僵蚕抗凝成分对血小板聚集的抑制效应
发表时间：2010-04-20 浏览次数：498次
作者：彭延古 作者单位：湖南中医药大学，长沙 410007
关键字:僵蚕抗凝成分对血小板聚集的抑制效应
Effect of Anticoagutant Component in Bombyx Batryticatus on Platelet Aggregation
PENG Yangu , LI Ludan ， LEI Tianxiang , FU Canyun，LUO Yue
(TCM University of Hunan, Changsha 410007，China)Abstract: Objective To assess the effect of the anticoagulant components in bombyx batryticatus(ACIBB) on platelet aggregation.Methods Platelet aggregation induced by ADP or thrombin was determined in vitro and vivo.Results In contrast to normal saline ,both the inhibitory effects of aspirin and ACIBB were in dosedependent manner . But the difference of the antiplatelet effect between aspirin and ACIBB was not statistically significant.Conclusion The inhibitory effect of ACIBB on platelet aggregation may be one of the antithrombotic mechanicms for bombyx batryticatus.Key words: Bombyx batrycatus; Aspirin; Platelet aggregation
血小板聚集是引起血栓形成的关键因素[1]。所以抗血小板聚集是防治体内动脉血栓形成的根本措施之一。僵蚕是一种常用的活血化瘀中药，临床资料表明它对中风有较好的疗效。药理实验表明僵蚕除了具有拮抗凝血酶的作用外，还具有抗因子Xa和抑制体内外血栓形成的作用[2]。为了探讨僵蚕抗血小板凝聚作用，我们从僵蚕对血小板聚集ADP和凝血酶激活途径抑制作用方面进行研究，试图为进一步研究僵蚕抗实验性血栓作用机理提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂
1.1.1 药物 僵蚕从湖南省药材公司购入，鉴定后经凝胶过滤和离子交换层析分离纯化僵蚕抗凝活性成分。凝血酶(上海太阳生物技术公司)，ADP(上海生化研究所生产)，阿司匹林(ASA)(湖南南光药业有限公司产品)。
1.1.2 仪器 PAN2型PPD自动平衡血小板聚集仪(上海分析仪器场生产)。
1.1.3 实验动物 小白鼠，体重30~35 g，雌雄兼有(湖南中医学院动物室提供)。
1.2 实验方法
1.2.1 小白鼠体外给药 从小白鼠眼眶取血1.0 ml，离心分离富血小板血浆(PRP)和乏血血小板血浆(PPP)，分别加入不同浓度的ACIBB 10 μl，温育2 min，加入凝血酶10 u/ml 10 μl升或200 mmol/L的ADP 10 μl，描记5 min血小板聚集曲线。空白对照组以等量生理盐水代替ACIBB，同法操作。凝聚抑制率按下公式计算：血小板抑制率(%)=(对照管最大聚集率-给药管最大聚集率)/对照管最大聚集率
1.2.2 小白鼠体内给药 将小白鼠随机分为6组，由尾静脉分别注射僵蚕液0.4 ml和阿司匹林1.0 ml;对照组给生理盐水0.4 ml。30 min后眼眶取血1.0 ml，离心取PRP和PPP，同上法分别测定ADP和凝血酶诱导的血小板凝聚率。
1.2.3 统计学分析 计量资料用均数±标准差(±s)表示，应用SPSS 10.0统计软件进行数据处理，多组数据用单因素方差分析，以P<0.05为具有显著性意义。
2 结 果
2.1 ACIBB体外给药对小鼠血小板聚集的影响 表1和表2结果显示：ACIBB体外给药对ADP、凝血酶诱导的小鼠血小板聚集均有明显的抑制作用，其抑制作用强度随ACIBB浓度的增高而增强(P<0.01)。表1 ACIBB体外ADP诱导小鼠血小板聚集的影响表2 ACIBB对体外凝血酶诱导小鼠血小板聚集的影响
3 讨 论
在正常情况下，机体内的凝血与抗凝保持动态的平衡，血小板的质和量相对稳定。血小板是一种多功能的细胞，具有黏附，聚集和释放功能，并且有比较强的促凝活性，在血栓形成与止血过程中起着重要作用[3]。许多血栓性疾病具有血小板凝聚释放功能亢进，微循环血小板聚集增多等现象[4]。血小板聚集在心脑血管血栓栓塞性疾病中具有十分重要的意义。但血小板的聚集受多种因素的影响。目前认为，体内可能引起血小板聚集的物质较多，但多种诱导剂的直接作用相对是较次要的，关键是血小板自身正反馈造成的进一步活化。而血小板自身正反馈主要通过二条途径，即ADP途径和TXA2途径，最终通过降低血小板内cAMP水平并增加细胞内游离钙离子浓度急剧升高[5]。以往的研究发现，僵蚕提取液在体内外均有较强的抗凝和抗血栓形成作用[6]。本实验结果表明，僵蚕在体内外对凝血酶和ADP诱导的血小板聚集均有明显的抑制作用，而且这种抑制作用具有明显的量效关系。环氧合酶抑制剂阿司匹林虽能抑制ADP诱导的血小板聚集，但对凝血酶诱导的血小板聚集却不起作用。而僵蚕对ADP和凝血酶诱导的血小板聚集均有较好的抑制作用。这对于开发多条途径的血小板聚集抑制剂无疑是有意义的。同时提示，僵蚕抗血栓形成与疗效机理可能与抑制血小板聚集有关。
【参考文献】
[1] MARQUARDT L,RUF A,MABNSMANN U,et al.Course of platelet activiation markers after ischemic stroke[J],2002,33:25702574.
[2] 彭延古，李露丹，邓奕辉.僵蚕抗实验性静脉血栓及作用机理的研究[J].血栓与止血学，2001，7(3)：104105.
[3] 刘世成，袁 红，胡小鹰.BQ注射液对动物血小板聚集的影响[J].中国中医急症，2006，15(4)：411413.
[4] 蔡华芳，蒋幼芳.眼络通冲剂对血小板聚集和微循环的作用研究[J].中国现代应药学杂志，2006，23(2)：111113.
[5] NOMURA S.Function and clinal significance of plateletderived microrrticles[J].International Journal of Hematology,2002,74:397404.
[6] 彭延古，葛金文，付灿云，等.僵蚕抗凝活性成分的研究[J].湖南中医学院学报，2000，20(4)：18.
