B区缺失的人凝血因子Ⅷ基因在293T细胞表达
发表时间:2009-08-03 浏览次数:639次
凝血因子,基因
程海,徐开林,孙海英,杜冰,曾令宇,鹿群先,何徐彭,潘秀英
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知网,万方
本研究目的是构建含有人凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因的慢病毒载体,观察其在293T细胞中的表达情况。 用限制性内切酶法获得B区缺失的人凝血因子Ⅷ基因(BDDhFⅧcDNA)片段,将其克隆至慢病毒载体pXZ208,构建了慢病毒表达载体pXZ208BDDhFⅧ;用限制性内切酶法鉴定载体的连接方向,用磷酸钙共沉淀法将重组质粒pXZ208BDDhFⅧ分别与包装质粒ΔNRF、包膜蛋白质粒VSVG共转染293T包装细胞,包装后感染293T细胞,并以pXZ171作为对照。