自制超声声学造影剂在超声造影指导乙酸治疗兔VX2 肿瘤中的应用

　　作者：陈翠京 白 玲 毛京宁 张 彦 范 雪 陈 伟 王 勇 作者单位：(中国人民解放军第307医院超声科，北京100071)

　　【摘要】 目的：评价自制声学造影剂在动态观察和指导经皮50%乙酸注射治疗兔移植肿瘤中的作用。方法：10只纯种新西兰白兔双侧大腿部种植VX2肿瘤12～21d行乙酸注射治疗。治疗前后应用自制声学造影剂配合彩色、能量和脉冲多普勒超声检查，并根据造影后残留血流部位确定乙酸再次注射部位及剂量，至肿瘤内血流完全消失。治疗完毕取出肿瘤标本送病理检查。结果：超声造影剂显著增强肿瘤彩色、能量、脉冲多普勒血流信号，显示残留肿瘤血流，10只肿瘤兔的18个肿瘤治疗后病检仅1个肿瘤内见瘤细胞，余肿瘤全部坏死。结论：自制声学造影剂在动态观察和指导肿瘤治疗中效果可靠。

　　【关键词】 超声检查;微气泡;乙酸;肿瘤治疗方案

　　Application of Selfmade Ultrasonographic Contrast Medium in　Treating Rabbits VX2 Tumor with Acetate

　　CHEN Cuijing，BAI Ling，MAO Jingning，et al

　　The 307 PLA Hospital，Beijing，100071，China

　　【ABSTRACT】 Objective：To assess the efficient sonography with contrast medium enhancement in guiding and monitoring percutaneous acetic ablation of tumors in the animal model.Methods:VX2 carcinoma was implanted into the thighs of ten New Zealand white rabbits and examined by color，power，and pulse Doppler before and after injection of 50% acetic into the tumors after twelve to twentyone days，injections of acetic were guided by ultrasound to sites of tumor vascularity，until all tumor vascularity had been obliterated.Then，all tumor samples were submitted for histologic examination.Results：Contrast enhanced tumor vascularity in color，power，and pulse Doppler over contrast medium.Incomplete ablated foci of tumor could only be identified with contrast medium enhancement.Histology showed complete ablation of all but one tumor.Conclusion：ultrasound enhanced tumor vascularity better by contrast medium.Ultrasound enhanced by contrast might offer an accurate means for guiding and monitoring percutaneous acetic injection for tumor ablation.

　　【KEY WORDS】 Ultrasonography，Microbubbles，Acetate，Antineoplastic protocols

　　本研究试图通过建立兔腿部种植瘤模型，应用自制声学造影剂配合超声多普勒检查动态观察兔种植瘤血供情况，指导和监视50%乙酸治疗肿瘤。评价超声声学造影剂在动态观察和指导肿瘤治疗中的作用，为临床指导肿瘤治疗提供可靠的方法。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验性兔腿部肌肉种植瘤模型制备 成年新西兰纯种兔10只，雄性，体质量2.5～3.5kg，种植VX2肿瘤，左右腿股四头肌各一，共种植8d后开始观察至肿瘤两径均大于1.5cm，开始治疗。

　　1.2 声学造影剂制备 本实验应用自制白蛋白氟碳微泡造影剂：按Porter TR等[1]方法将5%人血白蛋白(上海莱姆士生物制品公司)和C3F8气体(购自天津特种气体研究中心)混合，应用美国产XL2020型声振仪声振而成，此造影剂直径(4.8±2.5)μm，浓度(5.6±1.8)×108/mL，pH6.0。每次经兔耳缘静脉注造影剂0.2～0.3mL(0.1mL/kg)后用生理盐水1mL冲洗管道。经皮注射50%乙酸(北京化工厂生产，批号991018)治疗肿瘤前后分别应用造影剂观察肿瘤血流情况。

　　1.3 超声仪器及检查方法 应用美国产seguoia512，8C4探头，频率8MHz，造影前后仪器设置条件保持不变。检查内容：治疗前后腿肌肉肿瘤声学造影观察彩色、能量和脉冲多普勒血流情况，并将造影过程部分图象存入硬盘，230MHzMO拷贝。观察结果由两个有经验的超声医师完成。

　　1.4 肿瘤治疗 种植肿瘤长至两径线>1.5cm时(约12～21d)肿瘤体积在(1.8～34)cm3进行治疗，本组实验中13个肿瘤体积在(4.0～14.0)cm3之间。5个肿瘤体积>14.0cm3，2个肿瘤体积<4.0cm3。应用细针在超声引导下经皮50%乙酸多点注射治疗，每次注射量在3.0～5.0mL注射次数在1～3次。第一次给药量为肿瘤体积的1/2(肿瘤体积按椭圆形体积公式0.52×长×宽×高计算)，且不超过8mL，以后根据残留血流情况确定注射量，直至造影增强后肿瘤内血流完全消失停止治疗。治疗每次间隔30min。实验完毕，将瘤兔用过量戌巴比妥钠麻醉处死，取出肿瘤送病理。

　　2 结果

　　2.1 白蛋白氟碳微泡声学造影剂能显著增强肿瘤血流信号，反映肿瘤血供的多少、强度和分布情况。声学造影剂可观察残留肿瘤血流。在经皮乙酸注射治疗前后，分别经兔耳缘静脉注射0.1mL/kg自制造影剂，观察彩色和能量多普勒血流及部分脉冲多普勒血流。经耳缘静脉团注造影剂约3s出现彩色或能量多普勒血流增强。持续约2min，治疗前所见增强最显著的为肿瘤周边血流(图1，2)。肿瘤血流显示情况在彩色、能量多普勒与肿瘤病理血管数目相似。耳缘静脉注射造影剂后，脉冲多普勒血流明显增快，最大约比原来多普勒血流速度提高50%～70%。经乙酸治疗后，肿瘤实质回声明显增强(图3)，肿瘤血流逐次减少，血流频谱消失。

　　2.2 经皮穿刺注射50%乙酸后，2/20(10%)注射一次后造影，肿瘤血流即完全消失;10/20(50%)注射一次后剩有少量残留肿瘤血流，两次后血流完全消失;8/20(40%)注射三次后再造影血流完全消失。病理检查显示乙酸治疗后，肿瘤血流消失的20个肿瘤中，肿瘤细胞绝大部分完全坏死，少数细胞肿胀、变性，未见存活肿瘤细胞(图4)，治愈率为100%。

　　3 讨论

　　超声声学造影剂微泡的声学散射值比红细胞大1 000倍，经静脉注射进入血液循环后，使血液中有形成分的声学散射性能和多普勒信号大大加强，相当于增加了多普勒信号的来源，结果是彩色多普勒、能量多普勒、脉冲多普勒信号明显增强。这就使得原来肿瘤显示不出或不清的血流显示出来，原来只能显示片段的血流现在能显示出完整的走行，使我们能更清晰的了解肿瘤的血流及血循环状态，对真正做到利用血液动图1 造影前彩色多普勒显示肿瘤血流信号图2 造影后彩色多普勒显示肿瘤血流信号显著增强图3 第一次药物治疗后，肿瘤实质回声明显增强，

　　但周边仍见少量残余血流图4 50%乙酸治疗后，肿瘤细胞完全坏死，细胞结构消失力学信息指导肿瘤治疗起到积极的作用。

　　肝脏肿瘤的超声介入治疗疗效一方面依赖瘤体的组织灭活，另一方面有赖于肿瘤血流的阻断程度，后者则决定着肝癌介入治疗的中远期疗效，如果治疗后超声造影检查仍能显示肿瘤组织内有残留血流信号，则应进一步相关治疗。应用超声观察乙酸注射治疗肿瘤已有报道[2]，在超声指导下可快速准确地将穿刺针刺入要穿刺的部位，并能动态监视乙酸治疗情况，减少治疗时间。但乙酸治疗什么情况下停止很难掌握，常常表现为：①注射乙酸量过大，使部分正常健康组织在乙酸注射治疗中凝固坏死，损伤正常周围组织;②注射乙酸量过小，使肿瘤组织及血管凝固坏死不完全，达不到治疗目的;③虽乙酸量大，但由于用药部位把握不好，不能很好地破坏肿瘤组织和血管[3]。应用造影剂可增加肿瘤血流的显示，并可观察肿瘤血管的滋养动脉，增强了检测肿瘤治疗过程的敏感性，根据残留肿瘤血管位置，准确指导肿瘤组织的靶向治疗，使肿瘤细胞快速杀死。本方法同样适用于其它药物治疗、射频凝固坏死治疗[4]、微波治疗等局部治疗。

　　本实验只是对自制声学造影剂在动物腿部肌肉肿瘤检测评价中的初步研究。人类深在部位组织的肿瘤超声的敏感性更低，超声图象显示质量更差，肿瘤局部治疗后，肿瘤残余血流明显减少，彩色多普勒显示血流更加困难。超声声学造影剂能显著提高组织血流信号敏感性，使微小血流、低速血流充分显现出来，声学造影剂用于动态观察肿瘤血流，指导肿瘤治疗，将会给临床提供极大的帮助，使肿瘤治疗快速、彻底。

　　【参考文献】

　　1 Porter TR，Xie FK.Intravenous perfluoroproaneexposed sonicated dextrose albumin produces myocardial ultrasound contrast that correlates with coronary blood flow[J].J Am Soc Echocardio，1995，8:710718

　　2 曹林德，胡虞乾，布桂林，等.CT引导下肝肿瘤的乙酸灭活治疗初步报告[J].四川医学,2004，15(6):663664

　　3 Forsberg F，Liu JB，Merton DA，et al.Gray scale second harmonic imaging of acoustic emission signals improves detection of liver tumors in rabbits[J].J Ultrasound Med，2000，19:557563

　　4 吴文娟，崔慧先，田庆波，等.动脉栓塞治疗兔肝VX2肿瘤疗效的超声观察[J].中华超声影像学杂志,2005，14(10)：783786