胸腺素α１对支气管哮喘患者气道高反应的抑制作用

　　作者：刘 伟 毛继芳 时衍同 贺芹

　　【摘要】 目的 探讨胸腺素α1(Tα1)对哮喘患者Th1/Th2免疫反应的调节以及其对气道高反应性的抑制作用。方法 选取缓解期哮喘患者25例(哮喘组)，给予胸腺素α1(Tα1)隔日一次皮下注射，每次1 mg/kg，疗程15月。健康志愿者(对照组)15名。分别对哮喘组用药前、后，对照组留取血标本，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测上述三组血清中IL4、IL5、IFNγ含量，并对检测结果进行统计学处理。结果 哮喘组用药前血清中IL4含量[(5215±896) pg/mL]与对照组[(1333±1116) pg/mL]比较差异有显著性(P<001)。哮喘组用药后血清IFNγ量[(118552±6710 )pg/mL]显著增加，与对照组[(13825±625 )pg/mL]和用药前[(14458±106) pg/mL]相比均有显著性差异(P=0001);IL4含量[(1415±486) pg/mL]较用药前[(5215±896) pg/mL]明显降低(P=0001)。结论 本研究显示：Tα1能上调Th1型免疫反应，下调Th2型免疫反应，抑制IL4和IL5的过度表达，从而对哮喘患者的气道高反应性有治疗和抑制作用。

　　【关键词】 哮喘;Th1/Th2免疫反应;胸腺素α1

　　Suppressive effect of Tα1 on allergic sensitization in asthmatics

　　LIU　Wei MAO Jifang SHI Yantong et al

　　Department of Respiratory Disease,Rizhao Hospital，Rizhao 276826

　　【Abstract】 Objective To investigate the role of thymosinα1(Tα1) administrated Th1/Th2 balance and suppression of allergic sensitization in asthmatics.Methods Twentyfive asthmatic patients in remission episode were selected (the asthma group).Fifteen healthy volunteers (the control group) was selected.The asthma group was hyodermiced by Tα1 every other day for 15 months.Serum were obtained from the asthma group before and after treatment and from the control group.IL4，IL5，and IFNγ levels in abovementioned serum samples were measured by ELISA.The results were analyed statistically.Results IL4 levels of asthma before treatment [(5215±896)pg/mL] were significantly increased compared with those of control group [(1333±1116)pg/mL](P<005).IFNγ level in asthmatics after treatment [(118552±6710)pg/mL]was more significantly increased than that in control group [(13825±625)pg/mL] and that of asthmatics before treatment[ (14458±106)pg/mL](P=0001).IL4 Levels in asthmatics after treatment [(1415±486)pg/mL] were more significantly decreased than those in asthmatics before treatment [(5215±896)pg/mL](P=0001).Conclusion In this study,Tα1 treatment established a Th1type immune response that thindered allergic sensitization and the development of increased airway reactivity.

　　【Key 1words】 asthma,Th1/Th2 immune response,thymosinα1

　　胸腺素α1(Tα1)是Goldstein等1969年首先从小牛胸腺中发现和提纯的一种免疫活性多肽，含有28个氨基酸，分子量3108 kD，等电点42。Tα1是一种高度保守的活性肽，广泛分布于哺乳动物的各个组织器官中，无种属特异性，主要作用于胸腺细胞成熟的早期和晚期，可增加T细胞表面Thy1，2和Lyt1，2，3表达，促进胸腺细胞向CD4+细胞转化。Tα1具有双向性免疫调节效应，外周血单个核细胞与Tα1共同孵育可使孵育液中Th1相关细胞因子IL2，IFNγ产量增加，并且能够抑制Th2相关细胞因子IL4，IL10的产生[1]。目前，Tα1已经应用于慢性病毒性肝炎和多种恶性肿瘤的辅助治疗，但是罕见其对支气管哮喘防治中作用的研究报道。因此，我们通过临床实验，观察Tα1对支气管哮喘患者Th1/Th2型免疫反应的影响及其对哮喘患者气道高反应性的抑制作用。

　　1 临床资料

　　1.1 研究对象

　　111 研究组：选择2005年1月―2005年6月我院呼吸内科病房及门诊哮喘病人24例。男11例，女14例，年龄18～52岁，平均年龄(34±11)岁，总病程(142±64)年，现病情处于缓解期;其中合并过敏性鼻炎9例，合并荨麻疹4例，其他无明显过敏史。按中华医学会呼吸病学会1997制订的支气管哮喘防治指南中的诊断及病情评价标准[1]。哮喘缓解期：指经过治疗或未经治疗症状、体征消失，肺功能恢复到急性发作前水平，并维持4周以上。实验前1个月内使用过糖皮质激素及免疫调节剂者，合并支气管扩张症及慢性胸肺疾患者，合并高血压、心脏病、糖尿病等患者，有长期吸烟者，24 h内用过抗组胺药、茶碱类、白三烯受体阻断剂和β2受体激动剂类药物者。

　　1.1.2 对照组：15名，男8名，女7名，年龄22～38岁，均为我院实习、进修医生。

　　1.2 实验步骤

　　1.2.1 第一次标本采集：哮喘组用药前与对照组各采晨空腹肘静脉血5 ml，室温放置1 h，3000 r/min，留取血清于两个干燥EP管中，置于-80℃冰箱保存待测。

　　1.2.2 哮喘组用药：哮喘组自试验第一天始皮下注射Tα1(商品名日达仙，3 mg/安瓿，SciClone公司市售产品，批号C276701)1 mg/kg，隔日1次。总疗程15个月。

　　1.2.3 第二次标本采集：哮喘组用药，疗程结束后第1天再取晨空腹肘静脉血5 ml，室温放置1 h，3000 r/min，留取血清，-80℃冰箱保存待测。

　　1.2.4 细胞因子的测定：血清中IL4，IL5和IFNγ用ELISA法测得[2]，以上成套试剂盒购自晶美生物工程有限公司(Endogen,Inc.USA),IL4的标准是375 pg/mL,IL5的标准是320 pg/mL,IFNγ的标准是3000 pg/mL。

　　1.3 统计学分析

　　结果以x±s表示，用独立样本的均数比较t检验法进行分析。

　　2 结果

　　三组血清中细胞因子含量比较见表1。与哮喘组用药前比较，哮喘组用药后IL4明显减少，IFNγ明显增加，差异均有显著性(P均<0001)。表1 三实验组血清中细胞因子产量的比较(x±s)组别 细胞因子量(略)

　　3 讨论

　　近十年来，在哮喘动物模型和患者身上，均阐明了Th1和Th2平衡失调、Th2细胞活化亢进在哮喘发病中的重要作用。变应性患者的靶器官中抗原特异的Th2细胞积聚[2]，Th2细胞因子与哮喘AHR、气道Eos浸润和活化及血清IgE增高显著相关。变应性哮喘患者血清、外周血、支气管肺泡灌洗液(BALF)、支气管和外周气道粘膜中存在以IL4、IL5为主的Th2优势反应，且血清IL4/IFNγ，IL5水平的升高与哮喘严重程度相关，并随着有效治疗后下降[4]。IL4与IL4受体α链的表达，是抗原激发导致Eos聚集、粘液过度分泌与AHR等哮喘特征性气道炎症的基础。

　　文献报道Tα1具有明显的免疫调节效应，主要表现在Tα1能提高IL2浓度，增强高亲和力IL2受体的表达作用，提高α干扰素水平，从而用于慢性病毒性肝炎和多种恶性肿瘤的辅助治疗。我们通过本项研究证明Tα1还可阻遏哮喘患者Th2型免疫反应的发展，使哮喘患者血清中IFNγ产量明显增加，而IL4和IL5明显减少。说明Tα1对支气管哮喘患者气道高反应性有明显的抑制作用，因此Tα1导致的Th1型免疫反应与BCG一样对临床哮喘的治疗具有潜在的应用价值。

　　综上所述，胸腺素α1具有较强的调节Th1/Th2平衡效应，对抑制变应性哮喘的气道炎症有着一定的意义。国内外很少有用Tα1来预防治疗支气管哮喘的报道，对于其应用于临床哮喘的防治的实用价值如何，尚需进一步的研究。

　　参 考 文 献

　　1.　Andreone P,Cursaaro C,Gramenzi A,et al.In vitro effect of thymosinalpha1 and interferonalpha on Thl and Th2 cytokine synthesis in patients with chronic hepatitis[J].J Viral Hepat,2001,8(3):194

　　2.　Renz H,Smith HR,Henson JE,et al.Aerosolized antigen exposure without adjuvant causes increased IgE production and increased airway responsiveness in the mouse[J].J Allergy Clin Immunol,1992,89:1127

　　3.　Herz U,Braun A,Ruckert R,et al.Various immunological phenotypes are associated with increased airway responsiveness[J].Clin Exp Allergy,1998,28:625

　　4.　Hertzen LC,Haahtela T.Could the risk of asthma and atopy be reduced by a vaccine that induces a strong T helper type 1 response[J]?Am J Respir Cell Mol Biol,2000,22:139

　　5.　Kon M,Kay AB.T cells and chronic asthma[J].Int Arch allergy Immunol,1999,118:133

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