氯胺酮抗士的宁惊厥作用的研究及ED50的测定

　　作者：鲍捷，陈湉，王莉，孙煦，黄腾，孟晶 作者单位：1.徐州医学院麻醉学院2005级4班，江苏徐州221004;2.徐州医学院麻醉药理学教研室

　　【摘要】 目的 测定氯胺酮抗硝酸士的宁小鼠惊厥的ED50。方法 将昆明种小鼠随机分为6组，每组10只，分别腹腔注射生理盐水(NS)或氯胺酮24.5、35.0、50.0、71.4、102.0 mg/kg,5 min后分别腹腔注射硝酸士的宁1.5 mg/kg，观察小鼠的惊厥发生率、潜伏期、强直持续期和死亡率，用序贯法、点斜法测定氯胺酮抗硝酸士的宁小鼠惊厥的ED50。结果 与NS组比较，K50.0组、K71.4组和K102.0组惊厥发生率均降低(P<0.05或P<0.01),K35.0、K50.0、K71.4和K102.0组小鼠死亡率均降低(P<0.05或P<0.01), 各组惊厥潜伏期均延长(P<0.05或P<0.01)，且呈剂量依赖性(r=0.9740，P<0.01)。氯胺酮抗士的宁惊厥的点斜法ED50的95%可信区间是44.8～64.3 mg/kg。序贯法ED50的95%可信区间是39.3～74.8 mg/kg。结论 氯胺酮的抗士的宁小鼠惊厥ED50的95%可信区间分别为44.8～64.3 mg/kg和39.3～74.8 mg/kg,其机制可能与甘氨酸受体有关。

　　【关键词】 氯胺酮;士的宁;惊厥;小鼠;半数有效量

　　Effects of ketamine against strychnine-induced convulsions and

　　the determination of its ED50 in mice

　　BAO Jie1, CHEN Tian1, WANG Li1, SUN Xu1, HUANG Teng1, MENG Jing2*

　　(1. Class 4, Grade 2005, School of Anesthesiology, Xuzhou Medical College, Xuzhou, Jiangsu 221004, China;

　　2. Department of Anesthetic Pharmacology, Xuzhou Medical College)

　　Abstract： Objective To determine the effects of ketamine and its 50% effective dose (ED50) during its therapeutic use against strychnine-induced convulsions in mice. Methods Kunming mice randomly divided into six groups (n=10) were given intraperitoneal injection of saline 0.1 ml/10 g or doses of ketamine (24.5, 35.0, 50.0, 71.4 and 102.0 mg/kg), respectively. 5 minutes later, 0.1 ml/kg of 1.5 mg/kg strychnine nitrate was administered i.p. to observe the incidence of seizures in mice, latency, duration of tonic state and mortality, and to determine the anticonvulsant ED50 of ketamine against strychnine-induced convulsions in mice using sequential method and spot-slope method. Results Compared with the NS group, the incidences of seizures decreased in K50.0, K71.4 and K102.0 groups (P<0.05，P<0.01); the mortalities significantly decreased in K35.0, K50.0, K71.4 and K102.0 groups (P<0.05，P<0.01), the seizure latencies were prolonged in all groups (P<0.05，P<0.01); in a dose-dependent manner each group can be shortened seizure latency (P<0.05, P<0.01), and a dose-dependent manner (r=0.9740, P<0.01). The 95% authentic range of ketamine ED50 against strychnine convulsion was 44.8-64.3 mg/kg by the grouping method and 39.3-74.8 mg/kg by the sequential method. Conclusion The anticonvulsant mechanisms of ketamine may be associated with glycin receptor.

　　Key words： ketamine; strychnine; convulsion; mice; ED50

　　临床上多种原因都能引发惊厥，惊厥往往给患者带来严重危害。传统的抗惊厥药多有较强的呼吸、 循环抑制作用，且作用时间较长，常与惊厥后期的“抑制相”叠加而加重抑制[1]。目前临床常用的静脉全麻药氯胺酮作用快而强，维持时间短，且对呼吸、 循环抑制轻，并且能避免与惊厥的“抑制相”叠加，极有可能成为更为理想的新型抗惊厥药。本实验室已发现：依托咪酯可以拮抗士的宁、NMDA引起的惊厥[2]，氯胺酮能对抗硝酸士的宁和电刺激引起的惊厥[3-5]，而本实验旨在测定氯胺酮对硝酸士的宁小鼠惊厥的ED50，为临床用药提供参考。

　　1 材料和方法

　　1.1 动物和药品 昆明种小鼠，体重18～25 g，雌雄不拘，由徐州医学院实验动物中心提供。氯胺酮由江苏省恒瑞股份有限公司生产，批号H32022820;硝酸士的宁由上海禾丰制药有限公司生产，批号020601。

　　1.2 实验方法 昆明种小鼠80只，序贯法用20只，点斜法用60只。点斜法时将小鼠随机分成6组，每组10只。分别腹腔注射生理盐水0.1 ml/10 g(NS组),氯胺酮24.5 mg/kg (K24.5组)、35.0 mg/kg(K35.0组)、50.0 mg/kg (K50.0组)、71.4 mg/kg (K71.4组)、102.0 mg/kg (K102.0组)，5 min后分别腹腔注射1.5 mg/kg硝酸士的宁，观察5 min内小鼠的惊厥发生率、惊厥潜伏期及死亡率，5 min后的惊厥潜伏期记作300 s。给予硝酸士的宁后小鼠出现后肢强直(强直型)作为惊厥指标。

　　1.3 统计学处理 用SPSS 11.5统计软件进行统计学处理，组间比较采用SNK法,小鼠惊厥发生率采用χ2检验;惊厥潜伏期用±s表示，并进行t检验。ED50值及其95%可信区间通过点斜法和序贯法的Dixon-Mood计算公式得出。

　　2 结 果

　　由点斜法公式得出ED50是53.7 mg/kg,95%可信区间是44.8～64.3 mg/kg。见表1。表1 点斜法计算氯胺酮抗士的宁惊厥的ED50由序贯法的Dixon-Mood计算公式得出ED50是54.2 mg/kg，95%可信区间是39.3～74.8 mg/kg。

　　各组动物的惊厥率、死亡率及惊厥潜伏期见表2。氯胺酮的抗惊厥作用与剂量有良好的相关性(r=0.9740，P<0.01)。表2 不同浓度的氯胺酮对硝酸士的宁引起小鼠惊厥表现的影响(n=10)与NS组比较：*P<0.05,**P<0.01

　　3 讨 论

　　惊厥是由于中枢神经系统因外界刺激，如化学物质、电刺激或其他物理刺激引起的骨骼肌的不自主和不协调的抽搐，后果严重，是临床常见症状。硝酸士的宁是选择性的甘氨酸受体拮抗剂,可使以甘氨酸为主要抑制性神经递质的脊髓内突触传递易化,导致惊厥[6]，因此硝酸士的宁是制造药物惊厥模型的常用药物。本实验采用硝酸士的宁1.5 mg/kg腹腔注射制造小鼠惊厥模型。

　　在本次实验的预实验中采取的是序贯法，本次实验结果显示，氯胺酮可以延长小鼠强直持续期和降低小鼠惊厥的发生率和死亡率，表明氯胺酮能够对抗士的宁所致的小鼠惊厥，且呈剂量依赖性。由于氯胺酮对抗士的宁所致的惊厥状态有显著作用，推测其抗惊厥机制可能是增强中枢神经系统抑制性递质甘氨酸的作用，也可能与甘氨酸受体有关，其抗惊厥机制有待进一步研究。

　　【参考文献】

　　[1] 谷丽,刘晓燕.电刺激致痫大鼠惊厥阈下脑放电动物模型的建立[J].中国当代儿科杂志,1999,1(4):206-208.

　　[2] 孟晶，戴体俊，段世明，等.依托咪酯抗实验性惊厥作用及其机制[J].中国药理学通报，2006，22(1)：124.

　　[3] Borris DJ, Bertram EH, Kapur J. Ketamine controls prolonged status eplipticus [J]. Epilepsy Res,2000,42(2-3):117-122.

　　[4] 孟晶,段世明,戴体俊.氯胺酮的抗惊厥作用及对兔呼吸、 血压的影响[J].徐州医学院学报，2007,27(8)：491-494.

　　[5] 孟晶,戴体俊,段世明,等.氯胺酮、依托咪酯、异丙酚抗电惊厥的实验研究[J].徐州医学院学报，2004,24(4):283-285.

　　[6] 陶成,张士善.抗惊厥和抗帕金森病药物实验[M ]∥卞如濂,陈修.药理实验方法学.2版.北京:人民卫生出版社,1991:675-677.