重组人硫氧还蛋白及其活性检测
发表时间:2010-03-17 浏览次数:515次
基因;硫氧还蛋白;DNA,重组
张一娜 武小薇 邹宁
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知网,万方
目的:采用基因克隆技术及原核表达技术重组人硫氧还蛋白(TRX),并证实重组TRX具有二硫键还原酶活性。方法:从人睾丸互补DNA(cDNA)文库克隆出人的TRX cDNA,采用限制性酶切方法构建pQE-32/TRX原核表达质粒,并在大肠杆菌M15中进行稳定表达,应用TALON 金属螯合树脂纯化重组人TRX蛋白。用Western印迹方法鉴定重组人TRX,并检测TRX的二硫键还原酶活性。结果:(1)克隆的人TRX cDNA序列与基因库(GeneBank)(X54539)序列比较,可译框架完全相同;(2)原核表达