人脑胶质瘤特异抗原肽白介素-13α2受体重组表达质粒的构建
发表时间:2009-06-30 浏览次数:677次
俞文桥
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知网,万方
目的:构建白介素-13α2受体(IL-13Rα2)重组表达质粒,为检测IL-13Rα2抗原肽的表达奠定实验基础。方法:利用RT-PCR法从U251胶质瘤细胞株中获得IL-13Rα2目的基因,并与克隆质粒pMD19 Simple T载体连接转入DH5α菌克隆,用Xho I和Hind III将目的基因从克隆质粒上切下并与同样双酶切后的表达质粒pET-28a连接,转入BL21(DE3)菌,提取重组质粒进行酶切及测序鉴定。结果:目的基因IL-13Rα2与表达质粒pET-28a连接,成功构建pET-28a-IL-1