创伤性休克家兔血浆TXA2和PGI2的动态变化以及葛根素

作者：倪孔海　 陈大庆　朱烈烈　江明华　丁红香　应斌宇　徐正祄

【摘要】  目的　探讨创伤性休克家兔血浆血栓素A2（TXA2）和前列环素（PGI2）的变化以及葛根素的调控作用。方法 日本大耳白兔40只，随机分成4组：对照组、休克组、复苏组和治疗组，每组10只。制作创伤性休克模型，复苏组和治疗组分别在休克1.5小时后予以林格氏液进行复苏、复苏的同时静脉输注葛根素治疗。各组于休克前，休克后0.5，1.5，2，3，4小时采集血液以放免法检测血浆中TXB2和6-keto-PGF1α的水平。结果：家兔创伤性休克后各时点血浆TXB2水平显著升高(Ｐ＜0.05)；休克后3小时和4小时血浆中6-keto-PGF1α水平明显降低(Ｐ＜0.05)。与休克组相比，复苏组于复苏后1.5小时和2.5小时 TXB2水平明显降低(Ｐ＜0.05)；复苏后0.5小时 6-keto-PGF1α水平明显降低 (Ｐ＜0.05)，其它时点6-keto-PGF1α水平无显著差别(Ｐ＞0.05)。与对照组相比，复苏组各时点TXB2水平均显著升高(Ｐ＜0.05)而6-keto-PGF1α水平均明显降低 (Ｐ＜0.05)。与休克组和复苏组相比，治疗组在静脉输注葛根素后各时点TXB2水平均显著降低(Ｐ＜0.05)而6-keto-PGF1α水平明显升高(Ｐ＜0.05)。治疗组于输注葛根素后1.5小时和2.5小时 TXB2水平与对照组相比无显著差别(Ｐ＞0.05)而各时点6-keto-PGF1α水平明显升高(Ｐ＜0.05)。结论：创伤性休克家兔血浆中TXA2水平显著增高而PGI2水平降低，葛根素能调控创伤性休克血浆中TXA2和PGI2水平，在创伤性休克的救治中发挥作用。

【关键词】  创伤性；休克；TXA2；PGI2

    　　TXA2 和PGI2是调节血管壁紧张性的一对重要血管活性物质。TXA2不仅是很强的缩血管物质，而且也是引起血小板聚集的因子；PGI2有较强的扩血管和抑制血小板聚集的作用。两者保持动态平衡，对维持血流动力学稳定起重要作用。葛根素是中药葛根中提取的单体化合物，对微循环障碍有明显改善作用，主要表现为局部微血管血流和运动的幅度增加。本实验通过建立创伤性休克模型，检测TXA2 和PGI2在血浆中的代谢产物TXB2和6-keto-PGF1α的含量，来了解创伤性休克血浆中TXA2 和PGI2的变化，并观察葛根素注射液对其的影响，探讨葛根素注射液在创伤性休克治疗中的作用。

    １　材料与方法      

    1.1　实验动物与分组：实验动物为40只健康的普通级日本大耳白兔,使用许可证号SYXK(浙2003-0025)，雌雄不拘，平均5～7月龄，体重2.0～2.5kg，由温州医学院动物实验室提供。实验动物随机分为４组：对照组、休克组、复苏组和治疗组。

    1.2　试剂与药物：TXB2和6-keto-PGF1α试剂盒由苏州大学医学院血栓所提供。葛根素注射液由浙江康恩贝制药股份有限公司提供（批号051004）。

    1.3　实验步骤：采用朱维星［1］方法建立家兔创伤性休克模型。用20％（ml/kg）乌拉坦麻醉成功后注射肝素钠（1000U／kg）全身肝素化。行右侧颈动脉左侧颈静脉插管，动脉插管接压力换能器多功能监仪，监护平均动脉压（MAP）。血标本采自颈动脉。静脉插管用于补液复苏。上述操作完成后安静10分钟，用3kg铁锤自0.5米高处垂直下落，击中家兔两侧股骨中段处致粉碎性骨折。血压下降缓慢者经放血使实验动物于10分钟内使平均动脉压下降至50mmHg左右开始休克计时，休克后1.5小时计为休克末。对照组麻醉后行颈动静脉插管后不作其它处理；休克组造成休克后不予补液及药物治疗；复苏组于休克末予林格氏液输注使MAP回升至80～100mmHg；治疗组在复苏的同时予以葛根素注射液30mg/kg静滴。

    1.4　标本采取与TXB2和6-keto-PGF1α测定：分别于休克前，休克后0.5、1.5、2、3、4小时自颈动脉取血2ml，注入盛有2％EATA~Na2 0.2ml试管中混匀，3000r/分钟离心15分钟，取血浆于-20℃保存待测。采用放射免疫法测定TXB2和6-keto-PGF1α，全部样品两指标一次性完成检测。

  1.5　统计学处理：应用SPSS10.0软件处理，采用方差分析。

    ２　结果

    2.1　休克后血浆中TXB2值迅速增大，休克组于休克后3小时达到高峰，至实验末仍接近于最高值。复苏组TXB2高峰值出现于复苏后0.5小时，至实验末仍处于较高水平。治疗组其高峰值出现于休克末，之后TXB2值逐渐变小并与休克前接近。见表1。

    2.2　休克组和复苏组休克后各时点TXB2值均显著高于对照组(Ｐ＜0.05),治疗组于复苏后1.5小时和2.5小时TXB2值与对照组无显著差别(Ｐ＞0.05)；复苏组于复苏后1.5小时和2.5小时TXB2值比休克组明显减少(Ｐ＜0.05)；治疗组于治疗后各时点TXB2值比休克组和复苏组均明显减少(Ｐ＜0.05)。见表1。

    2.3　休克组于休克后3小时和4小时 6-keto-PGF1α值明显低于对照组(Ｐ＜0.05)；复苏组于复苏后各时点 6-keto-PGF1α值均明显低于对照组(Ｐ＜0.05)；复苏组于复苏后0.5小时 6-keto-PGF1α值明显低于休克组，其它时点6-keto-PGF1α值无显著差别(Ｐ＞0.05)；治疗组治疗后各时点的6-keto-PGF1α均明显高于其它3组(Ｐ＞0.05)。见表2。

    ３   讨论

    TXA2和PGI2均是花生四烯酸经环氧酶途径，分别由前列腺素合酶和血栓素合酶催化产生。TXA2由血小板释放，不仅是很强的缩血管物质，而且是促血小板聚集因子；PGI2主要由血管内皮细胞产生，具有强大的舒血管和抑制血小板聚集作用，而且能抵制平滑肌细胞增生和DNA合成［2］。TXA2和PGI2是一对生理拮抗剂，生理情况下血浆和组织中的TXA2/PGI2 比值处于相对稳定状态，以保持机体内环境的稳定。当缺血低氧时，一方面血管内皮细胞受损，PGI2生成减少；另一方面又致血小板释放TXA2增多，发生强烈的血管收缩和血小板聚集并进一步释放TXA2。扰乱TXA2/PGI2的动态平衡，致微血管强烈收缩、血栓形成与堵塞、血管通透性增高、加重缺血和周围组织水肿［3］。TXA2和PGI2在体内的半衰期很短，分别是30秒和3分。由于TXA2和PGI2的不稳定性，目前难以直接测定，国内外均以测定其代谢产物TXB2和6-keto-PGF1α　值作为判断其浓度的指标。本实验发现家兔创伤性休克后各时点血浆中TXA2　值均显著增高，休克后３和４小时的PGI2　值明显降低，其它时点PGI2　变化不明显，表明了休克后各时点TXA2/PGI2　值均有明显上调，两者间的动态平衡破坏，TXA2强烈的缩血管作用和促凝作用会加重微循环缺血和组织细胞灌注不足，从而使休克程度不断加深，TXA2/PGI2的上调可能是创伤性休克后加重组织细胞缺血缺氧和脏器损伤的重要因素。

    在临床上抢救创伤性休克的主要措施之一是通过快速输液补充血容量改善微循环。尽管如此，再灌注过程中又面临新的损伤。包括氧自由基增多、内源性内毒素大量释放和钙超载和磷脂酶A2激活，通过这些因子的信使作用最终造成失控的、全身的炎症反应［4，5］。本研究发现用林格氏液复苏后各时点家兔血浆中TXA2值，较休克组虽有降低但仍然明显高于对照组，而且血浆中PGI2值较对照组有所降低。TXA2/ PGI2仍然高于生理状态，快速补液不能有效地调整TXA2/ PGI2平衡。这可能与快速补液引起的再灌注损伤有关。

    葛根素为豆科植物野葛或其葛藤的干燥根异黄酮的主要有效成分之一，具有扩张血管、抗血小板聚集、抗血栓形成、可使受损血管内皮恢复功能，具有抗过氧化和改善微循环和血流动力学的作用，在许多心血管疾病的治疗和保护组织器官缺血再灌注损伤中发挥重要作用［6，7］。在葛根素治疗高血压病和高脂血症的研究中，还发现葛根素能调控TXA2/PGI2的平衡［8，9］。本实验发现注射葛根素后0.5小时血浆中TXA2值就迅速降低，1.5小时后血浆中TXA2值就与对照组无明显差别。而且注射葛根素后各时点PGI2值均明显高于对照组。与复苏组相比，治疗组各时点血浆中TXA2值均明显降低而PGI2值明显升高。表明葛根素能调控创伤性休克血浆中TXA2和PGI2含量，使TXA2/ PGI2下调，在休克复苏后改善微循环，恢复组织细胞灌注方面起到重要作用，从而改善各组织器官的功能，减少休克对人体的损害。

【参考文献】  ［1］　朱维星,吴连拼,潘景业，等．创伤性休克家兔血浆一氧化氮、内皮素-1的变化以及纳洛酮的治疗作用[J].中华急诊医学杂志,2003,12(12):826-828.

［2］　孔炜,方华丰,王迪浔,等.急性缺氧对肺动脉内皮细胞血栓素合酶基因表达及PGI2、TXA2代谢产物的影响[J].同济医科大学学报,2001,30(4):295-297.

［3］　徐正祄,王万铁,谢克俭.心肌缺血再灌注损伤时PGI2/TXA2平衡的变化及川芎蓁的调控作用[J]. 温州医学院学报,1997,27(3):129-131.

［4］　Lum H, Roebuck KA. Oxidant stress and endothelial cell dysfunction［J］. Am J Physiol Cell Physiol, 2001, 280(4): C719-C741.

［5］　An J, Varadarajan SG, Camara A, et al. Blocking Na+/H+ exchange reduces ［Na+］i and ［Ca2+］i load after ischemia and improves function in intact hearts［J］. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2001,281(6): 2398-2409.

［6］　茅彩萍. 葛根素的药理作用和临床应用研究[J].中国血液流变血杂志,2004,14(1):138-142.

［7］　李涛,邹志森. 葛根素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J].中药药理与临床,2004,20(4):15-16.

［8］　罗伟，李保东，杨瑞华，等.葛根素对高血压病患者血浆ET及TXB2，6-keto-PGF1α含量的影响[J].中国中医基础医学杂志，2000，6（1）：45-47.

［9］　刘海燕,石元刚.葛根素对高脂血症大鼠脂质代谢及血浆PGI2,TXA2 水平的影响[J].第三军医大学学报,2004,26(11):967-969.