血管内皮生长因子在乳腺良、恶性肿瘤表达的临床意义

　　作者：芦广萍 闫爱春 薄爱华 胡金萍 作者单位：(1.河北北方学院校医院，河北 张家口 075000;2.河北北方学院实验中心，河北 张家口 075000)

　　【摘要】 目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)在乳癌中过表达的临床意义。 方法：取乳腺腺瘤47例，乳腺癌95例，利用SABC法检测VEGF阳性率。 结果：VEGF在腺瘤中阳性率为25.53%(12/47)，在乳癌中阳性率为54.75%(52/95);在浸润性癌和有淋巴结转移组阳性率明显高于非浸润性组和无淋巴结转移组(P<0.05)。结论：VEGF过表达提示患者预后不良，检测VEGF对化疗方案选择有指导意义。

　　【关键词】 血管内皮生长因子;乳腺瘤;乳腺癌;免疫组织化学方法

　　基金项目：河北省科学技术研究与发展指导计划项目(编号：072761419)The Clinical Significance of VEGF Expression in Benign and Malignant Breast Tumour

　　LU Guangping，YAN Aichun,BO Aihua，et al

　　The University Hospital， Hebei North University,Zhangjiakou, 075000, Hebei,China

　　【ABSTRACT】 Objective： To investigate the clinical significance of VEGF expression in human breast cancer. Methods：For 47 cases with breast tumor and 95 cases with breast cancer，VEGF were examined by SABC immunohistochemical methods. Results：The positive rate of VEGF was 25.53%(12/47) in the breast adenoma and the positive rate of VEGF was 54.75%(52/95) in breast cancer.The positive rates of VEGF in invasive breast cancer and lymphmetastases group were significantly higher than that of noninvasive group and nonlymphmetastases group (P<0.05). Conclusion:The overexperssion of VEGF may be predict poor prognosis and VEGF examined is helpful for chemotherapy plan of breast cancer.

　　【KEY WORDS】 vascular endothelial all growth factor;Breast;Breast cancer;immunohistochemical methods

　　血管内皮生长因子(vascular endothelial all growth factor， VEGF)对肿瘤组织内血管及淋巴管生成有调节促进作用，因此，VEGF表达状况与肿瘤生长、浸润和转移有相关性[1～3]。VEGF在乳腺良、恶性肿瘤表达的意义，目前报告不多，我们采用SABC免疫组织化学技术，检测了47例乳腺腺瘤及95例乳腺癌标本中VEGF，旨在分析VEGF过表达与乳腺癌发生、发展及预后的相关性，为乳腺癌防治工作提供参考资料。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 收集河北北方学院附属第一医院肿瘤科乳腺癌切除标本95例(全部女性)，年龄分布32～74岁，平均年龄50.36岁，中位年龄50岁。乳腺腺瘤47例(全部女性)，平均年龄40.6岁，中位年龄38岁。

　　1.2 切片及染色 将新鲜标本固定于10%中性福尔马林液24h，常规脱水、透明、石蜡包埋;切片厚度5μm，平展于涂黏附剂的载玻片上，37℃贮存备用。免疫组化染色剂：兔抗人VEGF血清和SABC试剂盒购自武汉博士德公司;DAB显色剂购自北京金桥中杉公司。染色程序按试剂盒规程操作。阳性对照为已知阳性切片;阴性对照以PBS替代Ⅰ抗。

　　1.3 结果判断 VEGF阳性细胞的胞质呈棕黄色，凡切片中阳性细胞数>10%者即为阳性病例，否则为阴性病例。

　　1.4 统计学处理 组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有显著性。

　　2 结果

　　VEGF在乳腺癌或腺瘤细胞内分布在细胞质中，呈棕黄色，胞核不着色。腺瘤阳性者，呈现细胞增生活跃，其阳性率为25.53%(12/47)。乳腺癌中VEGF的阳性率为54.75%(52/95)。我们将浸润型导管癌及浸润型小叶癌归纳为浸润型癌;而导管内或小叶内癌归纳为非浸润型。VEGF在各类乳癌中的阳性率见表1。表1 VEGF表达与肿瘤病理学特征的关系 注:※与乳腺腺瘤组相比P<0.05;△与非浸润型乳癌组相比P<0.05;▲与非淋巴结转移组相比P<0.05 由表1可知浸润型乳腺癌组和有淋巴结转移组，VEGF表达率明显高于非浸润组和未转移组。

　　3 讨论

　　1971年Folkman[4]提出肿瘤生长对新生血管有依赖性新概念，发现缺乏血管的肿瘤体积很难超过1cm3，并认为肿瘤细胞与血管内皮细胞构成了统一体，血管内皮细胞可能受到肿瘤细胞产生的多种化学因子调节。正常组织中正负调控因子处于平衡状态，肿瘤细胞分泌的促血管生成因子超过抑制因子时，血管内皮细胞被激活，进入快速生长状态，VEGF便是一种肿瘤细胞分泌的、重要的、有活力的促血管生成因子。

　　VEGF又称血管通透因子(Vascularpermeability)，其基因定位于6号染色体(6P21.3)。由于编码蛋白的剪切不同，其VEGF分为五个异构体(VEGF121、145、165、189和206)，其中VEGF145对血管生成的影响力最重要。近来认为VEGF是一种分泌型蛋白质，分子量为3.4～4.5KD的糖蛋白，以二聚体的形式存在[5，6]。VEGF促肿瘤生长的功能可以归纳为4个方面：(1)促进血管新生，VEGF通过为内皮细胞表面存在的Ⅲ型酪氨酸激酶受体Fit1(VEGF)和/或KDR/FIK11(VEGF)结合，促进内皮细胞分裂、增殖、使血管延长或新生[7，8]。(2)增强血管通透性，有研究表明VEGF主要作用于毛细血管后微静脉或小静脉的内皮细胞，使内皮细胞窗孔开放、增多、血管内液漏出，这样导致胸腹水的形成，而且由于肿瘤细胞间质成分的改变造成癌细胞松散易于脱落，从而为肿瘤细胞进出血管和远隔转移创造了条件[9]。(3)VEGF可以干扰免疫系统的树突状细胞，阻碍其成熟，从而使树突状细胞呈递抗原能力下降，使肿瘤细胞逃避免疫监视[10]。(4)VEGF能使肿瘤细胞组织bcl2、p53等抑制凋亡因子增高(上调)，从而促肿瘤生长[11]。

　　本实验表明VEGF在乳腺良性肿瘤中较少表达，其中阳性者病理像呈现增生活跃。在乳腺癌中浸润型阳性率明显高于原位癌;有淋巴转移组阳性率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。本实验表明过表达VEGF不仅与乳腺癌发生有关，而且它还可以做为提示乳腺癌预后不良的指标之一。

　　目前抗血管形成(饥饿疗法)是治疗肿瘤的新概念，检测VEGF不仅是提示预后问题，而且是指导治疗的热点问题。研究认为采用VEGF抗体，可以完全阻断肿瘤血管的生长，消灭一条血管形成，可以防止100个癌细胞生长[12]。VEGF和VEGFR抑制已在临床试用，有望通过检测肿瘤VEGF，进一步推广新的抗癌措施的临床应用。

　　【参考文献】

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　　9 吴萍，金晓菲，叶晓锋，等.血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中表达及意义[J].中国肿瘤，2005，14(11)：754756

　　10Gabrilovich DJ，Chen HL，Girgis KR，et al.Production of VEGF by human tumors inhibits the functional maturation of dendritic cell [J].Nat Med，1996，2(10):10961103

　　11Habeck H， Odemthal J，Walderich B，et al.Analsis of a zebrafigh VEGF receptor mutant reveals specific of angiogenesis [J].Curr Biol，2002，12(16)：201203

　　12糜军.可溶性VEGF受体基因sfit1与反义VEGF核苷酸对新生血管形成的影响[J].癌症，2002，2(5)：464468