shRNA慢病毒转染串珠素对大鼠硬膜外瘢痕中成纤维细胞增殖能力的影响
发表时间:2014-11-18 浏览次数:1293次
马青跃,褚言琛,王进等.shRNA慢病毒转染串珠素对大鼠硬膜外瘢痕中成纤维细胞增殖能力的影响[J].中华创伤骨科杂志,2013,15(3):252-255
RNA 转染 成纤维细胞 瘢痕 慢病毒属
马青跃 褚言琛 王进 候庆先 袁万青 杨慧英 邹云雯
266003,青岛大学医学院附属医院骨外科
2013
252-255
知网,万方
目的 通过研究经shRNA慢病毒转染串珠素的大鼠硬膜外瘢痕组织成纤维细胞的增殖能力,探讨其对硬膜外瘢痕组织形成的影像. 方法 30只Wistar大鼠行椎板切除术,建立模型,于培养4周后提取硬膜外瘢痕组织.通过组织块贴壁法培养硬膜外瘢痕组织中的成纤维细胞并将细胞分为3组:未转染组(空白对照组)、荧光蛋白(GFP)慢病毒转染组(GFP组)和shRNA慢病毒转染组(shRNA组,内含GFP).成纤维细胞转染成功后,分别通过Western-blot、荧光定量PCR及MTT法检测3组的成纤维细胞的RNA、蛋白质表达及细胞增殖的差异. 结果 Western-blot检测显示shRNA组串珠素蛋白明显低于空白对照组和GFP组.荧光定量PCR检测显示shRNA组串珠素RNA表达低于空白对照组和GFP组.MTT检测显示0h各组吸光度(A)值差异均无统计学意义(P>0.05),24 ~ 96 hshRNA组吸光度值(A)低于空白对照组和GFP组,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 经shRNA慢病毒转染串珠素能抑制大鼠硬膜外瘢痕组织成纤维细胞的增殖.