胃肠道恶性肿瘤外周血骨桥蛋白检测的临床分

　　作者：刘卓然 作者单位：南华大学附属第二医院，湖南 衡阳 421001

　　【摘要】 目的：外周血骨桥蛋白(osteopontin, OPN)在胃肠道恶性肿瘤患者检测中的临床意义。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光免疫分析技术(CLIA)对21例胃癌、15例结肠癌、11例直肠癌患者手术前后外周血OPN和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的质量浓度进行检测，对照组为30例健康者。结果：胃癌患者外周血OPN和CEA检测的敏感性分别为67.6%、55.4%，结肠癌59.6%、51.1%，直肠癌57.2%、48.4%，特异性分别为89.5%和78.3%，67.5%和62.3%，62.2%和58.5%。联合检测的敏感性分别为75.4%、68.3%、59.0%。结论：OPN对胃肠道恶性肿瘤患者与CEA联合检测可提高胃肠道恶性肿瘤患者诊断的敏感性。

　　【关键词】 胃肠道恶性肿瘤 骨桥蛋白 测分析

　　Gastrointestinal Tract Malignant Tumor Circumference Blood Bone Bridge Protein Examination Linical Nalysis

　　LIU Zhuoran

　　(The Affiliated Second Hospital of Southern China University,Hengyang,Hu’nan 421001,China)

　　Abstract:Objective Circumference blood osteopontin(OPN), in the gastrointestinal tract malignant tumor patient examines the clinical significance.Methods Uses the enzyme unites the immunity adsorption test (ELISA) and the radioimmunoassay technology (RIA) to 21 example stomach cancers, 15 example colon cancers, around 11 example rectal cancer patient surgery circumference blood OPN and the cancer embryo antigen (carcinoembryonic antigen, CEA) the mass concentration, the control group is 30 examples. Results Stomach cancer patient circumference blood OPN and the CEA examination's sensitivity respectively is 67.6%, 55.4%, colon cancer 59.6%, 51.1%, rectal cancer 57.2%,48.4%, the specificity respectively is 89.5% and 78.3%,67.5% and 62.3%, 62.2% and 58.5%. The union examination's sensitivity respectively is 75.4%, 68.3%, 59.0%.Conclusion OPN may enhance the sensitivity which to the gastrointestinal tract malignant tumor patient and the CEA union examination the gastrointestinal tract malignant tumor patient diagnoses.

　　Key words: Gastrointestinal tract malignant tumor;Osteopontin;Examination analysis

　　骨桥蛋白(osteopontin, OPN)是一种分泌型酸性糖蛋白。近年来研究表明，OPN在肿瘤的发生发展和侵袭转移中具有重要的作用，外周血OPN作为一个新的肿瘤标志物与多种肿瘤的发生发展、侵袭转移和预后具有密切的关系[1]。笔者探讨外周血OPN作为在胃肠道恶性肿瘤患者检测中的临床意义，并与癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)进行了比较。肿瘤标志物检测具有方法简便、无创伤、结果客观等优点，得到了医学界广泛的重视。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　我院自2005年3月至2007年8月收治胃癌21例、结肠癌15例、直肠癌11例患者。其中男26例，女21例;年龄48岁～78岁，平均年龄57岁。21例胃癌按PTNM分期标准[2] 分期，Ⅰ期6例，Ⅱ期10例，Ⅲ期3例，Ⅳ期2例。15例结肠癌、11例直肠癌患者手术前后外周血OPN和CEA的质量浓度进行了比较。所有病例均经病理证实，术前未作治疗。对照组为30例健康者，平均年龄48岁。患者于治疗前和手术治疗后(10 d～28 d间隔)各采血5 ml，凝固后1500 r/min离心5 min，收集血清，-80℃保存。对照组取材方法同上。

　　1.2 仪器和试剂

　　OPN酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒购自武汉博士德生物工程公司，酶标仪是美国StatFax 2100型。CEA采用化学发光免疫分析技术(CLIA)，仪器是美国雅倍公司Abbott Axsym型，检测试剂是仪器配套的。

　　1.3 方法

　　OPN的检测按照试剂盒说明书操作，先按1 000 ng/ml、500 ng/ml、250 ng/ml、125 ng/ml、62.5 ng/ml、31.2 ng/ml、15.6 ng/ml的质量浓度制作标准曲线，>1 000 ng/ml的血清用生理盐水10倍稀释再测，以正常健康者的±1.96 s作为上下警戒值，计算上临界值为69.6 ng/ml，其余按说明书进行。CEA的检测按说明书进行，以5 ng/ml为上临界值。

　　2 结果

　　2.1 血清OPN和CEA检测的敏感性和特异性

　　见表1。表1 血清OPN和CEA检测的敏感性和特异性(略)

　　2.2 血清OPN和CEA与胃癌的临床及病理关系

　　见表2。表2 血清OPN和CEA与胃肠道恶性肿瘤的临床及病理关系(略)

　　3 讨论

　　肿瘤标志物是肿瘤细胞在癌变过程中由于癌基因的表达而生成的抗原和其他生物活性物质。可在肿瘤患者的体液及排泄物中检出，而在正常组织或良性疾病中不产生或产生极微[3]。近年来，OPN作为一个新的肿瘤标志物受到了广泛关注。Senger等在1988年应用Western blotting研究发现，肿瘤患者外周血中OPN表达明显增高[4]，1997年Singhal等应用ELISA方法检测了转移性乳腺癌患者外周血OPN水平，发现其与肿瘤的转移及患者的预后相关[5]。随后在大肠癌、肺癌、前列腺癌和卵巢癌等肿瘤的研究中发现，OPN是一个颇具潜力的肿瘤标志物，与肿瘤的发生、发展、转移和预后密切相关[6]。我科检测了21例胃癌、15例结肠癌、11例直肠癌患者血清OPN和CEA水平，除Ⅰ期外，其余各期均显著高于对照组，OPN的敏感性和特异性均高于CEA，OPN对胃肠道恶性肿瘤患者与CEA联合检测可提高胃肠道恶性肿瘤患者诊断的敏感性。OPN和CEA的联合检测也许对胃癌的转移具有更好的敏感性，依次为结肠癌、直肠癌。当然，和其他诊断方法一样，肿瘤标志物也不是寻找肿瘤的“万能钥匙”，它还存在许多不足，目前多个肿瘤指标联合监测对早期恶性肿瘤的灵敏度大约在50%左右[7]。因此，一方面医学界正在努力提高肿瘤标志物的诊断效率，另一方面我们也应以科学的方法和态度来应用、分析、评价肿瘤标志物的监测结果，满意的测试结果来自于符合要求的标本以及经过室内质控和实验室间质量评价，室内质控和室间质控的监测评价包括实验的重复性、采用的标准、所用基质的影响、动力学范围、参考品、稳定性、分析结果的理论数据、更应对患者的信息进行充分了解，确保实验结果的准确性[8]。

　　【参考文献】

　　[1]Rittling SR,Chambers AF.Role of osteopontin in tumour progression[J].Br J Cancer, 2004, 90(10):18771881.

　　[2]陈道达，吴在德.胃肿瘤外科学[M].第5版.北京:人民卫生出版社,2001：478508.

　　[3]Vogt MH,Lopatinskaya L,Smits M, et al. Elevated osteopontin levels in active relapsingremitting multiple sclerosis[J]. Ann Neurol, 2003, 53(6):819822.

　　[4]Senger DR,Perruzzi CA,Gracey CF,et al. Secreted phosphoproteins associated with neoplastic transformation: close homology with plasma proteins cleaved during blood coagulation[J]. Cancer Res, 1988, 48(20):57705774.

　　[5]Singhal H,Bautista DS,Tonkin KS,et al. Elevated plasma osteopontin in metastatic breast cancer associated with increased tumor burden and decreased survival[J]. Clin Cancer Res,1997, 3(4):605611.

　　[6]Fedarko NS,Jain A,Karadag A,et al. Elevated serum bone sialoprotein and osteopontin in colon, breast, prostate, and lung cancer[J].Clin Cancer Res,2001,7(12):40604066.