《普通外科学》
慢病毒介导LIGHT基因在结直肠癌细胞HCT116中的表达
发表时间：2014-11-26 浏览次数：1225次
引 用：
王海波,隋爱华,刘世海等.慢病毒介导LIGHT基因在结直肠癌细胞HCT116中的表达[J].中华实验外科杂志,2013,30(3):441-443.
关 键 词：
结直肠癌 慢病毒 基因转染
作者：
王海波[1] 隋爱华[2] 刘世海[2] 骆铮[1] 李传智[1] 刘
作者单位：
266003,青岛大学医学院附属医院普外科 266003,青岛大学医学院附属医院中心实验室
出版年份：
2013
期刊页数：
441-443
收录者：
知网,万方
摘要：
目的 观察慢病毒介导的LIGHT基因对结直肠癌细胞HCT116的作用.方法 将LIGHT基因克隆至慢病毒表达载体中,在293T细胞中进行病毒的包装.慢病毒以不同的感染复数(MOI)感染HCT116细胞,通过绿色荧光蛋白的表达和细胞活性筛选最适MOI.重组慢病毒感染HCT116细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞中LIGHT基因和蛋白的表达.噻唑蓝(MTT)实验检测细胞的生长活性.结果 经酶切和测序鉴定证实重组慢病毒载体构建成功.重组慢病毒的滴度为1.96×108 TU/ml.慢病毒MOI为2感染HCT116,转染效率可达92％.慢病毒感染24、48、72、120 h后,细胞中LIGHT mRNA的表达量分别是空白对照组的19.03、68.59、94.35和-11.71倍,明显高于空白对照组和慢病毒对照组(P＜0.05)；
