MMP7和Ecad在胃癌组织中表达的临床价值

　　作者：李德艳,刘爱东,高峰　　作者单位：1 唐山职业技术学院病理教研室(遵化市人民医院病理科，河北 遵化 064200)

　　【摘要】 目的 探讨基质金属蛋白酶7(MMP7)及上皮型黏附素(Ecad)在胃癌中的表达，关注二者在胃癌发生发展及转移中的作用。方法 收集我院105例胃癌术后存档的标本作为研究对象，34例正常胃黏膜组织作为对照组，应用免疫组织化学技术检测两组中MMP7和Ecad的表达。结果 胃癌组织中MMP7表达阳性率为74.29%，明显高于正常胃组织，胃癌组织中Ecad表达阳性率为33.33%，明显低于正常胃组织，MMP7和Ecad在胃癌中的表达均与浸润及淋巴结转移有关，胃癌中MMP7和Ecad表达具有负相关性。结论 胃癌中MMP7和Ecad异常表达，二者在胃癌癌变及进展中可能具有一定作用，术后联合检测MMP7和Ecad可能对判断胃癌预后有一定价值。

　　【关键词】胃癌;基质金属蛋白酶7,上皮型黏附素,免疫组化

　　胃癌的浸润及转移是患者死亡的重要原因，相关研究显示恶性肿瘤细胞间的黏附作用及细胞外基质(ECM)的降解对肿瘤发展具有重要作用〔1〕。我们应用免疫组化方法检测胃癌中基质金属蛋白酶7(MMP7)及上皮型黏附素(Ecad)的表达情况，探讨二者在胃癌生长及转移中的作用，以期为研究肿瘤的生物学行为提供支持。

　　1 材料与方法

　　1.1 一般资料

　　选取我院胃癌根治术后病理科存档蜡块105例作为观察对象，患者年龄29～72(平均60.5)岁，其中男61例，女44例。患者术前均未进行任何治疗，临床资料完整。选取距胃癌大于10 cm处正常胃黏膜组织34例作为对照组。二组患者在一般情况的比较中，无明显差别，具有可比性。

　　1.2 MMP7和Ecad的检测

　　MMP7和Ecad 二种抗体均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，检测应用免疫组化SP法，由病理专业技术人员按照操作说明完成，严格质控，并防止人为误差。

　　1.3 结果判定标准

　　MMP7阳性表达为细胞质出现棕黄色颗粒，Ecad为细胞膜出现连续性着色。每张切片观察10个具有代表性的视野，根据着色强度和着色细胞百分率进行评分：基本不着色为0分，着色淡者为1分，着色深者为2分;着色细胞占计数细胞百分率<5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，>50%为3分。将每张切片的着色强度得分和着色细胞百分率得分相乘，为其最后得分。0～1分为阴性(-)，2～3分为阳性(+)，4分及以上者为强阳性()。以≥2分为阳性。

　　1.4 统计学分析

　　采用SAS6.12软件进行χ2检验及线性相关分析。

　　2 结 果

　　2.1 MMP7和Ecad蛋白在胃癌、正常胃黏膜组织的表达

　　MMP7和Ecad 在胃癌与正常胃黏膜组织中表达的阳性率差别显著(P<0.05,P<0.001)，即MMP7在胃癌组织中表达的阳性率明显增高(P<0.05)，而Ecad在胃癌组织中表达的阳性率明显减低(P<0.001)。见表1。表1 MMP7及Ecad在胃癌、正常胃黏膜组织表达阳性率的比较

　　2.2 MMP7和Ecad的表达与胃癌临床病理特征的关系

　　MMP7和Ecad与胃癌组织不同浸润深度、有无淋巴结转移组表达的阳性率比较中，差别显著(均P<0.01)。见表2。表2 胃癌中MMP7及Ecad的表达与临床病理特征的关系

　　2.3 胃癌中MMP7和Ecad表达的相关性

　　对105例胃癌患者MMP7和Ecad的表达进行线性相关分析，显示胃癌中MMP7和Ecad的表达呈负相关(r=-0.42,P<0.05)。

　　3 讨 论

　　恶性肿瘤的生物学行为影响着肿瘤的生长及转移，也影响着患者的预后。肿瘤转移时，首先黏附功能下降，脱离原发灶，对转移提供了重要基础〔2〕，其次ECM的降解，为肿瘤突破基底膜创造了必要的环境〔3〕。钙黏附素是一组Ca2+依赖跨膜蛋白,包括至少9个基因家族，其中以Ecad最为重要，也是人们研究肿瘤的热点之一。Symowicz等〔4〕通过对上皮性卵巢癌的研究认为异常的上皮分化是卵巢癌发生的早期事件，Ecad表达的缺失与肿瘤的进展有关。MMPs是一组重要的锌依赖蛋白酶，以MMP7最为重要，而MMP7具有广泛的底物特异性和强大的基质降解功能，肿瘤细胞通过分泌MMP7来降解构成基底膜的成分，从而破坏了机体防御肿瘤浸润与转移的自然屏障，促使肿瘤浸润和转移。郭源等〔5〕认为MMP7的高表达与胃癌密切相关，与肿瘤浸润深度呈正相关。

　　本实验通过免疫组织化学方法检测MMP7和Ecad在胃癌中的表达，发现MMP7的阳性表达率比对照组高，而Ecad阳性表达率比对照组低，提示二种蛋白异常表达参与肿瘤的发生发展。Ecad作为一种重要的黏附蛋白，在胃癌进展过程中能有效地为肿瘤细胞离开原发病灶创造条件。而肿瘤浸润及转移过程中，均要通过基底膜，而MMP7的高表达，促进了ECM的降解，为肿瘤播散提供了必要的条件。实验结果显示MMP7和Ecad表达的阳性率与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移密切相关，又由于浸润深度及淋巴结转移与患者的预后密切相关，提示MMP7和Ecad可能对判断胃癌患者的预后有重要价值。本实验检测到MMP7和Ecad呈负相关，提示二者可能具有协同负性效应。有研究认为MMP7通过裂解细胞表面的Ecad，并释放可溶性的Ecad，共同参与肿瘤的浸润与转移〔6，7〕。由于MMP7和Ecad在肿瘤的浸润与转移中发挥了重要的对抗作用，所以MMP7也间接地促进了胃癌的浸润与转移，其发生机制可能与中介分子有关，但其确切机制尚有待进一步研究。

　　总之，胃癌中MMP7和Ecad异常表达，二者在胃癌癌变及进展中可能具有一定作用，术后联合检测MMP7和Ecad可能对判断胃癌预后有一定价值。

　　【参考文献】

　　1 刘爱东，刘士生，许志萍，等.ECadherin在胃癌中的表达及意义〔J〕.广东医学，2007;28(11)：18067.

　　2 Noe V，Fingleton B，Jacobs Kc，et al.Release of an invasion promoter Ecadherin fragment by matrilysin and stromelysin1〔J〕.J Cell Sci，2001;114(pt1)：1118.

　　3 Yoon So,Park Sj,Yn cH,et al.Role of matrix metalloproteinases in tumor metastasis and angiogenesis〔J〕.J Biochem Mol Biol,2003;36:12837.

　　4 Symowicz J，Adley BP，Gleason KJ,et al.Engagement of collagenbinding integrins promotes matrix metalloproteinase9 dependent Ecadherin ectodomain shedding in ovarian carcinoma cells〔J〕.Cancer Res，2007;67(5)：20309.

　　5 郭 源，万远廉，魏 群，等.基质金属蛋白酶7基因在胃癌中的表达〔J〕.中华普通外科杂志，2000;15(2)：824.

　　6 周绍弼，腾小军，陈新皓，等.胃癌及胃癌前病变中Ecadherin及其相关蛋白的表达〔J〕.癌症，2001;20(5)：4804.

　　7 Campos RS，Lopes A，Guimaraes GC,et al.Ecadherin，MMP2，and MMP9 as prognostic markers in penile cancer〔J〕.Urology，2006;67(4)：797802