌肉汤、2001年1～12月标本1001份注入双相需氧血培养瓶、2002年1～12月标本1028份注入miniVITAL专用需氧血培养瓶，分别按操作规程 [2] 、miniVITAL全自动血培养系统及VITEK32全自动微生物分析系统操作说明培养、分离、鉴 定。

　　2  结果

　　2.1  分离菌株种类

　　增菌肉汤449份标本，阳性48份，阳性率10.69%，检出5属7种菌;双相瓶1001份标本，阳性245份，阳性率24.48%，检出9属12种菌(含苛养菌2种);miniVITAL培养系统1028份标本，阳性228份，阳性率22.18%，检出11属16种菌(含苛养菌4种)。 见表1。

　　表1 增菌肉汤、双相瓶及miniVITAL培养系统检出菌株种类 (略)

　　2.2  阳性检出时间及污染率

　　增菌肉汤阳性检出时间最快24h，最慢168h;24h检出率2.08%(1/48)，48h检出率27.08%(13/48);污染率1.11%(5/449)。双相瓶阳性检出时间最快16h，最慢168h;24h检出率9.39%(23/245)，48h检出率58.78%(144/245);污染率0.60%(6/1001)。miniVIˉTAL培养系统检出时间最快2.5h，最慢168h;24h检出率60.53%(138/228)，48h检出率89.04%(203/228);污染率0.39%(4/1028)。

　　3  讨论

　　3.1  增菌肉汤、双相瓶、miniVITAL 培养系统的血培养阳性率分别为10.69%、24.48%、22.18%，分别检出5属7种菌、9属12种菌(含苛养菌2种)、11属16种菌(含苛养菌4种)，说明双相瓶、miniVITAL培养系统比增菌肉汤更适于细 菌，特别是苛养菌生长。

　　3.2  由于双相瓶加入琼脂斜面，减少了转种环节，有利于细菌特别是苛养菌生长，因此血培养阳性检出时间较增菌肉汤有所加快，而miniVITAL培养系统采用同源荧光技术，以CO 2 生成、pH值改变、氧化还原电位变化所致荧光下降的程度反映微生物的生长，它可以15min判读1次，因而使血培养阳性检出时间大大提高，实验表明miniVITAL培养系统的24h、48h阳性检出率均远高于双相瓶及增菌肉汤。3.3 实验显示，由于采用了塑盖和胶塞结合的瓶盖工艺，使双相瓶、miniVITAL培养系统血培养污染率仅分别为0.60%、0.39%，而无此工艺的增菌肉汤血培养污染率则高达1.11%。总之，由于富含细菌，尤其是苛养菌生长所需的氨基酸、维生素及生长因子等营养素，含有可抗凝、抗补体、抗吞噬、拮抗某些抗菌药物的聚茴香脑磺酸钠，使双相瓶、miniVITAL培养系统比增菌肉汤更有利于各类病原菌快速生长;而采用塑、胶结合瓶盖可减少双相瓶、miniVITAL培养系统污染可能性;由于使用了同源荧光技术，自动侦测技术，miniVITAL培养系统阳性检出时间大大快于双相瓶及增菌肉汤。本次实验表明miniVITAL培养系统能高速、准确地检出包括苛养菌在内的多种病原菌，但成本较高，适于在省、市级的大、中型医院及条件较好的县级医院使用，双相瓶能较快、较准地检出病原菌，适于在一般县级医院使用，而传统增菌肉汤因其检出率低，检出速度慢而应逐步淘汰。

　　参考文献

　　1  周贵民.努力提高血液细菌培养阳性率.中华医学检验杂志，1999，22:69-70.

　　2  叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程，第2版.南京:东南大学出版社，1997:475-548.