Ki-67在肾癌中的表达及临床意义
发表时间：2011-10-10 浏览次数：400次
作者：张宁妹,胡敏,李威武 作者单位：1.宁夏医科大学附属医院，银川 750004; 2.宁夏煤炭石嘴山中心医院，石嘴山 753200
【摘要】 目的 为探讨Ki-67蛋白在肾癌中的表达和临床意义。方法 应用免疫组化方法对40例肾癌组织进行Ki-67蛋白检测。结果 肾癌细胞中Ki-67蛋白表达阳性率为65%，Ki-67的表达与肾癌的病理类型无关(P>0.05)，和肾细胞癌分级、分期和预后相关(P<0.05)，Ki-67高表达和肾癌的术后转移相关。结论 Ki-67在肾癌组织中呈差异性表达，Ki-67高表达时(>30%)预示发生术后转移的可能性较大。
【关键词】 肾肿瘤;Ki-67;免疫组织化学
肾癌是常见的泌尿系恶性肿瘤。肾癌的转移情况复杂，迄今尚缺乏预测，因此，明确肾细胞癌的发生发展机制，找到准确判断肾癌的发展和转归肿瘤标记物，对临床选择合理的治疗方案提供客观和可靠的依据很有意义。本文选用Ki-67应用免疫组化技术对其在肾癌表达及其临床价值进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料来源
标本均为宁夏医科大学附属医院1998-2008年行手术切除的40例肾癌组织。其中男27例，女13例，年龄18～78岁，平均56岁。全部病例术前均未经任何放疗和化疗。标本均经10%福尔马林固定，石蜡包埋，4μm厚连续切片。病理组织学分型：透明细胞癌17例，颗粒细胞癌9例，乳头状细胞癌8例，混合细胞癌6例。组织学分级：按照1997年WHO推荐将FuhrmanⅠ、Ⅱ级合并为高分化26例，Ⅲ级为中分化8例，Ⅳ级为低分化或未分化6例。临床分期(2002年AJCC肾癌临床分期)：Ⅰ期17例，Ⅱ期11例，Ⅲ期7例，Ⅳ期5例。所有病例随访0.6～9年，其中8例发生术后转移，时间0.8～6年，转移部位为肺3例、肝脏2例、骨转移1例、同侧肾上腺1例、肝脏并骨转移1例。淋巴结转移11例，均为术后病理证实。选择远离肿瘤的正常肾组织5例作为对照观察，另选10例癌旁组织对比。Ki-67抗体及试剂购自福建迈新公司。
1.2 检测方法
采用石蜡标本集中连续切片，片厚4μm，免疫组化染色法采用Envision，按照说明书进行。用PBS代替一抗作为阴性对照。
1.3 结果判断标准
Ki-67以细胞核染成棕黄色为阳性染色的判断标准。高倍镜(×400)下选择10个有代表性的视野，每个视野计数100个肿瘤细胞，计算阳性细胞百分比。肿瘤细胞相应部位不着色为阴性(0);Ki-67阳性细胞数<10%为(+);10%～30%为(++);>30%为(+++)，+～++为低表达，+++为高表达。
1.4 统计学方法 应用SPSS 13统计分析软件，用秩和检验和卡方检验。
2 结果
2.1 Ki-67在肾癌组织中的表达
Ki-67阳性物质定位于细胞核。经HE染色确定，肾癌组织旁2cm外为正常肾组织，其中未见Ki-67阳性表达;经HE染色确定，肾癌组织旁2cm处为癌旁组织，其中低表达1例(1/40)。肾癌组织中Ki-67阳性表达率为65%(26/40)。Ki-67表达与肾癌组织类型无关(P>0.05)，和组织病理及临床分期相关(P<0.05);8例转移者中Ki-67低表达3例，高表达4例;未转移32例中低表达18例，高表达2例，χ2 检验P<0.05。
2.2 Ki-67表达与肾癌临床病理特征的关系
3 讨论
近年来研究证实Ki-67是增殖细胞中的核抗原，其表达反映了细胞增殖状况，现已成为检测肿瘤细胞增殖动力学的有效指标[1]。更多的研究发现，人类多种恶性肿瘤有Ki-67表达。林海利等应用免疫组织化学SP法对比研究前列腺癌和前列腺增生症发现，检测64例前列腺癌组织中Ki-67表达40例，81例前列腺增生中Ki-67表达8例，表1 Ki-67表达与肾癌临床病理特征的关系(例数)
生物学行为nKi-670++++++组织类型 透明细胞癌178531 颗粒细胞癌94221 乳头状细胞癌82321 混合细胞癌60222组织学分级 低分化60114 中分化82231 高分化2612950临床分期 Ⅰ179620 Ⅱ11540 Ⅲ70232 Ⅳ50023转移情况 未转移32131171 术后转移81124其敏感度63%，特异度90%，差异有统计学意义[2]。吴鸿雁等研究发现，Ki-67在正常大肠黏膜、腺瘤和大肠癌组中的表达差异有统计学意义：正常黏膜组，Ki-67表达率为36.36%(4/11)，并均为低表达;在腺瘤组，其表达率为94.74%(18/19)，均为低表达;在腺癌组，表达率为100%(120/120)，其中中等表达和高表达率分别为29.17%(35/120)和17.50%(21/120)[3]。
在泌尿系肿瘤中，以往Ki-67在膀胱肿瘤中的表达研究较多。有研究表明正常膀胱黏膜Ki-67生长指数常低，癌组织中Ki-67指数增高，与膀胱肿瘤级、期、复发、转移和预后相关[4-7]。目前对于Ki-67在肾癌表达的研究不多，国外学者Kirkali Z等[8]报道70例肿瘤细胞增殖活性(Ki-67LI)与肾细胞癌生物学特征之间的关系，Ki-67分数增高，肿瘤的临床分期及转移几率也相应增加(分别P=0.027，P=0.002)，与病理级别也有良好的相关性。另外，Ki-67分数低于10%与超过11%两组病例无病生存期(DFS)差别有统计学意义(P=0.0004)。多变量分析(Ki-67、血管生成、核形态测量)结果表明，Ki-67 LI是肾细胞癌独立的预后因素。Visapaa等[9]研究241例肾透明细胞癌的Ki-67的表达与预后关系，其中可检侧到Ki-67表达的有175例(73%)，平均肿瘤细胞Ki-67阳性率9%;发现Ki-67染色增强，肿瘤病理级别也增加(P<0.01);Kaplain-Meier曲线显示Ki-67阴性病例平均肿瘤特异性生存时间要长于Ki-67阳性病例，COX多变量回归分析结果表明，Ki-67的表达是有意义的预后判断指标(P=0.0216)。冯晓莉等研究发现肾透明细胞癌Ki-67平均指数约6.67%(阳性细胞数/600个肿瘤细胞)，其指数与肿瘤分级(P=0.030)、DNA倍体异常(P=0.006)显著相关，Ki-67指数越高肿瘤分级越高、DNA呈现异倍体，但与其他临床病理指标无显著相关性[10]。
本研究表明肾癌Ki-67蛋白在肾癌中呈差异性表达，与病理分级及临床分期、转移密切相关。术后组和未转移组高表达率高于未转移组(P<0.05)，提示肾癌Ki-67高表达(>30%)时，发生术后转移的可能性较大，其检测对判断肾细胞癌术后转移有一定的参考价值。
【参考文献】
[1] 易建中，张才全，谢元才，等.Cyclin E、P27、Ki-67蛋白在大肠癌中的表达及意义[J].江西医学院学报，2009，49(6)：25-33.
[2] 林海利，郑周达，陈森期，等.前列腺癌组织Ki-67表达及其临床意义的研究[J].中华肿瘤防治杂志，2007，14(23)：1805-1806.
[3] 吴鸿雁，樊祥山，孟凡青，等.TK1、Ki-67在大肠癌发生发展中作用及其相关性[J].临床与实验病理学杂志，2009，25(3)：282-286.
[4] Okamura K，Miyake K，Koshi Kawa T，et al.Growth fractions of transitional cell carcinomas of the bladder defined by the monoclonal antibody Ki-67[J].J Urol，1990，144：875.
[5] Mellon K，Neal DE，Robinson MC，et al.Cell cycling in bladder carcinoma determined by monoclonal antibody Ki-67[J].Br J Urol，1990，66：281.
[6] Asakura T，Takano Y，Iki M，et al.Prognostic value of Ki-67 for recurrence and progression of superficial bladder cancer[J].J Urol，1997，158：385
[7] Tsujihashi H，Nakanishi A，Matsuda H，et al.Cell proliferation of human bladder tumors determined by brdurd and Ki-67 immunostaining[J].J Urol，1991，145：846.
[8] Kirkali Z，Yorukoglu K，Ozkara E，et al.Proliferative activity，angiogenesis and nuclear morphometry in renal cell carcinoma[J].Int J Urol，2001，8(12)：697-703.
[9] Visapaa H，Bui M，Huang Y，et al.Correlation of Ki-67 and gelsolin expression to clinical outcome in renal clear cell carcinoma[J].Urology，2003，61(4)：845-850.
[10] 冯晓莉，鲁海珍，孙耘田.肾透明细胞癌中Ki-67指数、EGFR表达及DNA倍体的临床意义[J].临床肿瘤学杂志，2009，14(6)：505-509.
