艾滋病合并结核病与单纯结核病患者机体氧化还原态比较

　　目前结核病仍然是严重危害人民群众健康的传染病，被列为我国重大传染病之一。结核是艾滋病患者最常见的一种机会性感染，也是致死的主要原因之一，约占20-50%，其病死率达30%一50%。因而，探讨艾滋病合并结核病治疗新方法已成为目前临床研究的新热点。　　已有研究表明，结核病患者机体存在氧化应激，我们前期研究结果亦显示艾滋病患者机体氧化还原态呈向氧化方向偏移。但是，艾滋病合并结核病与单纯结核病患者机体氧化还原态有何差异，目前尚未见相关报道。。本研究分别对40例艾滋病合并结核病和40例单纯性结核病患者机体氧化还原态进行检测、比较，以期为艾滋病合并结核病治疗打开新视角。　　材料和方法　　一、主要仪器和试剂　　1.主要仪器设备低温冷冻离心机(20PR-52D日本HI-TACHI)，超低温保存箱(MDF-382E日本三洋)，离心机(TDL-5-A，上海安亭)，高速冷冻离心机(1-15K，美国Sigma.　　2.主要试剂　　(1)还原型谷胧甘肤(GSH)和氧化型谷胧甘肤(oxidizedglutathione,GSSG)检测试剂盒由武汉巴菲尔生物有限公司提供，产品编码为S0053。按照试剂盒说明书要求，配制相关试剂。　　(2)烟酞胺腺凛吟二核营磷酸(Nicotinamideadeninedi-nucleotidephosphate,NADP和NADPH试剂盒。试剂盒由武汉巴菲尔生物有限公司提供。按照说明书要求配制相关试剂。　　二、研究对象及分组　　1.艾滋病合并结核病组研究对象为2010年7月-2012年10月于武汉市医疗救治中心就诊的患者，共40例。　　艾滋病诊断参照中华医学会感染病学分会艾滋病学组制定的《艾滋病诊疗指南》中艾滋病诊断标准。抗HIV抗体检测结果由武汉市疾病预防控制中心进行确认实验。结核病诊断按中华医学会结核病学会的结核病诊断标准040例患者中，男性32例，女性8例;年龄24一55岁，平均年龄41.3岁。其中继发型肺结核21例，占52.5%，肺结核合并结核性胸膜炎9例，占22.5%，淋巴结核6例，占15.0%，结核性脑膜炎3例，占7.5%，结核性肛屡1例，占2.5%。　　2.单纯结核病组　　研究对象为2010年7月一2012年10月于武汉市医疗救治中心就诊的单纯性结核病患者共40例，男性26例，女性14例;年龄18-60岁，平均年龄42.1岁。其中继发型肺结核26例，占65.0%，肺结核合并结核性胸膜炎6例，占15.0%，淋巴结核3例，占7.5%，结核性脑膜炎3例，占7.5%，结核性肛痔2例，占5.0%。3.对照组以30位健康体检者血浆为对照组。　　三、研究方法　　1血标本采集、贮存取研究对象清晨空腹肘静脉血3ml，放人预冷肝素抗凝管中，低温离心后，将血浆贮存于-70℃低温保存箱中，备测NADPH和NADP',GSH和GSSGo所有标本测定前需置于室温复溶。　　2.GSH和GSSG测定　　严格按照试剂盒说明要求，应用比色法测定血浆GSH和GSSG水平。　　3.NADPH和NADP+测定　　严格按照试剂盒说明，应用酶联免疫吸附法测定血清NADP'/NADPH水平。　　四、统计学处理所获得数据采用SPSS11.5统计分析软件包进行统计分析，计量资料以无士、表示，组间比较采用方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。　　结果　　一、血浆中谷胧甘肤氧化还原态　　各组血浆中GSH,GSSG,GSH/GSSG比值如表1所示。　　二、血浆中辅酶11氧化还原态　　各组血浆中NADPH,NADP',NADPH/NADP十比值如表2所示。　　讨论　　HIV感染是结核病最主要的危险因素，结核病是HIV/AIDS最常见的机会性感染，可导致AIDS患者发生其他机会性感染的几率和死亡率明显升高。　　我们之前的研究结果证实，HIV/AIDS患者机体氧化还原态向氧化方向偏移，而且其偏移程度与疾病进展呈正相关。而AIDS患者细胞内GSH耗竭，其结核病发生率远远高于健康个体。Vishwanath等研究发现，结核病患者外周单核细胞和红细胞中GSH水平显著下降。可见，无论是结核病还是AIDS患者，其疾病的发生发展均与机体氧化还原情况有关。　　本研究结果显示，无论是依据GSH浓度还是依据NAD-PH浓度计算机体氧化还原态，AIDS合并结核病患者与单纯性结核病患者氧化还原态均向氧化方向偏移，而且AIDS合并结核病患者较单纯结核病患者机体氧化还原态向氧化方向偏移更为明显，考虑可能是由于AIDS患者与结核病患者机体氧化还原态向氧化方向的偏移存在一定的叠加作用。进一步证实了机体的氧化还原态改变是AIDS发生发展的重要机制之一，与AIDS疾病进展具有一定的相关性，从而改变机体氧化还原态的角度，为AIDS合并结核病的治疗提供依据。　　参考文献　　Tsao TC,Chen CH,Hong JH. Shifts of T4/T8 T lym-phocytes from BAL fluid and peripheral blood by clinical gradein patients with pulmonary tuberculosis[J].Chest,2002.1285-1291.　　中华医学会感染病学分会艾滋病学组. 艾滋病诊疗指南[J].中华传染病杂志,2006,(02):133-144.doi:10.3760/j.issn:1000-6680.2006.02.021.　　中华医学结核病分会. 中华结核病分类法[J].中华结核和呼吸杂志,1998,(12):716-717.　　韩晓群,熊悦安,周虹. HIV/AIDS患者机体氧化还原态研究[J].中华实验和临床感染病杂志(电子版),2012,(02):144-146.doi:10.3877/cma.j.issn.1674-1358.2012.02.015.　　韩晓群,吴建红,伍仕敏. HIV/AIDS患者机体氧化还原态与CD4细胞计数相关性分析[J].武汉大学学报(医学版),2012,(03):401-403.　　Vishwanath V,Ariel Millman,Marwa Salman. Glutathione levels and immune responses in tuberculosis patients[J].Microbial Pathogenesis,2008.255-261.