2型糖尿病患者甘露聚糖结合凝集素和补体C3、C4、备解素的表达及其意义

　　作者：马西文 刘永铭 薛芙珍 尚东亚 作者单位：兰州大学第一医院老年病科，甘肃兰州 730000

　　【摘要】 目的 探讨2型糖尿病患者甘露聚糖结合凝集素(MBL)、C3、C4和备解素(Pf)水平的变化及意义。方法 2型糖尿病患者40例，正常对照组24例。测定循环血清中MBL、C3、C4和Pf水平。同时测定糖脂代谢指标及尿微量白蛋白排泄率。结果 2型糖尿病患者血清中MBL和Pf水平无明显变化，C3和C4水平增高。糖化血红蛋白和甘油三酯(TG)是MBL的独立预测因素，TG、体重指数(BMI)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)进入C3回归方程，TG 是C4的独立预测因素。结论 C3、C4水平与肥胖及脂肪代谢异常有关， MBL与2型糖尿病肾脏并发症无直接关系。

　　【关键词】 2型糖尿病;尿微量白蛋白排泄率;甘露聚糖结合凝集素;C3;C4;备解素

　　糖尿病血管病变是糖尿病患者致死致残的主要原因，其发病机制至今尚未完全阐明。甘露聚糖结合凝集素(MBL)是补体固有成分之一，国外研究发现，在1型糖尿病患者中其水平增高，而且与尿微量白蛋白排泄率相关 〔1〕。另外，糖尿病患者血清中C3水平升高〔2〕，组织中补体及补体激活物沉积〔3，4〕，提示补体系统在糖尿病血管病变中发挥重要作用。但在2型糖尿病患者中MBL水平的研究则未见报道。本文通过观察2型糖尿病患者MBL 、C3、C4和备解素(Pf)水平的变化并分析与糖脂代谢及尿微量白蛋白排泄率之间的关系，探讨其在糖尿病微血管病变中的作用。

　　1 对象与方法

　　11 对象及分组

　　糖尿病组， 依据WHO 1999年提出的2型糖尿病诊断标准，收集2005年3月至2005年7月我院门诊及住院2型糖尿病患者40例， 男24例，女16例，平均年龄(634±109)岁。其中UAER<20 μg/min(中位数84 μg/min)者22人(糖尿病1组)，UAER 20～200 μg/min(中位数429 μg/min)者18人(糖尿病2组);排除有自身免疫性疾病，恶性肿瘤，肝脏疾病，近6个月内有手术外伤史;急性感染、过敏或其他应激情况。对照组，24名，男13人，女11人，平均年龄(643±70)岁，均来自健康体检者。

　　12 方法

　　121 标本采集

　　受试者过夜禁食10 h以上，晨取空腹肘静脉血留取标本。分离血清及血浆，当日送验血糖和血脂。余血清置-80 ℃冰箱保存。

　　122 糖脂代谢指标测定 血糖测定采用葡萄糖氧化酶法;血脂测定采用酶法;糖化血红蛋白(HbA1c)测定采用乳胶免疫凝集抑制实验，试剂盒购自Bayer 公司;尿微量白蛋白排泄率：取过夜尿，用免疫比浊法测定微量白蛋白含量，然后计算每分钟尿微量白蛋白排泄率，试剂盒购自Bayer 公司。

　　123 血清MBL、C3、C4、Pf测定

　　取-80 ℃冰箱保存血清同一批测定。MBL采用ELISA法，批内变异为158%，试剂盒购自丹麦Antibodyshop公司，试剂批号为MM0401CE;C3、C4和Pf采用免疫散射比浊法，使用美国Beckman公司Array 360全自动特定蛋白分析系统，试剂购自爱尔兰Beckman Coulter公司，批号分别为C3/T403024、C4/T402171、Pf/T307013。

　　13 统计学处理

　　计量资料用x±s表示。非正态资料取对数后近似正态，均数间的比较用独立样本t检验或方差分析，变量间的关系用直线相关分析及多重线性回归分析。采用SPSS 100统计软件。

　　2 结果

　　21 各组患者临床情况比较

　　2型糖尿病组体重指数(BMI)、腰围、腰围/臀围、收缩压、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖、血TG水平较对照组升高，差异有显著性;年龄、身高、体重、臀围、舒张压、血尿素氮、肌酐、TC、LDLC、HDLC等指标两组间无明显差异，见表1。表1 各组患者临床情况比较(略)

　　22 各组MBL和C3、C4、Pf的比较

　　与对照组相比，2型糖尿病患者MBL、Pf水平差异无统计学意义，而C3、C4水平明显升高，且差异有显著性(P<005)，糖尿病1组和2组比较，MBL和C3、C4、Pf水平差异均无显著性，见表2。表2 各组MBL和C3、C4、Pf水平的比较(略)

　　23 2型糖尿病患者MBL、C3、C4、Pf与糖脂代谢及临床指标的相关性分析

　　直线相关分析显示，MBL水平与TG负相关，与HbA1c正相关，C3水平与TG、LDLC、BMI、腰围、腰围/臀围正相关，C4水平与TC、TG正相关，见表3。表3 2型糖尿病患者MBL、C3、C4、Pf与糖脂代谢及临床指标的相关性分析(略)

　　多重线性回归分析显示，HbA1c和TG是MBL的独立预测因素，回归方程为：MBL=242647+357192×HbA1c480639×TG;TG、BMI、LDLC进入C3方程，回归方程为：C3=0114+0113×TG+0033×BMI+0086×LDLC;TG 是C4的独立预测因素，回归方程为：C4=0213+0073×TG。

　　UAER与糖尿病病程、肌酐呈正相关，与补体成分MBL、C3、C4、Pf不相关，与血脂及血糖指标亦无相关关系(表3);多重线性回归分析显示，糖尿病病程、肌酐是UAER的独立预测因素，回归方程为：UAER=-79945+7508×病程+1151×肌酐。

　　3 讨 论

　　补体系统是存在于血清中由多种糖蛋白组成的蛋白酶解系统，根据生物学功能分为补体固有成分、补体调节蛋白和补体受体。在机体抗感染、免疫调节、免疫监视中发挥重要作用，特定情况下也可以导致组织损伤。近年来研究发现，补体成分及活化产物C5b9广泛沉积在糖尿病患者血管病变组织中 〔3，4〕，C5b9水平与组织病变的严重程度相关〔3〕，提示补体活化参与糖尿病血管病变的发生。国外研究发现，2型糖尿病患者和糖耐量减低者C3升高〔2，5〕，C3是心脏性死亡、再发性心梗等严重心脏事件的独立预测因素〔6〕。本实验发现，2型糖尿病患者血清中C3、C4升高。直线相关分析显示，C3水平与TG、LDLC、BMI、腰围、腰围/臀围正相关，C4水平与TC、TG正相关，与国外报道一致〔7，8〕。

　　本研究发现TG、LDLC、BMI、腰围、腰围/臀围是C3的独立影响因素，提示脂代谢异常和肥胖可影响C3的形成。基础研究发现，乳糜微粒可刺激脂肪细胞分泌C3〔9〕，C3的裂解片段乙酰化刺激蛋白(Acylation stimulating protein，ASP)能加强脂肪酸的再酯化，促进脂肪细胞、成纤维细胞合成TG，清除血液中的自由脂肪酸，使肝脏VLDL生成减少而降低血脂。因此，C3升高可能是机体对血脂异常的一种自我调节反应。肥胖者脂肪组织增加，Koistinen〔10〕等发现，肥胖者脂肪细胞C3分泌亦增加。因此，脂代谢紊乱、肥胖是2型糖尿病C3、C4升高的重要原因。

　　MBL属于补体固有成分，是肝脏产生的急性期蛋白。MBL能结合到内皮细胞非酶糖化产物，激活补体〔11，12〕。非酶糖化是糖尿病的重要病理改变，因此，MBL与糖尿病血管病变的关系引起了人们关注。Hansen〔1〕等研究发现，1型糖尿病患者血清中MBL浓度升高，并且与尿微量白蛋白排泄率明显正相关。Hansen 〔13〕等在另一项研究中也证实，1型糖尿病合并大小血管病变患者体内MBL水平明显升高，提示在糖尿病血管病变的进程中，MBL发挥了一定的作用。但在2型糖尿病患者中MBL水平研究国内外未见报道。本研究发现，与对照组相比，糖尿病患者体内MBL水平无明显改变。根据尿微量白蛋白排泄率值(<20 μg/min 及20～200 μg/min将2型糖尿病患者分组后，MBL水平仍无差异。直线相关分析显示，MBL水平与HbA1c正相关，与TG负相关。多重线性回归显示HbA1c和TG是MBL的独立预测因素，表明糖脂代谢可能影响2型糖尿病患者MBL的水平。但与Hansen等在1型糖尿病中研究的结果不同，我们发现2型糖尿病中MBL水平与尿微量白蛋白排泄率不相关。已有研究发现，MBL水平受基因多态性影响〔14〕，2型糖尿病是多基因遗传相关疾病，其MBL水平是否受遗传等因素的影响还需进一步研究。本研究发现，尿微量白蛋白排泄率与糖尿病病程呈正相关,符合糖尿病发展规律。

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