白血病患者炎症因子、VEGF表达与易栓状态关系的研究

作者：石建霞，顾健，何 斌，孙 梅，马 莉    作者单位：江苏省苏北人民医院，扬州市血液学研究所， 扬州     【摘要】  目的 了解白血病患者表达炎症因子IL6、IL8、IL10与VEGF的水平与意义。方法 以ELISA方法观察30例正常人和47例白血病患者血清IL6、IL8、IL10、VEGF水平。结果 初治患者血清IL6、IL8、IL10、VEGF水平均明显高于对照组(P＜0.05)。部分缓解组IL6、IL8、IL10、VEGF较治疗前明显降低(P＜0.05)，但仍高于对照组。完全缓解时渐趋正常。结论 炎症因子与VEGF在白血病不同病期变化，除了肿瘤性病因所致，也与肿瘤性血管内皮损伤有关，导致肿瘤性易栓状态。这些因子可作为观察白血病患者合并高凝状态观察指标。

    【关键词】  白血病； 炎症因子

    The Relation Between Thrombophilia and Inflammatory Factor, VEGF  in  Leukemia

    SHI Jianxia , GU Jian , HE Bin, SUN Mei , MA Li

    (The Subei People’s Hospital of Jiangsu,  Yangzhou  225001, China)

    Abstract： Objective  The expression and significance of IL6, IL8, IL10, VEGF in acute and chromic leukemia. Methods  The serum leveles of IL6, IL8, IL10, VEGF in 47 patients with acute and chromic leukemia and 30 normal people were measured by ELISA method. Results  Before therapy patients with acute and chromic leukemia had a higher levels of IL6, IL8, IL10, VEGF compared to other groups(P＜0.05). After therapy of acute and chromic leukemia who were partial remission IL6, IL8, IL10, VEGF all decreased compared to before therapy(P＜0.05), but they still had higher levels compared to normal control group. There was no evident difference about IL6, IL8, IL10, VEGF between complete remission and normal control group. Conclusion  The change of inflammatory factor and VEGF in different stage of acute and chromic leukemia is related with tumor etiopathogenisis and tumor thrombophilia state. These factor can be used as the indicators of leukemia patients complicating thrombophilia state.

    Key words：  Leukemia ; Inflammatory Factor

    血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是促血管生成因子，与肿瘤生长、增殖和转移相关, 有促进内皮细胞增殖分裂，影响内皮细胞功能等作用。肿瘤组织的缺血、缺氧可诱导VEGF生成，并刺激释放某些炎症因子。许多肿瘤患者病程中常合并出血或血栓性并发症，干扰疾病的治疗效果，甚至有致死性后果。本文观察白血病患者表达血清黏附因子IL6、IL8和炎症抑制因子IL10、VEGF水平，探讨该类炎症因子和VEGF是否对白血病患者的易栓状态病理基础产生影响。

    1  资料及方法

    1.1  研究对象  对照组30例男15例，女15例，平均年龄32（21～52）岁，均无血栓性疾病史及无避孕药使用史。急慢性白血病组47例，诊断及疗效判定均按张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》，男20例，女17例，平均年龄41（6～75）岁，其中急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）20例，由骨髓增生异常综合征（MDS）转变的ANLL 3例，急性淋巴细胞性白血病（ALL）13例（有3例观察到初治、PR、CR结果），慢性粒细胞性白血病（CML）10例，慢性淋巴细胞性白血病（CLL）1例。

    1.2  标本的采集与保存  所有对象均留取静脉全血于无抗凝剂的含分离胶的塑料试管和含3.8%枸橼酸钠塑料试管内，按实验要求分离血浆和血清。标本冻存于-80℃冰箱集中待测。

    1.3  检测方法、仪器及试剂  上述指标均用ELISA检测，用Multiskan MK3型全自动酶标仪测定。IL6、IL8、IL10、VEGF试剂盒由上海晶美公司提供。

    1.4  统计学处理  全部病例按病程各阶段分组，组间比较采用方差分析。全部数据用SPSS 10.0统计软件进行处理，结果以x±s表示。

    2  结    果

    急、慢性白血病结果分3组进行组间对照：初治组（包括未治疗6例）IL6、IL8、IL10、VEGF水平明显高于正常对照组（P＜0.05）；部分缓解组（PR）IL6、IL8、IL10、VEGF水平与初治相比虽明显下降(P＜0.05），但仍高于正常对照组；完全缓解组（CR）与对照组间无明显差异。见表1，2。表1  急性白血病组IL6、IL8、IL10、VEGF治疗前后与对照组比较注：*与对照组、PR、CR组比较，P＜0.05，**与对照组、CR组比较，P＜0.05，第二列“CR（n）”表示取标本时为疾病缓解期表2  慢性白血病组IL6、IL8、IL10、VEGF治疗前后与对照组比较 注：*与对照组、PR、CR组比较，P＜0.05，**与对照组、CR组比较，P＜0.05，△ 与对照组比较，P＜0.05

    3  讨    论

    IL6是分子质量为21 ku糖蛋白，由多种细胞产生，作用于多种靶细胞，具有复杂的生物学功能，如诱导Ｂ细胞增殖、分化并产生IgG型抗体，诱导Ｔ细胞和胸腺细胞发育为杀伤性Ｔ细胞，刺激多潜力的造血干细胞群, 还参与自身免疫疾病及恶性肿瘤的形成等[1]。IL8是细胞趋化因子家族成员之一，由免疫细胞、内皮细胞及成纤维细胞等非免疫细胞产生，正常人体中含量甚微，在炎症及感染过程中大量分泌。IL10是细胞的炎症抑制因子，IL10分子质量为35 ku，半衰期为2.3～3.7 h，主要由单核细胞、中性粒细胞、肥大细胞和上皮细胞合成，它能抑制T细胞增殖，减少活化的单核细胞和中性粒细胞产生细胞因子及上调IL1受体拮抗物的表达。IL6、IL8属于黏附分子，IL10为抗炎因子。

    本研究发现，初治白血病患者IL6和IL8水平明显高于其它各组，提示白血病发病初期肿瘤细胞能分泌该类炎症因子；于治疗后缓解期其水平较发病初期出现有意义的降低，表明减少肿瘤细胞负荷时炎症因子的生成也相对减少。但由于体内残存一定量的肿瘤细胞，因而炎症因子分泌水平仍高于对照组。国外Denizot等[2]研究也发现，白血病细胞在无刺激条件下有一定量IL6和IL8的表达与分泌，与自分泌及旁分泌的形式有关，从而调节白血病细胞的生长。

    有学者认为IL6和IL8能增加TF在单核细胞的表达，促进单核细胞与血管内皮细胞的黏附，诱导白细胞的聚集等[3, 4]，提出IL6和IL8促进高凝状态的病理过程。本课题证实了IL6和IL8表达在急慢性白血病患者病程中有意义的增高，是参与恶性血液病出凝血异常，导致易栓症的因素之一。

    IL10是抑制分泌炎症介质的细胞因子。本组患者在初诊时急、慢性白血病两组IL10与IL6、IL8都增高，应视之为了抑制IL6、IL8的促炎症作用，故IL10反应性地升高。当病程缓解时IL10出现有意义的降低，此时的IL6、IL8水平也降低，与病情趋于稳定、疾病被控制有关，与文献报道一致[5]。研究结果提出IL10对血栓形成可能起负调控作用。

    血管新生是维持肿瘤生长过程中的重要病理基础。血管新生调节因子中VEGF是研究最多的因子之一，它参与了肿瘤的生长、增殖和转移等过程。近来有研究关注血管新生参与调节病理性的止凝血过程。凝血酶、纤维蛋白和血小板活化产物等重要物质均促进血管新生[6, 7]，而AT、高分子激肽、凝血酶敏感蛋白和血小板第4因子具有抑制血管新生作用[8]。VEGF及其受体还通过活化酪氨酸激酶和蛋白激酶C，上调TF表达[9]。Makin等[10]发现糖尿病、高脂血症等血管易损伤性疾病中有VEGF及其受体水平增高，表明VEGF参与了高凝疾病的发生和发展。本文研究显示，急慢性白血病患者发病时VEGF水平明显高于对照组，尤其是慢性白血病的患者，即便是在PR和CR期VEGF水平也增高显著，显然大量白血病细胞需要更多的血管提供营养使其生存。异常的血管新生可通过内皮细胞损伤，导致激活外源性凝血途径，加重血液高凝反应。因而VEGF水平变化与血液恶性肿瘤出现的肿瘤性血管新生和肿瘤性新陈代谢有关，其与炎症因子共同参与了形成血液恶性肿瘤易栓状态的病理过程。

【参考文献】［1］ 邵剑峰. 白细胞介素6在血液病及其它肿瘤中的研究进展［J］. 医学综述, 1997，5(2): 230233.

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［3］ KERR R, STIRLING D, LUDLAM CA. Interleukin 6 and haemostasis［J］. Br J Haematol, 2001 ，115(3): 312.

［4］ VAN AKEN BE,REITSMA PH,ROSENDAAL FR.Interleukin 8 and venous thrombosis: evidence for a role of inflammation in thrombosis［J］. Br J Haematol, 2002, 116(5) : 173177.

［5］ NAKANO M, FURUTANI M, SHINNO H, et al. Elevation of soluble thrombomodulin antigen levels in the serum and urine of streptozotocininduced diabetes model rats［J］. Thrombosis Research , 2000，99(4): 8391.

［6］ KIPSHIDZE N, KIPIANI K, KIPSHIDZE NN, et al.Therapeutic angiogenesis for patients with limb ischemia by utilization of fibrin meshwork［J］.Int Angiol，2003，22(4): 349355.

［7］ UCHIBA M, OKAJIMA K, SUDA T, et al. Activated protein C induces endothelial cell proliferation by mitogenactivated protein kinase activation in vitro and angiogenesis in vivo［J］. Circ Res， 2004， 95(1): 3441.

［8］ ZHANG W, CHUANG YJ, OLSON ST, et al. Antiangiogenic antithrombin downregulates the expression of the proangiogenic heparan sulfate proteoglycan, perlecan, in endothelial cells［J］. Blood. 2004，103(4): 11851191.

［9］ SHEN BQ, LEE DY, ZIONCHECK TF, et al. Vascular Endothelial Growth Factor KDR Receptor Signaling Potentiates Tumor Necrosis Factorinduced Tissue Factor Expression in Endothelial Cells［J］. J Biol Chem，2001，276(7): 52815286.

［10］ MAKIN AJ, CHUNG NA, LIP GY, et al. Vascular endothelial growth factor and tissue factor in patients with established peripheral artery disease: a link between angiogenesis and thrombogenesis［J］. Clin Sci (Lond), 2003，104(4): 397404.