持续高表达CXC趋化因子受体-4重组慢病毒颗粒的包装鉴定及细胞迁移
发表时间:2014-12-11 浏览次数:1356次
王奇,冯世庆,孔晓红等.持续高表达CXC趋化因子受体-4重组慢病毒颗粒的包装鉴定及细胞迁移[J].中华实验外科杂志,2013,30(3):605-608.
CXC趋化因子受体-4 知识脉络 基质细胞衍生因子-1α 知识脉络 慢病毒 知识脉络 细胞迁移 知识脉络
王奇 冯世庆 孔晓红 刘畅 张彬 张亮 张衍军
300052,天津医科大学总医院骨科
2013
605-608.
知网,万方
目的 观察持续高表达CXC趋化因子受体-4(CXCR4)慢病毒颗粒在细胞迁移的作用.方法 从大鼠大脑组织提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)得到大鼠cDNA文库,以cDNA为模板,经过PCR获得CXCR4基因,测序正确后连接到pCDH1-MCS-EF1-copGFP(慢病毒载体质粒),与第3代慢病毒其余辅助质粒pMDLG/pRRE、pRsv-Rev及pVSV-G按照1∶4∶ 1∶1共转染293T细胞包装慢病毒,超离慢病毒,测定病毒滴度,感染Hela细胞72h与14 d后,分别观察Hela细胞荧光,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定Hela细胞表达大鼠CXCR4 mRNA含量,Transwell小室观察细胞迁移.