某国产全自动ELISA分析仪与TecanFameELISA系统的性能比较
发表时间：2014-06-03 浏览次数：1259次
随着进口全自动酶联免疫吸附试验（ELISA）分析系统广泛应用，国产ELISA系统也逐步成熟。尽管自动化的分析系统重复性较好，精确度和特异性较高，但是作为操作者必须解各种仪器性能，掌握其工作状态才能得出更准确的检测结果[1].瑞士TecanFameELISA系统各模块性能优良，已应用于国内多个医学实验室[2-3];国产艾德康Addcare1100全自动ELISA分析仪为近几年上市仪器，因此，有必要对其系统性能进行验证并与瑞士TecanFameELISA系统进行比较[4]. 1 资料与方法 1.1一般资料随机抽取本院80例丙型肝炎患者的标本进行病毒抗体检测。 1.2仪器与试剂AddcareELISA1100全自动ELISA分析仪（烟台艾德康生物科技有限公司），该仪器为全自动加样、洗板、孵育及酶标系统，分为前仓、后仓和两仓之间的洗板模块共3个部分，前、后仓各有16个孵育槽位，前仓配备8针加样系统，后仓配4针加样系统，洗板模块具有3个洗板位。Tecan加样系统（瑞士Tecan公司）作为前处理系统的为8针加样系统，Fame后处理系统（瑞士Hamilton公司）为密闭孵育、洗板、读板系统。甲基橙购自天津市博迪化工有限公司，对硝基苯酚购自天津市百世化工有限公司。丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（ELISA法）为上海科华生物工程股份有限公司产品。 1.3方法 1.3.1加样系统加样精度检测用电子天平称量加样针分别加样10μL和100μL蒸馏水的质量，每根加样针重复加样20次，计算其均值及变异系数（犆犞）。 1.3.2洗板机洗版残留量测定取3块空白酶标微孔板（96孔板），先用电子天平称取质量；再分别用两系统仪器以蒸馏水洗涤5次后，分别称取质量，计算洗板后总的残留液量及平均每孔的残留液量。 1.3.3酶标仪验证零点飘移：将微孔杯置于8个通道的相应位置，均加入200μL蒸馏水并调零，于490nm、530nm、640nm波长每30min测定一次，连续观察4h,其与零点差值的均值即为零点飘移。通道差和孔间差：取甲基橙溶液调吸光度在0.065~0.070,用蒸馏水调零，于450nm波长处进行测定，竖排吸光度差异是通道差，横排的吸光度差异是孔间差。灵敏度：精确配制6μg/mL重铬酸钾溶液，加200μL于小孔杯中，以0.05mol/L硫酸溶液作空白，于450nm波长（参比波长650nm）测定。其吸光度大于或等于0.01判定为结果满意。准确度：准确配制1mmol/L对硝基苯酚水溶液，然后以10mmol/L氢氧化钠溶液作25倍稀释，加入200μL于小孔杯中，以lmmol/L氢氧化钠作空白，于405nm波长（参比波长650nm）检测，其吸光度在0.395~0.408则判定为结果满意[5]. 1.3.4符合率比较两系统同时检测上述80例标本，结果根据说明书提供的S/CO值对结果进行判定，对两系统的符合率进行计算。 1.4统计学处理采用SPSS17.0软件进行统计学分析，犆犞值的比较采用配对狋检验，以犘<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1加样系统精度检测结果艾德康加样系统10μL加样体系的加样均值为10.164μL,总犆犞值为3.91%;Tecan加样系统10μL加样体系的加样均值为10.223μL,总犆犞值为2.96%;两系统之间比较差异无统计学意义（犘>0.05）。艾德康加样系统100μL加样体系加样均值为100.22μL,总犆犞值为0.72%;Tecan加样系统100μL加样体系的加样均值为100.02μL,总犆犞值为0.553%;两系统之间比较差异无统计学意义（犘>0.05）。 2.2酶标仪验证结果两系统酶标仪8个通道的零点飘移吸光度值均在0.0236±0.0038内波动；通道差为±0.0029,孔间差为±0.0014;灵敏度检测吸光度均大于或等于0.01;准确度验证两系统吸光度为0.398~0.405.符合临床应用的要求。 2.3洗板系统验证结果空白酶标微孔板用蒸馏水洗涤5次前、后的质量及每孔残液量见表1.艾德康洗板模块平均每孔洗板残留量小于0.4μL,Fame洗板系统残留量小于0.6μL,二者均能满足临床检测的要求。 2.4测定80例丙型肝炎患者标本的符合率比较两系统均准确检出43份阳性标本，37份阴性标本，符合率为100%. 3 讨论 在医学实验室中，仪器加样的准确性直接关系到结果的准确性[6],因此，本实验通过采用电子天平称量加样针加样10μL和100μL蒸馏水来测定2个系统加样的准确性[7],两系统加样差异均无统计学意义（犘>0.05）。两系统加样的准确性均较高，两仪器的偏倚均在各自厂家允许范围内[8],也在实验室检测的允许误差范围内。由于两系统均采用一次性加样针头加样，不存在携带污染问题，因此不用验证。在ELISA检测中洗板的好坏及洗板后残液量的多少直接影响了检测结果[9].两系统洗板机均采用吸针插入反应孔底部两点吸样方式，这样可以确保较少的洗板残液量[10].从称量结果可见，两系统洗板残留量均较低，对检测结果基本无影响。两系统酶标仪状态稳定，结果一致性好，内部固定误差小，能够满足临床需要。 综上所述，通过与进口TecanFameELISA系统比较，可以认为国产艾德康AddcareELISA1100全自动ELISA分析仪加样准确、洗板残留液少、酶标系统性能稳定，可以适用于临床免疫检测。 参考文献 [1]马文昭。丙型肝炎病毒抗体的检测及临床意义[J].中国现代医生，2008,46（13）：159. [2]杨玉峰，刘东，丁怡文。TecanFreedomEVOClinical全自动样品处理系统使用体会[J].实用医技杂志，2010,17（10）：967-968. [3]陈亚军，史桂兰，冯岭，等。TECANRMP150型全自动酶免仪应 用评价[J].临床和实验医学杂志，2007,6（10）：33-35. [4]赵飞雪。MicrolabFAME全自动酶免分析仪检测的影响因素及质量控制[J].检验医学与临床，2012,9（13）：1677-1678. [5]陈新瑞，杨一芬，唐亚梅。辉煌之星全自动酶免疫分析连体机性能综合评价[J].临床检验杂志，2004,22（4）：316-317. [6]杨昌国，许叶，张抗。精密度评价和方法比较中NCCLS评价方案的应用[J].临床检验杂志，1999,17（1）：44-46. [7]成军，孙关忠，郑怀竞，等。酶标仪性能评价与鉴定的基本方法及其初步应用[J].中华医学检验杂志，1998,21（1）：49. [8]王雁，徐楠楠，李立峰。TECAN全自动酶免分析仪应用体会[J].中国误诊学杂志，2010,10（18）：4383-4383. [9]闵志军，张建伟，张力超，等。全自动酶标分析系统常见故障及处理[J].中国输血杂志，2006,19（3）：225-225. [10]黄燕婷，黄惠。全自动酶免疫分析仪前处理加样系统检测HBcAb方法的优化[J].黑龙江科技信息，2009,13（36）：380. （收稿日期：2013-11-26）
