蜕皮甾酮软膏对家兔创面愈合的影响

　　作者：李钰珑,吴旭,张军花,郑高云,王武军　　作者单位：南方医院胸心血管外科，广东 广州

　　【摘要】目的 观察蜕皮甾酮软膏对家兔背部创面愈合的影响。方法 将48只家兔背部的144个创面(每只均有3个创面)随机分为3组，分别采用25 g•kg-1蜕皮甾酮软膏、软膏基质、云南白药创可贴治疗。其中12只家兔背部36个创面分别于处理后4 d、8 d、12 d通过创面愈合率评价治疗效果。其余36只家兔分别于造成创伤模型(造模)后4 d、8 d、12 d处死，每次12只，创面新生肉芽组织取材，常规制片和染色，通过毛细血管密度评价治疗效果。结果 造模后4 d，3组愈合率无显著差异(P>0.05)，创面毛细血管密度无显著差异(P>0.05);造模后8 d、12 d，蜕皮甾酮软膏组、云南白药组的创面愈合率、毛细血管密度均高于基质对照组(P<0.05)，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组无显著差异(P>0.05)。结论 蜕皮甾酮软膏能显著促进家兔背部创面的愈合。

　　【关键词】 创面愈合;蜕皮甾酮软膏;愈合率　　　　基金项目：南方医科大学南方医院院长基金(编号：20050017)

　　Effect of ecdysterone paste on wound healing in rabbits　　LI Yu-long，WU Xu，ZHANG Jun-hua，et al　　(Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery,Nanfang Hospital，Guangzhou 510515,China)

　　Abstract: Objective To observe the effect of ecdysterone paste on dorsal wound healing in rabbits.Methods One hundred and forty-four raw surfaces in 48 rabbits were divided into 3 groups randomly，there were 3 raw surfaces every rabbit，while the 3 raw surface was treated by 2.5% ecdysterone paste，Yunnan white powder，paste substrate respectively，the curative effect was to be evaluated by the rate of wound healing in the 12 rabbits on 4，8，12 days after operation，sacrifice the supernumerary 36 rabbits on 4，8，12 days after operation in batch，to make use of the neogenesis granulation tissue of the raw surface，the curative effect was to be evaluated by the blood capillary density in the raw surface.Results There was no significant difference in the rate of wound healing and blood capillary density among the 3 groups on 4 days after operation(P>0.05)，while there was evident addition to the rate of restitution and blood capillary density relative to the control group of substrate on 8 and 12 days after operation(P<0.05)，and there wasn′t significant differences between the ecdysterone paste group and the Yunnan white powder(P>0.05).Conclusion Ecdysterone paste can promote the dorsal wound healing in rabbits.

　　Key words: wound healing;ecdysterone paste;rate of restitution

　　蜕皮甾酮(ecdysterone，EDS) 在动物体内又称β-蜕皮激素，是一种昆虫变态激素，它能刺激昆虫真皮细胞分裂，产生新的表皮，导致昆虫变态，调节昆虫新陈代谢[1]。蜕皮甾酮能影响糖代谢，促进脂类代谢，免疫调节，影响中枢神经系统[2]。近年来文献报道蜕皮甾酮在心肌梗死急性期刺激心肌分泌产生血管内皮生长因子，促进缺血区血管生成，侧支循环建立，毛细血管密度增加，发挥心肌保护作用[3]，还能促进创伤愈合[4]，植物化学研究表明，蜕皮甾酮在植物界的分布不仅较动物界含量高，而且非常广泛。目前有关蜕皮甾酮在创伤缺损愈合中的作用研究较少，本研究分别以蜕皮甾酮软膏、云南白药、软膏基质为处理因素，观察比较对家兔创伤愈合的影响。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验药物与试剂 蜕皮甾酮(广州药品检验所提供，批号:100008-199404)，云南白药创可贴(云南白药集团股份有限公司生产，批号:070503)。软膏基质按照文献[5]中乳膏基质的制备方法制作，基质主要成分为甘油、硬脂酸、白凡士林。蜕皮甾酮加入软膏基质中调配成25 g•kg-1蜕皮甾酮软膏。LEICA RM-2135型石蜡切片机(德国莱卡公司生产);YT-6B生物组织摊烤片机(湖北孝感亚光医疗仪器厂)，显微摄影系统(Cool SNAP-Pro of monochrome，美国)，BA110S电子天平(Sartorius，德国)。

　　1.2 动物模型制备及分组给药 新西兰大耳白兔48只，雌雄各半，体质量2～2.5 kg，由南方医院实验动物中心提供(合格证号：2007A062)。将新西兰大耳白兔背部脱毛备皮，以戊巴比妥钠麻醉(35 mg•kg-1)，背部常规消毒，在家兔背中部脊柱两侧用外科方法切下皮肤及皮下组织，深约2 mm，显露出肌膜和肌肉组织，伤口圆形，直径约1.8 cm，每只均有3个创面，造成创伤模型(造模)[6]。每只家兔的3个创面分别纳入蜕皮甾酮软膏组、软膏基质组、云南白药创可贴组，蜕皮甾酮软膏组每日以25 g•kg-1蜕皮甾酮软膏1 g均匀涂于创面上再以敷料、胶带固定，每日盐水冲洗后换药1次，至活体实验结束;软膏基质组以基质1 g均匀涂于创面上，再以敷料、胶带固定，每日盐水冲洗后换药1 次，至活体实验结束;云南白药创可贴组用创可贴贴于创面，使创可贴中的药物覆盖到创面切缘，再以敷料、胶带固定，每日换药1 次，至活体实验结束。每只兔分笼饲养。

　　1.3 观察指标及检测方法 (1)愈合率：取12只家兔，分别于造模后即时、4 d、8 d、12 d以6倍焦距距离创面10 cm处对36个创面进行摄影，imagepro6.0plus软件处理扫描相片，计算伤口愈合率：创面愈合率=(原始创面面积 - 未愈合创面面积)/原始创面面积[7]。(2)毛细血管密度：另外36只家兔，术后4 d、8 d、12 d分别处死12只，取创面新生肉芽组织，行常规固定、包埋，切片经HE染色，光镜(400倍)观察，取毛细血管最多的5个视野的均数代表毛细血管密度(个/HP)。

　　1.4 统计学处理 应用SPSS 13.0软件，多样本均数比较采用单向方差分析(One-way ANOVA)。

　　2 结果

　　2.1 创面基本情况 造模后4 d，3组创面均红肿、渗液，但无明显感染，蜕皮甾酮软膏组红肿、渗液较轻，各组肉芽组织增生不明显。造模后8 d，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组创面湿润无感染，创口表面及皮下组织收缩明显，肉芽组织增生明显，而软膏基质组仍明显红肿、渗液，创面的收缩及肉芽组织增生与蜕皮甾酮组、云南白药组相比有明显差异。造模后12 d，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组创面干燥，表面结痂，已近于完全愈合，而软膏基质组部分创面仍有渗出，创面愈合明显较蜕皮甾酮软膏组与云南白药组差。

　　2.2 创面愈合率 造模后4 d，3组愈合率比较无显著差异(P>0.05)。造模后8 d，蜕皮甾酮软膏组、云南白药组的创面愈合率均高于软膏基质组(P<0.05)，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组无显著差异(P>0.05)。造模后12 d，蜕皮甾酮软膏组、云南白药组的创面愈合率均高于软膏基质组(P<0.05)，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组无显著差异(P>0.05)。见表1。

　　表1 3组不同时间创面愈合率的比较(略)

　　Tab.1 Comparison of the rate of restitution in different period in 3 groups

　　与基质对照组比较aP<0.05

　　2.3 毛细血管密度比较 造模后4 d，3组创面毛细血管密度比较无显著差异(P>0.05)。造模后8 d，蜕皮甾酮软膏组、云南白药组的毛细血管密度均高于软膏基质组(P<0.05)，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组无显著差异(P>0.05)。造模后12 d，蜕皮甾酮软膏组、云南白药组的毛细血管密度均高于软膏基质组(P<0.05)，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组无显著差异(P>0.05)。见表2。

　　表2 3组不同时间创面毛细血管密度的比较(略)

　　Tab.2 Comparison of blood capillary density in different period in 3 groups

　　与软膏基质组比较aP<0.05

　　3 讨论

　　伤口愈合是十分复杂的生物学过程，包括早期止血，伤口边缘组织的收缩，多种组织细胞的增生，毛细血管的形成，新的循环重建等。充分的血供为组织修复提供充分的营养物质，保证了组织再生所需，肉芽组织在创伤修复过程中起抗感染及保护创面、机化凝血块及坏死组织、填补伤口等作用，因此，有无健康的肉芽组织生长及充分的血液循环是伤口愈合的关键。本实验中，4 d时3组创面愈合率、毛细血管密度比较无显著差异，此时伤口主要处于炎症水肿期，创面以炎症渗出为主，肉芽组织生长在起始阶段，药物效果不明显;8 d、12 d时蜕皮甾酮软膏组与云南白药组肉芽组织填充最好，新生的毛细血管较多，毛细血管增多是创面微循环改善的重要标志，毛细血管为改善组织灌注，为创面提供充分的营养物质和氧供，必然有利于各种修复细胞增殖和发挥其功能活性，促进创面愈合。在8 d、12 d创面处于快速修复阶段，药物的促愈合作用体现的比较明显，蜕皮甾酮软膏组与云南白药组肉芽组织填充及毛细血管增生明显，可以看出蜕皮甾酮乳膏有明显促进创伤愈合的作用，与云南白药的效果相当。目前国内促进伤口愈合的药物有限，且主要以抗炎、止血、保护创面为主。本实验显示，蜕皮甾酮软膏在动物实验中有明显的促进创伤愈合作用，明显促进创面的毛细血管增生，改善局部血液循环，并具有一定的激素类作用，可抑制过度炎症反应、过度的瘢痕形成，作为一种新型制剂，为蜕皮甾酮在临床创伤的应用及研制创伤促愈合新型药物提供了依据。

　　【参考文献】

　　[1] 徐世清,戈志强,戴璇颖,等.20-羟基蜕皮酮的药理作用和医学应用研究进展[J].科技通报,2005,21(1):56-62.

　　[2] 周麟林.植物蜕皮素的资源、提取分离与药理作用[J].国外医药:植物药分册,2004,19(4):139-145.

　　[3] 晋 军,黄 岚,祝善俊,等.VEGF 在大鼠心肌梗死急性期表达的意义及蜕皮甾酮的促侧支循环作用[J].中国介入心脏病学杂志,2002,10(3):158-161.

　　[4] 侯 量,吴 旭,王武军.植物药有效成分蜕皮甾酮对伤口促愈作用的实验研究[J].新中医,2007,39(4):106-108.

　　[5] 马振友.常用皮肤科乳膏剂的制备与应用[J].中国皮肤性病学杂志,1999,13(5):302-303.

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　　[7] Mukherijee PK,Verpoorte R,Suresh B.Evaluation of in-vivo wound healing activity of Hypericum patulum(Family:Hypericaceae) leaf extract on different wound model in rats [J].J Ethnopharmacol,2000,27(9):315-321.