血浆血管内皮生长因子、尿微量白蛋白及β2-微球蛋白与过敏性紫癜患儿早期肾损伤的相关性
发表时间：2012-07-31 浏览次数：649次
作者：厉洪江,张迎辉,刘翠华,王小稳,田明 作者单位：郑州市儿童医院肾内科，河南 郑州 450053载
【摘要】 目的 探讨血浆血管内皮生长因子(VEGF)、尿微量白蛋白(MA)及β2-微球蛋白(β2-MG)与过敏性紫癜(HSP)早期肾损害的相关性。方法 73例HSP患儿分为皮肤型组23例、混合型组28例和紫癜性肾炎(HSPN)型组22例;对照组23例为健康体检者;治疗后组25例为治疗2周后临床无阳性症状、体征，出院前复查尿常规及24 h尿蛋白定量正常者。采用酶联免疫吸附测定-ABC法(ABC-ELISA)测定血浆VEGF，采用放射免疫分析法测定尿MA及β2-MG。结果 HSPN型组血浆VEGF、尿MA及β2-MG水平明显高于皮肤型组和混合型组(P<0.05，P<0.01)，治疗后组血浆VEGF、尿MA和β2-MG明显高于对照组(P<0.05);HSP患儿VEGF和MA呈正相关(r=0.444，P<0.05);VEGF和β2-MG呈正相关(r= 0.275，P<0.05)。结论 血浆VEGF、尿MA及β2-MG参与了HSPN的发病过程，是早期HSP并发肾损伤的敏感指标。
【关键词】 过敏性紫癜;血管内皮生长因子;β2-微球蛋白
Correlation of plasma vascular endothelial growth factor,urine microalbumin and β2-microglobulin with early renal injury in children with Henoch-Schenlein purpura LI Hong-jiang,ZHANG Ying-hui,LIU Cui-hua,et al (Department of Nephrology,Children′s Hospital of Zhengzhou,Zhengzhou 450053,China)
Abstract: Objective To explore the correlation of plasma vascular endothelial growth factor (VEGF),urine microalbumin(MA) and β2-microglobulin(β2-MG)with early renal injury in children with Henoch-Schenlein purpura (HSP).Methods Seventy-three cases of HSP were divided into skin type group(23 cases),mixed pattern group(28 cases) and Henoch-Schonlein purpura nephritis(HSPN) group(22 cases).Twenty-three of control group were healthy children.Twenty-five cases of post-treatment group had negative symptoms，normal urine analysis result and 24 h urine protein after 2 weeks treatment.Plasma VEGF was detected with enzyme-linked immunosorbent assay,Urine MA and β2-MG were detected with radioimmunoassay.Results The levels of plasma VEGF,urine MA and β2-MG in HSPN group were higher than these in skin type group and mixed pattern group(P<0.05，P<0.01),and these in post-treatment group were higher than these in control group(P<0.05).It was positive correlation between VEGF and MA(r=0.444，P<0.05),it was positive correlation between VEGF and β2-MG(r=0.275，P<0.05).Conclusion VEGF,MA and β2-MG may involve in the development of HSPN,they were sensitive marker of renal damage in early stage of HSP patients.
Key words: Henoch-Schonlein purpura;vascular endothelial growth factor;β2-microglobulin
过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)是儿童最常见的一种全身性变态反应性小血管炎性疾病，其发病率有逐年上升的趋势[1]。HSP早期肾脏损伤轻微，很少出现临床症状，常规的检查手段不能及早发现，以致错过治疗时机。作者通过检测HSP患儿血浆血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与尿微量白蛋白(microalbumin，MA)及β2-微球蛋白(β2-microglobulinin，β2-MG)的水平变化，探讨VEGF、MA、β2-MG与过敏性紫癜肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)的相关性及发病关系;探寻HSP早期肾损伤敏感的实验室指标，为该病的及早发现、及时治疗寻求新的理论依据。
1 资料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 HSP组 HSP早期患儿73例，男45例，女28例，年龄3～16岁，平均(7.4±2.6)岁。均为郑州市儿童医院2005年8月至2006年12月住院确诊患儿，诊断标准均符合1990年美国风湿病学会制定的HSP诊断标准[1]。患儿入院时常规检查血尿素氮、血肌酐、尿常规、尿红细胞形态、24 h尿蛋白定量、泌尿系统B超等检查，除外其他各类急慢性肾脏疾病。根据临床各型诊断标准[1-2]分组如下:(1)皮肤型组：23例，男13例，女10例，平均(6.9±2.4)岁;(2)混合型组：28例，男19例，女9例，平均(7.1±2.2)岁;(3)HSPN型组：22例，男13例，女9例，平均(6.9±3.1)岁。
1.1.2 对照组 选取健康体检者23例为对照组，男14例，女9例，年龄3～13岁，平均(9.1±2.6)岁。
1.1.3 治疗后组 HSP早期患儿治疗2周以后，明确临床无阳性症状、体征，出院前复查尿常规及24 h尿蛋白定量正常为治疗后组25例，男16例，女9例，年龄3.5～12岁，平均(6.8±2.3)岁，治疗后组儿童与过敏性紫癜患儿年龄和性别相比较无显著性差异(P>0.05)。
1.2 实验方法 (1)清晨空腹外周静脉血3 mL注入无菌肝素管，迅速摇匀，将抗凝血以1 500 r•min-1离心10 min，收集血浆0.50 mL•L-1于-80 ℃冰箱中保存待测;晨起留取新鲜中段尿约10 mL，1 000 r•min-1离心10 min，分离上清液，置于-80 ℃冰箱中保存待测。(2)测定血浆VEGF采用酶联免疫吸附双抗体夹心ABC-ELISA法(上海森雄科技实业有限公司提供试剂盒)，测定尿MA及β2-MG采用放射免疫分析法(北京科美东雅生物技术有限公司提供试剂盒)，操作步骤严格按照说明书进行。
1.3 统计学处理 采用统计学软件SPSS 12.0处理，数据以x±s表示，组间比较采用t检验,每两组样本所在的总体方差齐同;相关性分析采用直线回归相关分析。以α=0.05为检验水准，以P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 HSP早期患儿不同分型组间VEGF、MA和β2-MG水平比较 HSPN型组血浆VEGF、尿MA和β2-MG明显高于皮肤型组和混合型组(P<0.05，P<0.01);混合型组血浆VEGF、尿MA和β2-MG高于皮肤型组(P<0.05)，见表1。
表1 HSP早期患儿不同分型组间VEGF、MA和β2-MG水平比较(略)
Tab.1 Comparison of VEGF,MA and β2-MG in three groups与皮肤性组比较aP<0.01;与混合型组比较bP<0.05
2.2 HSP早期患儿治疗后组与对照组间VEGF、MA和β2-MG水平比较 治疗后组血浆VEGF、尿MA和β2-MG明显高于对照组(P<0.05)，见表2。
2.3 相关性分析 HSP患儿VEGF和MA呈正相关(r=0.444，P<0.05);VEGF和β2-MG呈正相关(r=0.275，P<0.05)。
表2 HSP早期患儿治疗后组与对照组间VEGF、MA和β2-MG水平比较(略) Tab.2 Comparison of VEGF,MA and β2-MG between post-treatment group and control group
3 讨论
HSP是儿科常见病，基本病理变化是全身性小血管炎。HSP早期损伤肾脏轻微，很少出现临床症状，常规的检查手段不能及早发现。有报道肾受累多发生于HSP起病后1个月内，尤以10～15 d时为发病高峰[1-3]。近年来，国内外不少研究目前都致力于探讨预防肾脏受损的方法和早期发现肾脏受累的指标。
VEGF又叫血管通透性因子或血管调理素，是1989年Ferrara等在牛垂体滤泡星状细胞体外培育液中首先纯化出来的蛋白质。正常成人肾脏中，VEGF主要分布于肾小球足细胞和肾小管细胞。具有增加血管通透性，促内皮细胞分裂、增殖等作用[4-6]。尿MA是指尿中白蛋白的排出量超出正常限值，但又未达到临床蛋白尿的阶段。MA是小分子蛋白质，正常情况下很少通过肾小球滤过膜，尿MA含量增加不仅反映了肾小球功能受损，也反映肾小管功能受损，是早期肾损害的敏感指标[1,3]。正常情况下，β2-MG由有核细胞(主要是淋巴细胞)产生，经肾小球滤过后，99%以上被近曲小管重吸收并分解。尿中浓度升高与肾小管重吸收功能降低有关[1,3]。HSPN型组血浆VEGF的水平高于皮肤型组和混合型组的水平，治疗后组的血浆VEGF水平高于对照组的水平，差异有显著意义，表明血浆VEGF水平在HSPN型组很高;血浆VEGF与尿β2-MG及MA呈正相关，表明VEGF在血中水平越高，肾损害程度越重。其原因可能涉及以下环节：(1)由于VEGF具有和肝素结合的能力和最强的血管通透作用，它的过度表达可减少肾小球基底膜阴离子数目，诱导肾小球内皮细胞的小窗形成，从而可能通过同时影响肾小球基底膜的电荷屏障及机械屏障，而导致肾小球滤过膜对血浆蛋白的通透性增加[7-9];(2)VEGF还可能通过诱导内皮细胞金属蛋白酶、间质胶原酶表达，增加纤溶酶原激活物、尿激酶型和组织型纤溶酶原激活物的表达和活性，使毛细血管基底膜蛋白分解，破坏基底膜而引起蛋白尿[10-13]。HSPN的肾脏病理改变以肾小球系膜增生为主,VEGF持续高水平表达可促进系膜细胞不断增殖,进而导致临床症状的出现,从而为HSP肾损害的早期诊断提供了实验室依据,并为临床HSP肾损害的治疗提供了理论依据。
本研究结果显示，HSP早期患儿血浆VEGF、尿MA及β2-MG水平明显增高，伴有肾损伤者升高尤为明显，治疗后有所降低但仍处于较高水平。本研究结果显示，血浆VEGF、尿MA与β2-MG检查肾受累的阳性率高于常规检查，能敏感反映早期肾脏损伤的情况，可作为HSP早期肾受累的指标。
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