雅氏病患者脑脊液中细胞因子IL6的变化

　　作者：杨蕴天,江新梅,林世和　　作者单位：内蒙古医学院附属第一医院神经内科，内蒙古 呼和浩特

　　【摘要】目的 研究克雅氏病 (CJD) 患者脑脊液中细胞因子白细胞介素(IL)6的水平,探讨促炎性细胞因子在CJD疾病过程中的作用。方法 病例分为CJD组、脑炎组和对照组。采用酶联免疫吸附实验检测脑脊液中IL6的浓度。结果 CJD患者脑脊液中IL6水平明显升高,与对照组相比有统计学意义(P<0.01)。结论 促炎性细胞因子IL6在CJD患者脑脊液中含量增加，在其神经变性过程中可能发挥重要的作用。

　　【关键词】 克雅氏病,细胞因子,白细胞介素6

　　【Abstract】 Objective To explore the level of cytokine interleukin 6 (IL6) in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with CreutzfeldtJakob disease (CJD) and to investigate the effect of proinflammatory cytokine on the process of CJD. Methods Subjects were divided into CJD, encephalitis and control groups. The level of IL6 in CSF was measured by ELISA. Results Compared with control group, the levels of IL6 in CSF of CJD patients were significantly higher. Conclusions The level of proinflammatory IL6 of CSF is increased in CJD patients, which may play an important role in the process of neural degeneration.

　　【Key words】 CreutzfeldtJakob disease; Cytokine; Interleukin6

　　克雅氏病(CJD)是蛋白粒子病之一，临床表现以进行性痴呆为特征，伴有肌阵挛、共济失调、视力障碍等〔1〕。该病是由于脑组织内出现并沉积大量异常的蛋白变异型细胞型蛋白粒子PrPSc而致神经细胞死亡。目前认为由于脑内PrPSc的沉积导致胶质细胞活化是神经细胞死亡的主要原因〔2〕，其中活化的胶质细胞释放的细胞因子在神经元变性、死亡的过程中起着重要作用〔3〕。免疫组化研究发现细胞因子白细胞介素(IL)1β在蛋白粒子病早期和晚期被星形胶质细胞表达〔4〕。也有研究认为细胞因子IL10、IL4、IL13在蛋白粒子病中也起着重要的调节作用〔5〕。本文观察了CJD患者脑脊液中细胞因子IL6浓度的变化，旨在明确IL6在CJD发病中的可能作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 病例分组

　　CJD组：1998～2007年吉林大学第一医院神经内科采集的脑脊液样本17例，男8例，女9例，平均年龄(61.76±10.28)岁(年龄范围43～82岁)，按已制定的WHO CJD诊断标准，4例临床肯定CJD，其余为临床很可能CJD。脑炎组：共10例，男5例，女5例，平均年龄(59.80±10.79)岁(年龄范围39～72岁)，均经脑脊液常规生化检查明确诊断。对照组：共10例，男5例，女5例，平均年龄(62.30±11.33)岁(年龄范围43～79岁)，所有病例通过体格检查，并行脑脊液、脑电图及头部CT检查，排除器质性神经病变。CJD组、脑炎组及对照组性别及年龄经统计学分析无显著性差异(P>0.05)。

　　1.2 标本采集及处理

　　各组脑脊液样本采集后密封于-80℃冰箱内保存。

　　1.3 实验方法

　　脑脊液IL6 浓度采用ABC夹心ELISA法检测，按照人IL6 ELISA试剂盒(上海西塘生物有限公司)说明书操作。

　　1.4 统计学分析

　　所有数据均采用x±s表示，用SPSS13.0统计软件。

　　2 结果

　　CJD组、脑炎组与对照组脑脊液中IL6含量比较有显著性差异(均P<0.01)，CJD组IL6含量低于脑炎组。

　　3 讨论

　　CJD是人类最常见的由蛋白粒子引起的致死性海绵状脑病，于l921年首先由Creutzfeldt和Jakob报道。目前该病发病率有逐年上升趋势，并且死亡率较高〔6，7〕。目前认为该病是由于脑内PrPSc的沉积引起神经细胞死亡所致，PrPSc沉积导致的胶质细胞活化是神经细胞死亡的主要原因，活化的胶质细胞释放的细胞因子在神经元变性、死亡的过程中起着重要作用。现已证实CJD患者、牛海绵状脑病和鼠的实验性蛋白粒子病脑中存在活化的小胶质细胞，并且活化的小胶质细胞具有释放炎症介质的能力〔8〕。同时研究证实活化小胶质细胞释放的细胞因子存在于CJD病的全过程〔9〕，因此，炎症反应被视作蛋白粒子病的显著标志〔5〕。

　　IL6属前炎症细胞因子，是由184个氨基酸组成的糖蛋白，可被多种细胞产生，包括纤维母细胞、内皮细胞、单核吞噬细胞、T和B淋巴细胞、血管平滑肌细胞等。主要生物学作用为：促进B细胞增殖分化和分泌抗体;在IL2存在下，可促进成熟和未成熟T细胞分化为CTL;促进肝合成急性期蛋白;作为内源性致热源，参与炎症反应;对神经组织和造血系统具有广泛效应;具有抗瘤效应，也可增强NK细胞及CTL的杀瘤活性。正常情况下脑组织IL6含量很低，中枢神经系统感染时脑脊液中含量明显升高，并且与感染的严重程度有关〔10〕。本实验中也发现脑炎患者脑脊液中IL6水平显著高于CJD组和对照组(P<0.01)。Bate等研究体外培养的小胶质细胞发现，在人蛋白粒子82146肽段作用下小胶质细胞产生大量的IL6，导致与其共同培养的神经元死亡〔11〕。说明IL6在蛋白的发病过程中起着重要的作用，但尚未明确CJD中的作用机制。本实验发现，CJD组IL6含量显著高于对照组，但显著低于脑炎组(P<0.01)。这可能是脑炎时，脑膜局部对抗原刺激细胞免疫反应更为强烈有关。IL6作为炎症起始阶段的重要致炎因子，它的升高可促使神经细胞释放多种活性氨基酸，后者进一步刺激神经细胞产生一氧化氮、活性氧和毒性氮氧化物，最终导致线粒体功能障碍，造成脑水肿、颅高压，脑缺氧及神经元细胞的死亡〔12〕。因此，笔者认为IL6的升高可能在蛋白粒子病中枢神经系统神经元变性、死亡过程中具有重要的作用。

　　在中枢神经系统中，细胞因子根据作用可分为促炎性细胞因子(IL1、IL6、IL12和TNFα)和抗炎性细胞因子(IL4，IL10，IL13)。它们之间常互为因果，或互相协同、促进，或互相拮抗、制约，构成了复杂的调节网络，发挥一个整体调节作用。并且促炎因子和抗炎因子的表达平衡是受严格调控的〔13〕。van Everbroeck等〔9〕研究发现，CJD炎症反应早期，促炎性细胞因子IL1β含量增加。樊丽超等发现CJD早期脑脊液中，抗炎性细胞因子IL4含量增加〔14〕。本实验中CJD早期脑脊液中IL6升高。因此，笔者认为蛋白粒子病中促炎性细胞因子和抗炎性细胞因子的相互制约，相互作用与疾病的进展、持续性和慢性化有关。促炎因子和抗炎因子的不平衡表达是疾病发生发展的关键。

　　【参考文献】

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