呼吸道感染住院患儿人副流行性感冒病毒3型检测及临床研究

副流行性感冒病毒是儿童常见的呼吸道感染病原，其感染发病率仅次于呼吸道合胞病毒。根据遗传学和血清学人副流行性感冒病毒（HPIV）可分为4型，各型主要的结构和生物学特征相似，但流行病学和所引发疾病的临床特征有差异。以往的研究报道表明副流行性感冒病毒Ⅲ（Pinf-Ⅲ）是HPIV感染的主要和最常见型别。鉴于Pinf-Ⅲ是重要的呼吸道病原体，Pinf-Ⅲ疫苗已被世界卫生组织列为优先发展项目之一。由于Pinf-Ⅲ在儿科感染疾病中的重要性，所以及时准确地了解此地区Pinf-Ⅲ的流行特点，对疾病的诊断和疫苗的研制有一定帮助。为了解苏州地区Pinf-Ⅲ的感染特点，本研究对2011年1月~2011年12月在苏州大学附属儿童医院住院的1 976例呼吸道感染患儿运用直接免疫荧光法进行多病原检测，包括呼吸道合胞病毒（RSV）、流行性感冒病毒A、B（Inf-A、Inf-B）、副流行性感冒病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ（Pinf-Ⅰ、Pinf-Ⅱ、Pinf-Ⅲ）和腺病毒（ADV）7种病毒及细菌培养，在这基础上对其中116例Pinf-Ⅲ检测阳性病例的感染特点进行研究。现报告如下。1资料与方法1.1一般资料:选取于2011年1月～2011年12月在苏州大学附属儿童医院呼吸科住院的符合诊断标准的急性呼吸道感染（ARI）患儿，包括上呼吸道感染和下呼吸道感染，诊断标准见诸福棠《实用儿科学》第7版［1］，共1 976例，其中男1 264例，女712例，男女之比1.76∶1，年龄29 d～14岁。1.2标本的采集和处理：患儿在入院24 h内采用无菌负压抽取痰液法将塑料吸痰管经患儿鼻腔插入7～8 cm达咽部以下，诱导吸取1～2 ml分泌物移入无菌NaCl溶液试管中，振荡混匀后30 min内送检痰培养。所收集的痰标本先涂片镜检，鳞状上皮细胞＜10个/低倍视野，白细胞＞25个/低倍视野被视为合格，不合格者重新采集或丢弃。1.3病毒抗原检测:采用直接免疫荧光法检测RSV、Inf-A、Inf-B、Pinf-Ⅰ、Pinf-Ⅱ、Pinf-Ⅲ和ADV抗原，试剂盒购自美国Chemicon公司，按说明书进行操作。按阳性标准判断结果，结果于荧光显微镜下读取，以每片不少于5只阳性包涵体细胞为阳性，同时排除非特异性染色。荧光显微镜为德国莱卡020-518.500。具体操作由苏州大学附属儿童医院儿科研究所专业技师完成。1.4痰培养:将痰标本接种于哥伦比亚血琼脂培养皿和巧克力平皿，置于35  ℃含5％～8％CO2孵箱孵育18～24 h，根据培养基上的菌落特点、革兰染色、显微镜下观察、生化反应等方法鉴定细菌。1.5统计学方法:采用PASW20.0统计软件包对数据进行分析。Pinf-Ⅲ病毒感染在四组间季节率的比较采用行Ｘ列表Pearson χ2检验，组间两两比较采用四格表Pearson χ2检验；Pinf-Ⅲ病毒检出率在不同性别间的比较采用四格表Pearson χ2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。2结果2.1临床标本中Pinf-Ⅲ的检测结果：2011年1月～2011年12月共采集标本1 976例，Pinf-Ⅲ阳性的标本数为116例，阳性率为5.87%（116/1 976）。2.2Pinf-Ⅲ感染年龄特点：116例Pinf-Ⅲ病毒感染患儿中，年龄1个月～13岁6例，3岁以下检出阳性107例，占总阳性的92.24%（107/116），其中6个月以下婴儿51例，占43.97%（51/116）。Pinf-Ⅲ病毒易感染婴幼儿，特别是6个月以下的小年龄组儿童。详见表1。表1Pinf-Ⅲ病毒感染年龄构成年龄病毒阳性例数构成比(%)<6个月5143.96～1岁2925.00～3岁2723.28～5岁43.45>5岁54.312.3Pinf-Ⅲ病毒感染季节分布：Pinf-Ⅲ病毒阳性标本在各个月份均可检出，但于春夏形成感染高峰。4月、5月、6月、7月的感染率分别为9.46%、12.08%、10.06%、14.40%，春、夏、秋、冬四季节间Pinf-Ⅲ病毒检测阳性率比较差异有统计学意义（χ2=58.013，P＜0.001）；春季与夏季比较差异无统计学意义（χ2=0.03，P=0.862）；春季与秋季比较差异有统计学意义（χ2=28.652，P<0.001）；春季与冬季比较差异有统计学意义（χ2=27.433，P<0.001）；夏季与秋季比较差异有统计学意义（χ2=30.461，P<0.001）；夏季与冬季比较差异有统计学意义（χ2=29.318，P<0.001）；秋季与冬季比较差异无统计学意义（χ2=0.113，P=0.736）。详见表2。表2Pinf-Ⅲ病毒感染季节分布季节检测例数阳性例数阳性率(%)春季484479.71夏季5085110.04秋季47681.68冬季508101.97合计1 9761165.872.4Pinf-Ⅲ病毒感染性别分布：男性患儿1 264例，Pinf-Ⅲ病毒检出阳性78例，阳性检出率为6.17%（78/1264）；女性患儿712例，Pinf-Ⅲ病毒检出阳性38例，阳性检出率为5.34%（38/712），Pinf-Ⅲ病毒检出率在不同性别间比较，差异无统计学意义（χ2=0.573，P=0.449）。详见表3。表3Pinf-Ⅲ病毒检出率性别比较性别受检例数阳性例数阴性例数阳性率（%）男1 264781 1866.17女712386745.34合计1 9761161 8605.872.5Pinf-Ⅲ病毒感染临床特点2.5.1混合感染情况：Pinf-Ⅲ病毒混合呼吸道合胞病毒2例，混合细菌感染44例，分别为流行性感冒嗜血杆菌7例，卡他布兰汉菌3例，肺炎链球菌10例，金黄色葡萄球菌5例，大肠埃希菌2例，G-杆菌15例，鲍曼不动杆菌2例。2.5.2临床表现：116例Pinf-Ⅲ病毒感染病例中，最后出院诊断为肺炎94例，哮喘3例，毛细支气管炎15例，上呼吸道感染2例，粟粒性肺结核1例，喉炎1例。临床表现有咳嗽113例（97.41%），发热53例（45.69%），其中体温在38℃左右有39例（73.58%），喘息49例（42.24%），呼吸困难1例（0.86%）。临床表现特点是喘息症状轻，刺激性咳嗽症状重，混合感染病例临床症状较单纯Pinf-Ⅲ病毒感染病例重。2.5.3实验室检查：116例Pinf-Ⅲ病毒感染病例中，白细胞升高42例，最高达25.55×109/L；肝功能损害10例，血清丙氨酸转氨酶(Alanine aminotransferase，ALT)最高达254.9 U/L；肌酸激酶同工酶（CKMB）升高7例，最高143.3 U/L。2.5.4治疗：对116例患者均给予肌内注射干扰素及对症处理，有细菌感染者加用抗生素，经1～2周均临床治愈出院，平均住院时间为8.4 d。3讨论人副流行性感冒病毒（HPIV）首先发现于20世纪50年代末，根据遗传学和血清学，人副流行性感冒病毒可分为4型，各型主要的结构和生物学特征相似，但流行病学和所引发疾病的临床特征有差异。Pinf-Ⅲ病毒是儿童急性呼吸道感染的重要病原之一，绝大多数6～10岁儿童曾感染过Pinf-Ⅲ病毒,小婴儿尤其易感染Pinf-Ⅲ病毒，主要引起毛细支气管炎和肺炎。本研究病例中Pinf-Ⅲ病毒感染的患儿以婴幼儿为主，3岁以下检出阳性占总阳性数的92.24%，其中6个月以下婴儿占43.96%，Pinf-Ⅲ病毒易感染婴幼儿，特别是6个月以下的小年龄组儿童结果与报道一致。英国有文献报道Pinf-Ⅲ病毒占HPIV总感染的71%，常年均有散发，主要流行于春夏季节。我院也曾有报道每年7～8月是Pinf-Ⅲ流行高峰［2］。由于地理位置不同、气候差异所致，尽管感染率存在一定的差异，但Pinf-Ⅲ流行时期均为该地区气温较高的季节［3］。本次检测Pinf-Ⅲ阳性标本在各个月份均可检测出，以春夏季为流行高峰，与报道一致。因地区、流行季节、检测方法的不同，Pinf-Ⅲ病毒感染率的报道各家不一，温州育英儿童医院黄志英等用直接免疫荧光法检测2003~2005年呼吸道感染住院患儿的鼻咽分泌物［4］，Pinf-Ⅲ病毒阳性率在最高年度达9.0%。笔者的研究共检出116例阳性标本，检出率为5.87%，较上述报道的检出率低。Pinf-Ⅲ病毒感染引起下呼吸道感染，主要为肺炎和毛细支气管炎，临床表现有发热、咳嗽、喘息，但症状轻，易合并细菌感染，特点是喘息症状轻，刺激性咳嗽症状重，混合感染病例临床症状较单纯Pinf-Ⅲ病毒感染病例重。4参考文献［1］胡亚美，江载芳.诸福堂实用儿科学［M］.第7版. 北京：人民卫生出版社,2003:1174-1213.［2］孙诗炜，苏小慰，陈正荣，等.儿童急性呼吸道副流感病毒3型感染流行与气候因素的关系［J］.江苏医药杂志,2011,37（8）:932.［3］Fé MM,Monteiro AJ,Moura FE,et al.Parainfluenza virus infections in a tropical city:clinicaland epidemiological aspects［J］.Braz J Infect Dis,2008,12(3):192.［4］黄志英，董琳.温州地区儿童副流感病毒感染的流行病学特点［J］.实用儿科临床学杂志,2006,8（16）:1066.