急性脑梗死患者髓鞘碱性蛋白动态检测的临床意义

　　作者：陈俊， 何国厚， 黎 华， 余绍祖 作者单位：郧阳医学院附属太和医院神经内科，湖北 十堰 442000

　　【摘要】 目的：动态观察急性脑梗死患者(acute cerebral infarction,ACI)血浆中髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的变化，探讨其与脑梗死体积、神经功能缺损程度、梗死部位等方面相关性。方法: 该实验采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) 对50例急性脑梗死患者的血浆MBP水平进行动态检测，并与30例对照组患者进行比较，同时应用NIHSS进行神经功能缺损评分及CT扫描测定梗死体积，并应用SPSS11.5统计软件包进行统计学分析。结果: 急性脑梗死患者MBP浓度在发病早期开始升高，明显高于恢复期及对照组，有严重神经功能缺失的患者MBP升高更明显，MBP>10.0 μg/L 、NIHSS﹥12分均提示患者预后不良;MBP的血浆浓度与梗死体积呈显著正相关(P<0.01)，与神经功能缺损程度也呈显著正相关(P<0.01)。结论:缺血性脑梗死后血浆中MBP的出现与髓鞘损伤有关，并通过受损的血脑屏障进入血液，MBP可作为缺血性脑损伤的外周标志物，对指导治疗有帮助。

　　【关键词】 脑梗死

　　The Clinical Value of Serial Determination of Myelin Basic Protein in Patients with Acute Cerebral Infarction CHEN Jun, HE Guo-hou ,LI Hua, et al. (Department of Neurology, Taihe Hospital, Yunyang Medical College, Shiyan, Hubei 442000, China)

　　Abstract: Objective The study aimed to evaluate the significance of serial changes of myelin basic protein concentrations in plasma from patient with acute cerebral infarction and to find the correlation with neurologic deficits ,infarct volume and infarct spot ,also with sex and age. Metheds: MBP plasma levels were serially determined in 50 patients with ACI and in 30 control subjects. Assays were performed by using ELISA. The neurological status was evaluated by the NIHSS and the cranial CT also serially performed to calculate infarct volume. Comparison analysis were performed by using a SPSS 11.5 statistical package. Results The concentrations of MBP were higher in patients with ACI;the MBP concentrations in plasma were significantly higher in patients with severe neurological deficits at adimission. When MBP>10.0μg/L or NIHSS>12 point indicating poor outcome; The release of MBP in patients was associated with the volume of brain lesions (P<0.01) and the neurological outcome as assessed by NIHSS (P<0.01). Conclusions Presence of MBP in plasma after ischemic stroke may be due to combined leakage out of myelin and passage through an impaired brain-blood barrier, indicating severe ischemic injury ,therefore MBP in plasma can be used as a peripheral marker of ischemic focal brian damage,may be helpful for therapeutic decisions in acute ischemic stroke.

　　Key words: cerebral infarction; myelin basic protein; infarct volume; NIHSS

　　目前髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)作为脑损伤的特异性标志物开始在国内外大量研究，它的检测对判断脑缺血的严重程度及预后有重要意义，并期望对脑梗死的进一步治疗提供帮助。MBP是组成中枢神经系统髓鞘的主要蛋白质。脑梗死后髓鞘会受到不同程度的累及，由于血脑屏障的破坏，使MBP等进入血液中。本课题采用酶联免疫法(ELISA)动态检测脑梗死患者MBP的血浆浓度变化,并进行临床对比分析，探讨其与梗死体积、梗死部位、美国国立卫生研究所脑卒中评分(NIHSS)[1]等方面的相关性。

　　1 对象及方法

　　1.1 对象病例组：50例急性脑梗死病例均为本院2002年4月~2003年12月在神经内科住院患者，其中男29例，女21例;年龄43~75岁，平均年龄(58.22±8.04)岁，平均住院(22.27±5.78) d。所有患者均在发病1～3 d入院(其中住院少于21 d者18例)。诊断均符合第四届全国脑血管病会议修订的诊断标准并经CT证实。对照组：男22例，女8例，年龄40~68岁，平均55.2岁，均为我院健康体检者，经神经系统及CT检查排除神经系统疾患。

　　1.2 方法

　　1.2.1 标本采集29例患者均在发病第1、3、5、7、10 d分别采集静脉血，另21例在2或3、5、7、10 d采血，其中有32例患者在发病21 d分别采血，其他患者因出院未能在21 d采血。对照组在体检后采血一次。标本采集放入抗凝管，迅速离心，分离血浆，-70 ℃冰箱保存待测。

　　1.2.2 试剂仪器 MBPELISA试剂盒购自华西医科大学基础医学院重组DNA教研室。仪器使用法国巴斯德研究所PR2100型550酶标仪。

　　1.2.3 MBP检测 按试剂盒使用说明书操作并计算结果。

　　1.2.4 头颅CT检查 全部病例在发病当天，32例在发病21 d分别进行头颅CT或MRI检查，了解梗死部位及体积大小。按Pullicino公式[2]计算梗死体积。将50例急性脑梗死按入院时CT面积分为大、中、小三型，其中小面积梗死12例(<5 cm3)，中面积梗死灶24例(5~10 cm3)，大面积梗死灶14例(>10 cm3)。梗死灶位于脑叶17例、基底节区14例、内囊区9例、脑干区6例、丘脑区4例。

　　1.2.5 NIHSS评分所有脑梗死患者在入院当天、10 d均进行NIHSS评分，其中18例患者在第21 d进行NIHSS评分，了解神经功能缺损情况。

　　1.2.6 统计学处理使用SPSS11.5统计软件包进行统计分析。所有实验数据以x±s表示，组内比较采用单因素方差分析，多个样本间的两两比较采用方差分析F检验以及皮尔逊(Pearson)相关分析等方法进行比较,P<0.05为差异有显著性。

　　2 结果

　　2.1 不同时间MBP浓度的变化 对照组血浆MBP检测结果为(1.51±0.39) μg/L，病例组患者24 h内血浆MBP浓度为(1.60±0.65) μg/L，第2、3、5、7、10、21 d检测MBP蛋白浓度分别为(1.85±0.69) μg/L、(2.96±1.337) μg/L、(7.63±2.85) μg/L、(4.20±1.84) μg/L、(2.05±0.85) μg/L、(1.66±0.57) μg/L，3～7 d的浓度与对照组比较有显著性差异(P<0.01、P<0.001)，第1、2、10、21 d分别与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。MBP的浓度在第3 d开始升高，5~7 d达高峰，第5 d最明显，峰值时间点位于(5.08±1.02) d，10 d左右开始下降，21 d可完全恢复正常。

　　2.2 不同梗死体积MBP浓度动态变化

　　图1 ACI患者不同梗死体积MBP的动态变化趋势图

　　从图1中可以看出梗死面积越大，脑梗死早期浓度升高越明显，恢复正常所需要的时间也越长。大面积脑梗死峰值浓度变化最明显在第5 d。中、小面积脑梗死没有峰值浓度变化趋势，其浓度明显低于大面积的脑梗死，早期浓度升高也不明显。14例大面积脑梗死中有8例MBP浓度均超过8.0 μg/L，有6例有中线移位的患者其浓度在10.0 μg/L左右。

　　2.3 ACI患者MBP的浓度与神经功能缺损程度的相关性 ACI患者3、5、7 d血浆MBP的浓度与第1、10、21 d的NIHSS评分呈显著正相关(γ(3,1)=0.625，P<0.01，γ(3,10)=0.568，P<0.01，γ(3,21)=0.625，P<0.01;γ(5,1)=0.566，P<0.01，γ(5,10)=0.443，P<0.01)，γ(5,21)=0.579，P<0.01;γ(7,1)=0.621，P<0.01，γ(7,10)=0.554，P<0.01，γ(7,21)=0.487，P<0.01)。第1、10、21 d的MBP浓度与NIHSS评分没有相关性。尤其以发病第5 d的MBP浓度与第1 d、21 d NIHSS评分的相关性最为显著。7例入院第3 d MBP浓度>8.0 μg/L,出院时NIHSS评分仍超过12分，提示预后严重不良。

　　2.4 ACI患者血浆MBP的峰值浓度与梗死部位的关系 MBP的浓度在第5 d达到峰值。基底节区、脑叶、内囊、脑干、丘脑的峰值浓度分别为(7.63±2.85) μg/L、(4.20±1.84) μg/L、(1.93±0.47) μg/L、(1.89±0.36) μg/L、(2.05±0.65) μg/L，基底节区梗死中的MBP浓度最高，在脑干梗死中的浓度最低，差异有显著性(P<0.01)。

　　3 讨论

　　MBP是髓鞘蛋白的主要成分之一，在中枢神经系统由少突胶质细胞合成，周围神经系统由雪旺氏细胞合成，在髓鞘的形成中起重要作用，并维持中枢神经系统髓鞘结构和功能的稳定[3]。各种原因导致的髓鞘破坏均造成MBP在血清或脑脊液中浓度增高，因此血清和脑脊液MBP测定在一定程度上反映了中枢神经系统有无实质性损害，特别是有无髓鞘脱失的一个较为特异性的生化指标，其含量的高低反映了损害范围的严重程度[4]。本研究采用ELISA法来测定MBP的浓度,结果表明：①ACI患者发病早期(3~7 d)血浆中MBP的浓度均高于对照组，而10 d以后的浓度和对照组无明显差别。这是由于脑梗死损伤累及髓鞘，MBP释放入脑脊液，由于血——脑屏障破坏或功能障碍，MBP可进入血液循环[5]。②ACI患者早期MBP的浓度尤其是它的峰值浓度与神经功能缺失程度(NIHSS评分)及梗死体积呈显著正相关。脑梗死后缺血核心区的髓鞘迅速释放MBP，如果缺血得不到改善，半暗带区的髓鞘也会发生坏死，并参与梗死周围区的炎症反应，梗死面积越大、病情越重这种效应就更明显。MBP的浓度也就越高。梗死体积大、病情重的ACI患者，MBP的浓度极高(MBP>10.0 μg/L)，且高含量的MBP持续存在，下降缓慢，被认为是脑组织再损害的表现[6]。血液中MBP含量与髓鞘破坏程度和范围呈正相关，脑梗死经过治疗后，缺血缺氧改善，临床症状好转，患者MBP的浓度显著下降，进一步说明脑梗死MBP浓度的升高是由于缺氧导致的髓鞘损伤所致。③ACI患者梗死部位不同，MBP浓度的高低亦不同。MBP在基底节区的浓度最高，在脑干的浓度最低。这是因为基底节区的病灶受损范围常常较广，髓鞘受累严重，蛋白更容易释放至血液和脑脊液中，测得的蛋白质浓度较高。MBP的浓度虽不能准确反映病灶的部位，但可以看出浓度高的病灶多不在中线位置上。 从以上结果可以看出：脑组织损伤后MBP在血浆中浓度的高低，虽然对脑梗死的诊断不具有特异性，但可反映髓鞘的损害程度，为判断急性脑梗死后中枢神经系统受损程度提供了定量信息;MBP在早期(3～5 d)浓度即可发生很大的变化，对于临床上早期初步判断病灶的大小、病情的轻重，预后的好坏有指导意义，它们能敏感地作为ACI的标志物，并为早期的治疗提供帮助。

　　【参考文献】

　　[1] Wityk RJ, Pessin MS, Kaplan RF, et al. Serial assessment of acute stroke using the NIH Stroke Scale[J].Stroke,1994,25(2):362-365.

　　[2] Lam WW, Leung TW, Chu WC, et al. Hyperacute extensive middle cerebral artery territory infarcts: role of computed tomography in predicting outcome[J]. J Comput Assist Tomogr,2004,28(5):650-653.

　　[3] Campagoni AT. Molecular biology of myelin protein from the central nervous system[J]. J Neurochem,1988,51:1.

　　[4] Lamers KJ, Vos P, Verbeek MM, et al. Protein S-100B, neuron-specific enolase (NSE), myelin basic protein (MBP) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) in cerebrospinal fluid (CSF) and blood of neurological patients[J]. Brain Res Bull, 2003,61(3):261-264.

　　[5] Hill MD, Jackowski G, Bayer N,et al. Biochemical markers in acute ischemic stroke[J]. CMAJ,2000,162(8):1 139-1 140.

　　[6] Hirashima Y, Endo S, Nakamura S, et al. Cerebrospinal fluid membrane-bound tissue factor and myelin basic protein in thecourse of vasospasm after subarachnoid hemorrhage[J]. Neurol Res,2001,23(7):715-720.