TGF-β1和Ki67在原发性乳腺癌中的表达与临床意义

　　作者：唐卫,左朝晖,胡英斌　　作者单位：410013 湖南，湖南省肿瘤医院腹部外科

　　【摘要】目的 探讨TGF-β1和Ki67在原发性乳腺癌组织中的表达，探讨二者表达与原发性乳腺癌之间的关系，为临床评估和治疗乳腺癌提供参考依据。方法 用免疫组化(SP)方法检测251例原发性乳腺癌组织中TGF-β1和Ki67的表达,并进行相关性分析。结果 TGF-β1在原发性乳腺癌组织中的阳性率为54.98%(138/251)，Ki67在原发性乳腺癌组织中的阳性率72.11%(181/251) 。Ki67表达与TGF-β1表达有关(P <0.05)。结论 TGF-β1信号通路的异常导致原发性乳腺癌细胞增殖异常，而表达为肿瘤细胞Ki67升高。联合检测TGF-β1和Ki67可能有助于原发性乳腺癌预后的判断。

　　【关键词】 TGF-β1;Ki67;原发性乳腺癌;免疫组化

　　Expression of TGF-β1 and Ki67 in primary breast cancer and their clinical significance

　　TANG Wei，ZUO Chao-hui，HU Ying-bin.Department of Abdominal Surgery, Hunan Province Tumor Hospital, Changsha 410013,China

　　[Abstract] Objective To observe the expression of TGF-β1 and Ki67 gene in primary breast cancer， investigate the correlation of TGF-β1，Ki67 in primary breast cancer.Methods The expressions of TGF-β1 and Ki67 were dectected by immunohistochemistry in 251 cases of primary breast cancer tissue and the correlation of expression were analyzed.Results The expression levels of TGF-β1， Ki67 in primary breast cancer tissue was 54.98%(138/ 251)，72.11%(181/ 251).The expressions of TGF-β1 in primary breast cancer tissue were associated with the expression of Ki67( P<0.05).Conclusion TGF-β1 can raise the expression of Ki67 in primary breast cancer tissue，detecting the expression of TGF-β1，Ki67 in primary breast cancer may be helpful to predict prognosis.

　　[Key words] TGF-β1;Ki67;primary breast cancer;immunohistochemistry

　　乳腺癌是西方工业化国家最常见的女性恶性肿瘤，近年来在我国的发病率有上升趋势。本文通过免疫组化SP法检测TGF-β1和Ki67在原发性乳腺癌组织中的表达情况，探讨二者表达与原发性乳腺癌的关系。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 收集湖南省肿瘤医院腹部外科腹部外科2004 年2 月至2007 年2月保存的乳腺癌术后组织标本251例,其中女249 例,男2例,均经术后病理确诊。患者年龄24～81岁,中位年龄53岁。全部病例术前常规行骨照片、胸片、腹部超声或CT、血常规及生化、肝肾功能等术前检查未发现临床转移病灶及其他恶性肿瘤的依据,术后按照WHO 乳腺肿瘤组织学类型分类标准:浸润性导管癌223 例,浸润性小叶癌12 例,黏液腺癌9例,导管内癌7例。

　　1.2 免疫组织化学染色 采用SP法染色，石蜡包

　　埋的标本行4～5 μm组织切片，每例连续做3张切片。一张行HE染色，以观察细胞分化程度等病理特征。另两张分别行Ki67、TGF-β1蛋白免疫组织化学染色。切片常规脱蜡至水化后，置0.01M的PBS(pH 6.0)中，微波加热(95 ℃，10 min)修复抗原，3%H2O2室温孵育10 min以灭活内源性过氧化物酶。一抗为鼠抗人Ki67及TGF-β1单克隆抗体(均购自福州迈新生物制品技术开发公司)。具体实验步骤按照S-P试剂盒和DAB酶底物显色试剂盒(购自福州迈新生物制品技术开发公司)说明书进行。

　　1.3 结果判断 Ki67、TGF-β1蛋白表达阳性根据染色细胞所占比例和染色强度两者积分来判断。以细胞浆内或细胞膜上呈棕黄色或棕褐色为阳性，高倍镜下(400倍)对每张切片随机选择5个视野，每个视野计数100个细胞，共计500个。具体判断标准: A：按显色细胞数记分，阳性细胞数<1/3为1分，阳性细胞数1/3～2/3为2分，阳性细胞数≥2/3为3分;B：按细胞显色深浅记分，无阳性反应细胞为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。积分数=A×B。A×B=0判断为(-)，A×B=1～2判断为(+)，A×B=3～4判断为(++)，A×B=6～9判断为(+++)。

　　1.4 统计学方法 统计分析使用统计软件SPSS11.5进行。采用χ2检验、校正后χ2检验(1

　　2 结果

　　Ki67与TGF-β1表达的相关关系见表1。Ki67与TGF-β1表达的相关关系

　　3 讨论

　　以往认为，增殖失控是引起恶性肿瘤的唯一原因，新近研究表明细胞有控制其死亡的内部通路，在恶性肿瘤，细胞死亡的通路受到抑制，致使其寿命延长，即细胞凋亡受到抑制[1]。TGF-β1是一种重要的上皮细胞生长负性调节因子,可诱导细胞凋亡。TGF-β1与smad家族的信号传导共同诱导肿瘤细胞的生长抑制和凋亡。文献报道TGF-β1在前列腺癌、胃癌、乳腺癌等恶性肿瘤中呈过度表达,其过度表达在肿瘤转化、进展中起重要作用并与预后密切相关[2，3]。同时因肿瘤细胞对自分泌TGF-β1的抑制作用不敏感，则TGF-β1以旁分泌方式作用于周围组织，通过抑制周围组织增殖以减少肿瘤细胞增殖的空间限制、抑制T淋巴细胞产生毒性作用而逃逸免疫监视，以及使得VEGF分泌增加促进肿瘤血管生成等加速癌细胞的增殖、浸润和转移[4，5]。

　　Ki67为1983 年由Gerdes 等发现在增殖细胞中表达的一种核抗原,在分裂期表达增加，特别是M期达高峰，而度过分裂周期后迅速下降。目前已成为评价细胞增殖活性特异性的指标[6,7]，研究表明，Ki67表达能可靠而迅速地反映恶性肿瘤增殖率,其表达的高低对评价多种恶性肿瘤细胞的增殖状态、生物学行为的评估，肿瘤的临床化疗，推断其预后均有一定指导意义[8]。本研究结果显示TGF-β1与Ki67存在相关性(P<0.05﹚，和国内有相关研究显示TGF-β1与Ki67抗原相关分析Rs=0.64, P<0.01[9]相似，因此我们推论肿瘤细胞表面TGF-β1受体表达缺失或肿瘤细胞通过下调TGF-β1 受体表达而逃逸其介导的生长抑制，促进了肿瘤发生和进展;该信号通路的异常导致细胞增殖加速，从而使肿瘤细胞表达为Ki67指标升高。而如何控制TGF-β1信号通路的传递，可能对于乳腺癌治疗有极其重要的意义。通过检测二者在乳腺癌中的表达，对于估计原发性乳腺癌的治疗、预后有一定的参考价值。

　　【参考文献】

　　1 王旭东.TGF-β1及受体与肿瘤关系的研究进展.中国肿瘤临床，2005，32(7):1016.

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