一种改良式质粒DNA提取方法的建立与应用
发表时间:2010-06-10 浏览次数:402次
质粒DNA;提取;酶切;转染
张林琳,李磊,李翔
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知网,万方
目的 建立一种稳定、可靠的质粒DNA提取改良方法,探讨其在分子生物学实验研究中的应用价值。方法 将含有目的质粒的菌株扩增后,运用改良后的碱裂解法进行质粒DNA小量提取,微量核酸仪测定提取质粒DNA的产量及纯度;采用琼脂糖凝胶电泳、内切酶酶切及质粒转染真核细胞鉴定提取质粒DNA的质量及转染效率。结果 改良式质粒提取方法获得质粒DNA产量为3.2mg/L菌液,A260/280=1.91;内切酶酶切完全;质粒DNA以超螺旋结构为主;真核细胞转染效率为20%左右。结论 改良式质粒DNA抽提方法操作简单、实用,获得