利用In-Fusion技术构建存活素-增强型绿色荧光蛋白融合基因重组慢病毒表达载体
发表时间:2010-03-15 浏览次数:523次
基因;克隆细胞;基因,病毒
林朝贵 范林 陈良龙
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知网,万方
目的:本研究以构建存活素-增强型绿色荧光蛋白(Survivin & eGFP)融合基因慢病毒表达载体(p-GCFU-Survivin)为例来探讨In-Fusion克隆技术在常规载体构建中的应用价值。方法:根据In-Fusion技术原理,克隆引物设计时,在Survivin同源序列的两侧分别引入经Age I线性化的载体p-GCFU两端各15个碱基,将以此引物扩增的聚合酶链式反应(PCR)产物与线性化p-GCFU用In-Fusion交换酶在室温下作用30min,使Survivin特异性扩增产物两端的序列与线性化