AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达
发表时间:2010-08-30 浏览次数:325次
AFP启动子; HepG2细胞; 靶向表达; 单纯疱疹病毒-胸腺嘧啶激酶1
岳殿超1, 李宝金
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知网,万方
【目的】 构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。 【方法】 采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript II KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK。对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明,该启动子含300 bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符。限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已