苍柏湿毒清对小鼠阴道解脲支原体定植干预研究

解脲支原体目前是引起非淋菌性尿道炎、男性不育、女性不孕、宫颈炎及盆腔炎等多种疾病的主要病原体[1]。苍柏湿毒清治疗解脲支原体引起的非淋菌性尿道炎、宫颈炎临床疗效明确。本实验拟对小鼠解脲支原体感染的实验动物模型干预的研究,旨在比较苍柏湿毒清干预前、干预后小鼠解脲支原体性阴道炎造模成功率。

1实验材料

1.1实验对象

BALB/C小鼠40只,清洁级.鼠龄8~10周,体重(20±2g),均购自北京维通利华实验动物技术有限公司,饲养于北京中医药大学东方医院实验中心动物实验室;解脲支原体血清8型(ATCC816);由北京中原合聚公司代购自ATCC(美国模式培养物集存库),复苏、传代后各用。

1.2试剂

苯甲酸雌二醇购自天津金耀氨基酸有限公司;解脲支原体液体培养基购自珠海丽珠试剂有限公司。

1.3中药苍柏湿毒清

苍柏湿毒清制剂由炒苍术、黄柏、生黄芪、柴胡等地道药材组成,制各为含生药1g/ml的水提药液,由北京中医药大学东方医院制剂室制各。A1组、A2组用药剂量:每次0.21nl,每日2次灌胃。

2实验方法

2.1动物分组

BALB/C小鼠送到饲养室后首先进行解脲支原体检测,将检测均为阴性的BAI'B/C小鼠们只随机分成5组9即:A1组(中药干预组)8只先给予苍柏湿毒清浓缩液灌胃,每次0.21nl,每天2次,连续7d,其后予解脲支原体性阴道炎造模4周;B1组先给予生理盐水0,211f灌胃,每天2次,连续7d,其后予解脲支原体性阴道炎造模4周;蛇组(中药干预组)8只BALB/C小鼠,先予解脲支原体性阴道炎造模4周,造模成功后给予苍柏湿毒清浓缩液灌胃,每次0.211J,每天2次9连续7d;B2组先予解脲支原体性阴道炎造模4周,造模成功后给予生理盐水0,2碱灌胃,每天2次,连续7d;C组8只BALB/C小鼠,既不进行造模,亦不进行中药干预,清洁级饲料喂养。分好组后让其适应环境一周。

2.2菌液制备

将解脲支原体血清4型冻干菌株(ATCC歹816)用液体培养基溶解稀释,在37℃条件温箱内培养zh,培养基颜色由黄变浅粉色即复苏成功,然后传代,传至第三代时配制成105cct/ml的浓度备用。

2.3 BALB/C小鼠解脲支原体性阴道炎造模

2.3.1雌二醇处理每周在BAIJB/C小鼠的皮下注射1次苯甲酸雌二醇注射液,0.2ml,共4次。

2.3.2菌液接种在第2次注射雌工醇后,每天用无菌输液软管向BALB/C小鼠阴道注人预先提取的Uu标准株菌液20u1,连续注人3d。

2.3.3检测第4次注射完雌二醇后,用男用阴拭子取BALB/C鼠阴道分泌物,放人解脲支原体鉴别培养基中在37℃条件下培养,若培养基颜色变红即表明支原体检测阳性,造模即成功。

2.4统计方法采用SPSs19.0统计软件,计数资料采用连续/检验。

3实验结果

3.1动物的一般情况

BALB/C小鼠注射雌二醇后比注射前兴奋9接种菌液后第一周精神开始萎靡不振,毛发失去光泽,进食减少;造模成功后BALB/C小鼠阴道红肿、分泌物增多;中药灌胃干预后,BALB/C小鼠精神欠佳,肢体倦卧,进食减少。

3.2支原体检测结果支原体检测结果见表1。

4讨论

苍柏湿毒清干预前、后均能降低解脲支原体造模成功率,苍柏湿毒清是预防、治疗解脲支原体感染的有效药物,其干预解脲支原体定植的机制仍需进一步研究,其作用机理可能与直接杀灭或抑制解脲支原体生长、繁殖;可能与改变阴道局部环境,缓解局部炎症,修复局部黏膜屏障,改变解脲支原体的致病环境有关,起到预防解脲支原体感染的作用。多篇文献报道单味中药或中药复方针对解脲支原体感染的有效性,仍需从治疗或预防解脲支原体感染两方面进行研究,其作用机制有待进一步探讨。

参考文献：

[1]曹玉璞,叶元康.支原体与支原体病[M].北京:人民卫生出版社,2000.80-84,121-129.

[2]孙源梅,李元文,张颖纯.解脲支原体造模问题探讨[J].中国性科学,2012,(24-25).