环氧化酶-2基因在乳腺癌组织中的表达

　　作者：李海军 作者单位：河北北方学院病理教研室，河北 张家口075000

　　【摘要】 目的：探讨环氧化酶-2(cos-2)在乳腺癌中的表达特点及其与临床病理参数的相关性。方法：采用免疫组织化学SP法，检测60例乳腺癌组织中环氧化酶-2的表达情况。结果：60例乳腺癌组织中环氧化酶-2阳性表达率为78. 33%。环氧化酶-2在临床分期Ⅰ～Ⅱ期的阳性率(83. 67%)明显高于Ⅲ～Ⅳ期阳性率(54. 55%)，两组间的表达有显著差异(P<0. 05)。在有、无淋巴结转移组间，环氧化酶-2阳性表达也有显著差异(P<0. 05);而在不同年龄组、病理类型及左右乳分组中的阳性表达差异无显著性。结论：环氧化酶-2在肿瘤形成的早期过程中产生，可能参与或促进肿瘤的形成。环氧化酶-2的检测可能对乳腺癌的早期诊断有实际意义。

　　【关键词】 环氧化酶-2 乳腺癌 免疫组织化学

　　Expression of Cyclooxygenase-2 Gene in Breast Carcinomas Tissues

　　LI Hai-jun, ZHANG Lin-xi, Fan Jie, et al.

　　Department of Pathology, Hebei North University, Zhangjiakou, 075000,China

　　【ABSTRACT】Objective： To explore the expression characteristic of cyclooxygenase-2(COX—2) gene in breast carcinomas and its relationship to pathoclinical parameters. Methods: Expression of COX—2 gene in 60 cases of breast carcinoma tissues was detected by SP immunohistochemistry. Results: The positive rate of COX—2 gene expression in 60 cases was 78. 33%. COX—2 expression between stage Ⅰ～Ⅱ and stage Ⅲ～Ⅳ had significant difference(P<0. 05). The positive rate of stage Ⅰ～Ⅱ (83. 67%) was much higher than that of stage Ⅲ～Ⅳ(54. 55%). Also, the positive rate of COX—2 expression in breast carcinoma with lymph node metastasis was obviously lower than without lymph node metastasis(P<0. 05). COX—2 expression in groups such as different age, differentiation and right or left breast had no significant difference. Conclusion: Increased expression of COX—2 gene may involved in the early stage of carcinogenesis of breast carcinoma, and/or may have promotion effect in the progression. Detection of COX—2 gene expression may have diagnostic value to the early stage of breast carcinoma.

　　【KEY WORDS】 Cyclooxygenase-2; Breast carcinoma; Immunohistochemistry

　　前列腺素内源性过氧化物合成酶，又称环氧化酶(cyclooxygenase, COX)，有2种同工异构体：结构型COX—1与诱导型COX—2。COX—2可通过多种致瘤机制参与肿瘤发生发展过程[1]，研究显示COX—2在许多肿瘤中过度表达，其中包括胃肠道肿瘤、前列腺癌、肺癌、食道癌等。对环氧化酶-2与乳腺癌的密切相关性及其在乳腺癌发生过程中可能的重要作用机制，近年来已日渐受到人们的关注。为进一步探讨COX—2在乳腺癌中的作用及为乳腺癌的防治提供理论依据，我们采用COX—2免疫组织化学的方法对60例乳腺癌手术标本及临床资料进行了相关性研究。

　　1 资料与方法

　　1. 1 标本来源收集我院病理教研室2002. 1～2004. 4月乳腺癌术后送检标本60例，年龄25～73岁，平均年龄50. 63岁。临床分期Ⅰ期13例，Ⅱ期26例，Ⅲ期9例，Ⅳ期2例。所有标本均经10%福尔马林液固定，石蜡包埋，4μm连续切片，HE染色，资深病理学医师重新光镜下观察确诊。

　　1. 2 免疫组织化学染色 采用SP法，主要步骤为：二甲苯脱蜡、梯度酒精脱水，3%双氧水室温处理10min，PBS缓冲液洗涤，专用微波炉进行抗原修复，正常山羊血清37℃封闭、一抗4℃冰箱过夜，次日顺序滴加二抗及三抗，DAB显色10～15min，苏木素复染胞核，脱水透明并用中性树胶封片。同时以已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。所有试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。光镜下观察切片，以胞浆内出现棕黄色颗粒视为COX—2阳性细胞，以阳性细胞数所占比例(5个高倍视野)>5%时为本例阳性表达。

　　1. 3 统计学处理应用SPSS11. 0统计软件进行统计分析，组间比较采用χ2检验。当P<0. 05时认为差异具有显著性。

　　2 结果

　　60例乳腺癌组织中有47例COX—2阳性表达，其阳性表达率为78. 33%。COX—2在临床分期Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期中的表达有显著差异(P<0. 05)。在有淋巴结转移和无淋巴结转移组间COX—2阳性表达也具有显著差异(P<0. 05)(见表1)，而在不同年龄组、病理类型及左右乳中的阳性表达差异无显著意义(P>0. 05)。 表1 COX—2的表达与临床病理病理特征的关系

　　3 讨论

　　目前有关环氧化酶-2参与肿瘤形成的机制尚不完全清楚，但有研究认为可能的机制为：(1)促进细胞增殖和抑制细胞凋亡，使DNA受损细胞的生存期延长与凋亡抑制相关的bcl-2蛋白增高，与凋亡调节相关的转化生长因子β2受体下降。(2)COX—2催化形成的前列腺素，可抑制机体对肿瘤细胞局部免疫。(3)促进内皮细胞的迁移和管腔形成，从而刺激血管形成。(4)催化氨基酸形成具有诱变作用的丙二醛，直接诱导癌基因形成或导致P53等抑癌基因的失活[2]。COX-1和 COX—2是催化前列腺素合成的关键性酶，后者在大多数正常组织中检测不到，是一种“早期即刻”基因。当炎症介质、生长因子、促癌剂等刺激作用时，它可以被迅速诱导产生，从而COX—2表达增高。本研究中，COX—2在乳腺癌组织中的阳性表达率为78. 33%，与韩正祥等[3]的研究结果相近而明显高于某些学者[4、5]的报道。本研究发现，COX—2表达与临床分期和淋巴结转移密切相关。COX—2表达在Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率明显高于Ⅲ～Ⅳ期;无淋巴结转移组的阳性表达率明显高于有淋巴结转移组。可见，COX—2在乳癌早期可能就大量表达，其表达产生于肿瘤形成的早期过程中。另外，虽然在不同病理类型中COX—2的阳性表达无显著差异，但导管内癌局部浸润阳性表达率要比浸润性导管癌高，也证明了这一点。因此，我们认为 COX—2在乳腺癌形成的早期过程中就可能大量表达，其表达可能参与或促进乳腺癌的形成，对已形成肿瘤的浸润进展可能不起重要作用。对COX—2进行检测可能对乳腺癌的早期诊断具有一定的实际意义。

　　本研究还显示，在不同年龄组、病理类型及发生部位中COX—2的阳性表达没有显著性差异，但明显提示年龄>50岁组COX—2阳性表达率较≤50岁组高，发生于左乳房的乳腺癌COX—2阳性表达率较右乳房偏高，是否有一定必然的关联，有待进一步研究。

　　有报道[6]发现：COX—2选择性抑制剂可以明显抑制乳腺癌大鼠模型癌变的发生，也有学者应用COX—2的选择性抑制剂如塞莱昔布(celecoxib)和非甾体类抗炎药预防乳腺癌及其他肿瘤取得了满意效果。因此，今后有可能应用COX—2的抑制剂对乳腺癌进行预防和/或对早期乳腺癌进行辅助治疗。

　　【参考文献】

　　1 战淑珺，江泽飞，宋三泰，等.COX—2抑制剂与乳腺癌关系研究进展[J].癌症进展杂志，2005，3(1)：45.

　　2 刘兰芳，杜新生，李燕，等.COX—2、VEGF在乳腺癌中的研究进展[J].承德医学院学报，2005，22(1)：65-66.

　　3 韩正祥，张敬川，王琳等.环氧化酶-2的表达与乳腺癌生物学行为的相关性[J].徐州医学院学报，2004，24(1)：32-34.

　　4 曹飞麟，毕铁男，潘印.COX—2在乳腺癌组织中的表达及临床意义[J].中国基层医药，2003，10(7)：680-681.

　　5 王西京，代志军，赵世平，等.乳腺癌组织中环氧化酶-2的表达及其意义[J].肿瘤防治杂志，2004，11(12)：1261.

　　6 Howe LR,Subbaramaiah K,Brown AM,et al. Cyclooxygenase-2:atarget for the prevention and treatment of breast cancer[J].Endocr Relat Cancer,2001,8(2):97-114.