COX2在胃癌组织中的表达及与Hp感染的关系

　　作者：刘江月,徐洪平,张代娟　　作者单位：潍坊医学院病理生理学教研室，山东 潍坊

　　【摘要】目的探讨环氧合酶2(COX2)的表达与胃癌发生的关系及幽门螺杆菌(Hp)感染对COX2表达的影响，为研究Hp感染致胃癌的机制及以COX2为靶标的胃癌防治提供理论依据。方法 采用免疫组织化学染色法(SP法)检测对照组10例正常胃黏膜及实验组50例胃癌组织中COX2的表达情况，用快速尿素酶诊断法和13C呼气试验两种方法检测胃癌患者Hp感染状况，分析它们在不同组织中的表达及与胃癌的关系。结果 胃癌组织COX2的阳性表达率明显高于正常胃黏膜(P<0.001);COX2的表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。有Hp感染的胃癌组织中COX2的阳性表达率明显高于未感染者(P<0.05)。结论 COX2参与胃癌的发生发展且与胃癌的侵袭、转移及预后有一定的关系;Hp感染可能上调胃癌组织中COX2的表达。

　　【关键词】 胃肿瘤;COX2;Hp感染;免疫组织化学

　　环氧合酶(COX)是花生四烯酸合成前列腺素的限速酶，包括COX1和COX2两种亚型，COX2的过度表达可能是促进肿瘤发生发展的原因之一〔1，2〕。幽门螺杆菌(Hp)感染与胃癌发生相关，但其确切致癌机制目前仍不十分清楚。有学者认为 Hp可上调COX2 mRNA的表达〔3〕。COX2在胃癌中的表达规律及与Hp感染相关性的研究报道较少。本研究旨在探讨COX2在胃癌发生发展中的作用及与Hp感染的关系，为防治胃癌提供理论依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　2006年3月至2007年3月在本院肿瘤外科手术切除的胃癌标本共50例。其中，男38例，女12例，年龄33～77岁，平均61.3岁。所选胃癌患者术前均已进行Hp检测，但未行化疗、放疗，并且排除胃癌家族史。有Hp感染者29例。2006年12月取自本院胃镜室镜下活检正常胃黏膜标本10例(胃镜标本)作为对照。

　　1.2 方法

　　1.2.1 采用免疫组织化学染色SP法检测COX2的表达

　　所有标本经10%的中性甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，常规HE染色明确病理诊断。免疫组织化学步骤按说明书进行，用PBS液代替一抗作阴性对照。

　　结果判断以细胞质内出现棕黄色颗粒为COX2阳性细胞。使用Olympus病理图像分析系统进行免疫组织化学分析。无阳性着色细胞为阴性(-)，阳性着色细胞<25%为弱阳性(+)，阳性着色细胞25%～50%为阳性()，阳性着色细胞>50%为强阳性()。

　　1.2.2 Hp感染检测

　　用Hp尿素酶快速诊断法及13C呼气试验检测。两种方法检测均为阳性者视为Hp感染阳性。

　　1.3 统计学分析

　　采用SPSS25.5软件包进行统计学分析，采用χ2检验和四格表精确概率法。

　　2 结果

　　2.1 免疫组化染色结果

　　COX2阳性染色主要位于胃癌细胞质中，呈深黄色弥漫性分布。间质细胞(炎性细胞、内皮细胞及成纤维细胞)和平滑肌细胞中亦可见散在部分表达。

　　2.2 COX2在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达

　　COX2在胃癌组织中阳性表达43例，阳性表达率为86%;在正常胃黏膜组织中阳性表达1例，阳性表达率为10%，两组间比较差异有统计学意义(P<0.001)。

　　2.3 COX2在胃癌组织中的表达与临床病理特征的关系

　　COX2表达与胃癌患者性别(χ2=0.013，P=0.928，χ2=0.043，P=0.760)、年龄(χ2=0.241，P=0.433，χ2=0.134，P=0.500)无关。COX2在胃癌组织中的表达与肿瘤部位、临床病理分期、浸润深度、分化程度无关，差异无统计学意义(P>0.05)。与淋巴结转移有关，在伴有淋巴结转移的胃癌组织中阳性表达率(94.4%)明显高于无淋巴结转移者(64.3%)，差异有统计学意义(P<0.05)。 COX2表达与临床病理特征的关系

　　2.4 COX2在不同Hp感染者胃癌组织中的表达

　　胃癌组织中Hp感染阳性率为58%。COX2在Hp感染阳性胃癌组织中阳性表达25例，阳性表达率为86.2%;在Hp感染阴性胃癌组织中阳性表达10例，阳性表达率为47.6%，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。

　　3 讨论

　　COX是花生四烯酸代谢的关键限速酶，目前已发现至少有两种亚型：COX1和COX2。正常状态下COX2活性很低，在某些病理状态下COX2表达可迅速上升，如在肿瘤组织中就可出现高表达。已有研究表明,在结肠癌、食管癌及巴氏食管中表达增加〔4〕。本研究结果发现，COX2在胃癌组织中的阳性表达率为86%，显著高于在正常胃黏膜组织中的阳性表达率为10%，说明COX2可能与胃癌的发生有关。COX2在肿瘤发生发展过程中的具体作用尚不清楚,但普遍认为 COX2对胃癌的发生发展有促进作用。COX2能够促进细胞黏附，抑制细胞凋亡的发生，促进肿瘤侵袭和转移〔5～7〕。Chen等〔8〕对4种结肠癌细胞株研究发现，浸润能力最强的HT29/Inv3细胞株COX2表达最强，而COX2抑制剂伊托度酸(etodolac)可显著抑制其浸润能力，从而证实了COX2能提高结肠癌细胞的浸润转移潜能，促进结肠癌的恶性发展。本研究显示，COX2表达与胃癌淋巴结转移相关。由于淋巴结转移是影响预后的独立因素，因此，COX2表达增高，常提示预后较差。本研究表明COX2表达与胃癌组织学分化程度无关，这与Ohno等〔9〕报道一致。

　　Hp感染引起胃癌的致癌机制目前仍不十分清楚。Hahm等〔10，11〕研究发现Hp感染可以激活NFB从而诱导COX2和IL8的表达，这可能是Hp感染导致胃炎和胃癌机制之一。还有研究发现上调胃癌细胞及胃癌组织中COX2的表达，并能被COX2抑制剂所阻断〔12，13〕。本研究结果表明在所检测的胃癌患者中Hp感染率高达58%，在Hp感染的胃癌组织中的表达显著高于无感染的胃癌组织，表明COX2的表达与Hp感染有关，而在胃癌组织中COX2呈高表达，则可能与Hp致胃癌机制有关。

　　综上所述，Hp感染与COX2共同参与了胃癌的发生发展过程。这些可能为胃癌的早期诊断及在胃癌的防治、预防复发中提供理论依据，根除Hp与COX2抑制剂的应用可能都是非常重要的措施。

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