鼠双微粒体-2基因沉默对人肝癌HepG2细胞移植瘤的抑制作用
发表时间：2015-01-30 浏览次数：1959次
赵燕颖,李亚刚,孙远杰等.鼠双微粒体-2基因沉默对人肝癌HepG2细胞移植瘤生长的抑制作用[J].中华肝脏病杂志,2013,21(3):213-217
癌,肝细胞,基因沉默,RNA,小分子干扰,基因,p53,鼠双微粒体-2基因
赵燕颖,李亚刚,孙远杰,刘渤鹏,杨泽成,张舵舵,赵春燕
1.吉林大学第四临床医院消化内科,长春,130011 2.吉林大学第一临床医院外科 3.吉林大学
2013
213-217
知网,万方
目的 构建鼠双微粒体-2基因(MDM2)靶向小分子干扰RNA (siRNA)质粒,研究其对人肝癌HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,探讨其在肝癌基因治疗中的可行性.方法 构建MDM2的siRNA真核表达载体pSilencer-siRNA-MDM2 (siMDM2),建立裸鼠荷瘤模型,分别给予阴性对照质粒和siMDM2质粒处理.监测肿瘤生长变化,RT-PCR、Western blot方法检测MDM2及p53 mRNA和蛋白的表达变化.正态分布数据的组间比较用单因素方差分析及LSD检验.结果 裸鼠体内实验结果显示,转染siMDM2-1和siMDM2-2组与对照组相比,肿瘤增长受到明显抑制,抑瘤率分别为60.6％和54.6％.RT-PCR和Westem blot结果示MDM2的mRNA和蛋白质表达下调,而p53的mRNA和蛋白质表达上调.与空白组比较,转染siMDM2-1和siMDM2-2组的MDM2mRNA表达分别下调62.8％和61.5％,MDM2蛋白表达分别下调60.7％和59.5％;p53 mRNA表达分别上调47.1％和45.6％,p53蛋白表达分别上调45.9％和44.3％,差异均具有统计学意义(F值分别为75.099、47.860、17.676和235.770,P值均＜0.01).结论 siRNA沉默MDM2基因能抑制人肝癌HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,可能与其在体内有效下调MDM2和上调p53的mRNA及蛋白质表达有关.
