1244例慢性前列腺炎患者病原微生物检测及耐药性分析
发表时间：2009-05-26 浏览次数：895次
徐亚丽 王崇义 葛宏兵315600 浙江省宁海县第一医院
【摘要】 目的 探讨慢性前列腺炎患者前列腺中病原微生物及其耐药性。方法 取前段尿（VB1）及前列腺液，进行常规外观、显微镜镜检、分离培养（细菌、真菌、支原体）及衣原体检测，采用API与ATB系统鉴定细菌；K-B纸片法测定细菌的耐药性；PCR法测定葡萄球菌的MceA 基因；表型确证试验检测大肠埃希菌与克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶（ESBL），Mycoplasma IST2试剂检测支原体及对9种抗生素的耐药性；采用chemtrueTMchlamydia 抗原检测法检测衣原体。结果 1244例前列腺液中702份标本中检出病原微生物786株，最常见的病原微生物为细菌356株（45.3%）、支原体306株（38.9%）和衣原体119株（15.1%）。葡萄球菌是引起慢性细菌性前列腺炎的最主要的病原菌，203株中126株为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS），其对除万古霉素外的其他12种抗生素均有较高的耐药率；306株支原体对9种抗生素的耐药率分别为氧氟沙星(68.3%)、环丙沙星(80.4%)、红霉素(62.7%)、阿奇霉素(58.2%)、克拉霉素（51.6%）、四环素（21.2%）、强力霉素（12.7%）、交沙霉素（12.1%）、原始霉素（5.6%）；31株大肠埃希菌和克雷伯菌中，ESBL阳性12株，阳性率38.7%；38株肠球菌中，链霉素高度耐药17株，庆大霉素高度耐药15株，链霉素+庆大霉素均高度耐药12株，耐万古霉素肠环球菌（VRE）2株。结论 慢性前列腺炎病因复杂，病原微生物种类较多，多重耐药菌感染常见，加强病原微生物及耐药性检测 ，对于慢性前列腺炎的诊断与治疗具有十分重要的意义。 【关键词】 慢性前列腺炎 病原菌 耐药性 葡萄球菌 支原体 衣原体 【Abstract】 Objective To study the pathogen and its drug-resistance in expressed prostatic secretion(EPS) of 1244 prostatitis patients. Methods The first-voded of urine(VB1) and EPS were collected for microscopic examine、fractional culture(bacteril,fungus,mycoplasma)and chlamdiae test, the bacterias were confirmed with API and ATB systerm its drug-resistance were examined by using K-B test; The Meca gene of Staphylococcus was examined by polymerase chain reaction(PCR);the extended spectrum beta-lactamase(ESBL) was detected by phenotypic confirmatory;nine drug-resistance of mycomplasma were confirmed by mycoplasma IST2; the chlamydia was confirmed by chemtrueTMchlamydia. Results 778 strains pathogenic bacteria were detected in 702 sample of 1244 patients,the main pathogens were bacteria(347,44.6%)、mycoplasma(306,39.3%) and chlamydia (119,15.3%).Staphylococcus was the main pathogenic bacteria for the cause of chronic bacterial prostatitis ,126 strains were meticillin-resistant staphylococcus(MRS) in 203 strains,they had higher drug-resistant against 12 antibiotics except vancomycin ; 306 strains mycoplasma had high drug-resistance against antibiotics ,they were OFX(68.3%)、CIP(80.4%)、ERY(62.7%)、AZI(58.2%)、 CLA(51.6%)、TET(21.2) 、DOT(12.7%)、JOS(12.1%) and PRI(5.6%).12 strains were ESBL-positive in 31 strains of Escherrichia.coil and Klebsiella, the positive rate was 38.7%;17 strains had high level aminoglycoside resistance(HLAR) against streptomycin and 15 strains HLAR against gentanicin and 12 strains HLAR against streptomycin or gentanicin and 2 strains vancomycin-resistant enterococcus(VRE) was detected in 38 strains enterococcus. Conclusions The cause of chronic prostatitis is complex ,the species of pathogen are abundant ,the infection auti-drug-resistant strain are common ，the detection of pathogen and drug-resistance strains is important for the diagnosis and treatment of chronic prostatiis patients.
【Key Words】 Chronic prostatiis Pathogenic bacteria Drug-resistant Staphylococcus Mycoplasma Chlamdiae
为了探讨慢性前列腺炎病原微生物及其耐药性，进一步提高慢性前列腺炎的诊断和治疗水平，作者对1244例慢性前列腺炎患者的前列腺标本进行了常规显微镜镜检、病原微生物及其耐药性检测，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2005年1月至2007年6月本院门诊及住院的慢性前列腺炎患者1244例，年龄21～73 岁，平均36.7岁。标本采集参考文献［１］，将尿道口消毒后，取前段尿10～15ml及前列腺液（EPS），前段尿培养阳性合并尿道感染者，控制感染后再取EPS，立刻送检。
1.2 标本检验 参照《全国临床检验操作规程》，对送检标本 进行EPS常规，EPS细菌及真菌培养接种巧克力、血琼脂、沙保氏琼脂；支原体培养与药敏接种于Mycoplasma IST2（法国梅里埃公司）培养基；衣原体采用chemtrueTMchlamydia（Medyl Biotechnoiogy Inc USA） 抗原检测法。
1.3 菌株鉴定 菌落先经传统方法（形态，革兰染色，触酶试验）鉴别，利用API系列、ATB 鉴定系统鉴定菌种。
1.4 耐药性检测 K-B纸片法，药敏纸片购自OXOID公司，M-H培养基购自法国，以粪肠球菌 ATCC 29212；大肠埃希菌ATCC 25922 ；金黄色葡萄球菌 ATCC25923；铜绿假单胞菌ATCC 27853为质控菌株，操作及结果判读严格按NCCLS规定。大肠埃希菌与克雷伯菌ESBL测定：采用表型确证试验，操作及结果判读严格参照Nccls. Performance Standards for antimicrobial Dick susceptibility Test 2000年第7版，以大肠埃希菌ATCC 25922为阴性对照，肺炎克雷伯菌ATCC700603为阳性对照。葡萄球菌耐苯唑西林及mceA基因测定：耐苯唑西林筛选试验： 试验操作及结果判断均按NCCLS规则进行，以金黄色葡萄球菌ATCC 25922为阴性对照，金黄色葡萄球菌ATCC43300为阳性对照。可疑菌种mceA基因采用PCR法检测，mceA基因寡合苷酸引物MceA1：5’TGGCTATCGTGTCACAATCG3’，MceA2：5’CTGGAACTTGTTGACT CAGAG3’参照Hookey等［2］报道完成。 肠球菌氨基糖苷类高水平耐药性：采用纸片扩散法筛选试验,操作与结果判断按NCCLS规则进行。
2 结果
2.1 常规检验 白细胞与病原微生物检验结果见表1。
表1 前列腺液白细胞与病原微生物检验结果表（略）
2.2 前列腺标本病原菌分布 1244份标本中702份检出可疑病原微生物786株，其构成比见表2。其中支原体306株（解脲支原体254株，人型支原体52株）。有45份标本细菌+支原体培养均为阳性；16份支原体+衣原体阳性；11份细菌+衣原体培养均为阳性；4份细菌+支原体培养+衣原体均为阳性。
表2 786株病原微生物构成比（略）
2.3 203株葡萄球菌经筛选试验和PCR法测定 126株确认为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS），葡萄球菌对常用13种抗生素的耐药情况见表3。31株大肠埃希菌和克雷伯菌中，ESBL阳性12株，阳性率38.7%。38株肠球菌中，链霉素高度耐药17株，庆大霉素高度耐药15株，链霉素+庆大霉素均高度耐药12株，耐万古霉素肠环球菌（VRE）2株。306株支原体对常用9种抗生素的耐药率见表4。
表3 203株葡萄球菌对13种常用抗生素的耐药性结果（略）
表4 306株支原体对常用9种抗生素的耐药率（略）
3 讨论 慢性前列腺炎分为慢性细菌性前列腺炎（CBP）、慢性非细菌性前列腺炎和前列腺痛，慢性前列腺炎的的诊断主要依赖于前列腺特异性标本的镜检和病原微生物检测。近年来，由于免疫抑制剂、激素、抗生素的广泛应用，引起慢性前列腺炎的病原在不断变迁［3～5］，本资料中1244例慢性前列腺炎病原微生物检测中阳性702份，其中细菌356株、支原体306株、衣原体119株，同近年来非细菌性感染病例增高的报道一致［6］。作者采用李学德等［１］报道的取前段尿加前列腺液的方法 ，诊断符合率97.1%，方法简便、有效。
前列腺的白细胞镜检对慢性前列腺炎有较好的筛查作用。白细胞少数者，多数为前列腺痛等病因引起；白细胞+～者，多数为支原体或衣原体感染，少数为细菌性感染早期；白细胞～者，多数为细菌性感染，或并发衣原体、支原体等多重感染可能。因此，常规的白细胞镜检对于综合分析与诊断慢性前列腺炎具有较高的临床价值。本院检出的203株葡萄球菌中，126株为MRS，对除万古霉素外的其他12种抗生素均有较高的耐药率；支原体是引起非细菌性感染的最常见的病原微生物，本结果显示，254株解脲支原体对环丙沙星等喹诺酮类抗生素有较高的耐药率，52株人型支原体除对红霉素，阿奇霉素，卡拉霉素等天然耐药，并多数同解脲支原体双重感染，两种支原体的耐药率差异较大，支原体种的鉴定有助于抗生素的选择；肠球菌对头胞类、SMZ等多种抗生素天然耐药，检出的2株VRE菌株，同时对四环素，利福平，氯霉素等多种抗生素耐药；6株产ESBL大肠埃希菌和克雷伯菌，除对青霉素类，头胞类，氨曲南耐药外，对环丙沙星等喹诺酮类有很高的耐药性，仅对泰能、美罗培南有较好的敏感性。 慢性前列腺炎病因复杂，准确的病原学及其耐药性检测是提高慢性前列腺炎治愈率的基础。因此，作者认为慢性前列腺炎的治疗，首先应对患者的EPS标本进行常规镜检与病原微生物检测，根据不同的病因和病原微生物及其药敏结果，选择合适的治疗方法与药物。对多重耐药菌株的治疗，还应联合使用α受体阻滞剂、花粉提取物、微波热疗、前列腺按摩、中药坐浴等综合治疗方法。
【参考文献】 1 李学德，于永纲，姚华强，等.慢性前列腺炎细菌培养的三种采样方法对比.临床泌尿外科杂志，2000，15(1)：3～4.
2 Hookey JV,Richardson JF，Cookson BD.Molecular typing of Staphylococcus aureus based on PCR restricition fragment length polymorphism and DNA sequence analysis of the coagulase gene.J Cin microbiol,1998,36(4):1083～1089.
3 田传华,于西华.慢性前列腺炎患者病原学诊断和药敏试验的研究.中华微生物杂志,2000,12(4):227～228.
4 胡小明,白文俊,朱积川,等.慢性前列腺炎细菌及免疫学研究.中华泌尿外科杂志,2002,23(1):29～31.
5 张杰,杨吉伟,李从荣,等.凝固酶阴性葡萄球菌检测在慢性前列腺炎中的意义.中华泌尿外科杂志,2004,25(5):337～339.
6 郭和清，鲁功成.PCR检测非细菌性前列腺炎沙眼衣原体的初步研究.临床泌尿外科杂志，1996，11(6)：338～339.
