介导MDR1的RNAi腺病毒载体的构建
发表时间:2009-06-24 浏览次数:527次
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知网,万方
目的 介导MDR1的RNAi腺病毒载体, 探讨RNA干扰MDR1基因对人肝癌细胞的作用。方法 根据MDR1mRNA序列构建表达MDR1mRNA特异的shRNA的腺病毒穿梭质粒pshuttle MDR1。与腺病毒载体体内重组为pAd MDR1后转染人肝癌细胞SMMC-7721, 以 FCM检测细胞表面膜蛋白Pgp表达阳性率, 以共聚焦显微镜检测细胞内Rh123的潴留,Western Blot检测Pgp蛋白量的变化。结果 构建成pshuttleMDR1经限制性酶切和PCR证实与设计一致, 将pAd