上皮钙黏附素在结直肠癌中的表达及临床意义

作者：牛宏立，王万里    作者单位：洛阳东方医院，河南洛阳 471003

【摘要】  目的 研究结直肠癌相关的上皮钙黏附素（Ecadherin,Ecad）在不同结直肠黏膜中的表达及其与结直肠癌各种临床病理因素之间的关系。方法 标本来源于癌组织手术切除标本。免疫组织化学染色法检测Ecad，比较分析Ecad在不同结直肠癌组织中的表达。结果 随着结直肠癌浸润深度加深，Ecad膜表达缺失率升高，淋巴结转移组表达缺失率高于非淋巴结转移组。结论 Ecad表达可能参与结直肠癌的发生，并与结直肠癌浸润转移有密切关系。

【关键词】  上皮钙黏附素；结直肠癌；免疫组化

　　Expression of Ecad in Colorectal Cancer and Its Clinical Significance

　　NIU Hongli,WANG Wanli　　Luoyang Dongfang Hospital, Luoyang 471003, China

    Abstract:Objective  To evaluate the expression of colorectal cancer related Ecadherin(Ecad) in different colorectal mucosa and the relationship with the hispathology of colorectal cancer.   Methods  The samples were obtained from colorectal carcinoma resection specimens. The expression of Ecad was assayed by using immunohistochemical staining，compared and studied with the expression of Ecad in different colorectal carcinoma.   Results  The results showed the FEcad expression were increased markedly in colorectal cancer group as compared with adenomas and normal mucosa group.And the Ecad positive rate was related to the staging of carcinoma.and were in accored with  lymphanode metastasis group.   Conclusion  Overexpression of Ecad may be involved in the oncogenic potential of colorectal cancer and may be concerned with the invasion and metastasis of colorectal carcinoma.

    Key words:Ecadherin( Ecad)；colorectal cancer；immunohistochemistry staining

　　结直肠癌的发生、发展及转移是一个多因素、多阶段的复杂过程，涉及癌基因的激活、抑癌基因的失活、细胞黏附的改变及蛋白酶活性改变等多个环节。造成结直肠癌患者死亡的主要原因是肿瘤组织的过度生长导致机体的恶病质以及肿瘤浸润和转移。本实验采用免疫组化的方法分析Ecad在不同结直肠黏膜的表达情况及其与临床各种病理因素的关系，探讨Ecad在结直肠癌发生发展中的作用。

　　1  材料和方法

　　1.1  标本

　　癌组织标本来源于2002年1月～2008年12月洛阳东方医院普外科手术切除的标本和河南省人民医院2003年1月～2005年10月普外科手术切除的标本，共98例，男48例，女50例，平均年龄60岁。全部患者术前未接受放疗和化疗。根据癌肿部位分为直肠癌58例，结肠癌40例；根据组织学分型为高分化腺癌38例，中分化腺癌32例，低分化腺癌28例；根据浸润深度分为浸润未超过肌层组26例，浸润超过肌层72例；根据有无淋巴结转移分为淋巴转移组38例，无淋巴转移组60例；根据结直肠癌Dukes分期分为A～B期60例，C～D期38例。

　　1.2  检测方法

　　参照全国结直肠癌病理诊断标准分类，标本经10%中性福尔马林固定，常规脱水后石蜡包埋。采用免疫组化SP（链霉卵白素—过氧化物酶法）检测Ecad在不同结直肠黏膜的表达情况。统计工具采用SPSS10.0版软件。样本率比较采用2检验和四格表精确概率法，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2  结果

　　2.1  Ecad表达与结直肠癌临床各种病理因素的关系

　　Ecad膜表达缺失率在结直肠癌结肠组为50.0%，直肠癌组为62.1%,两组相比差异无显著性（P>0.05）。在不同浸润深度的结直肠癌标本中，Ecad膜表达缺失率在未超过深肌层组为46.2%，在超过深肌层组为61.1%，两组相比差异无显著性（P>0.05）。Ecad膜表达缺失率结直肠癌高、中（68.4%、62.5%）与低分化组分别为（35.7%），相比差异有显著性（P<0.05）。Ecad膜表达缺失率在结直肠癌有淋巴结转移组为84.2%，在无淋巴结转移组为40.0%，两组相比差异有显著性（P<0.01）。在结直肠癌不同Dukes 分期的标本中，Ecad膜表达缺失率在AB期组40.0 %，CD期组为84.2%，两组相比差异有显著性，P<0.01（见表1）。表1  Ecad表达与结直肠癌临床各种病理因素的关系（略）

　　3  讨论

    钙黏附素家族是一组跨膜糖蛋白分子，通过钙依赖的同种亲和性细胞-细胞间的黏附参与建立和维持细胞间的连接。其分子包括细胞外区、跨膜区和细胞内区，细胞外区含有组-丙-颉序列组成的黏附识别点，钙黏附蛋白藉此三肽序列来识别和介导同种细胞间的黏附反应[1]。Ecad是钙黏附家族的一个重要成员，人类Ecad基因定位于16q22.1，其编码蛋白分子量为120 KD，主要分布于所有上皮组织[2]。Ecad的前体是135 KD的多肽，合成后很快在高尔基体上加入碳水化合物成为成熟的多肽，并释放到细胞表面，钙依赖细胞—细胞间接触的诱导导致细胞表面Ecad分子迅速定位于细胞接触区，通过Ecad分子与邻近细胞形成同种连接。在Ecad介导的细胞—细胞间黏附中，Ecad起着细胞黏附的拉链作用[3]。许多临床和实验研究发现Ecad的黏附功能在人类大多数上皮细胞癌中常常丢失，包括结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、食道癌、胃癌、皮肤癌、肾癌[4]。最新研究发现，在高分化结直肠腺瘤向侵袭性肿瘤转化的过程中，Ecad表达缺失，Ecad功能下调与癌症的低分化浸润性生长相一致。在某些情况下，细胞交界处Ecad表达下降与肿瘤的分级有密切关系，可能是预后不良的指标[5，6]。Perl等研究发现，表达了Ecad的TiplTag2小鼠胰腺B细胞（可以发展为胰腺B细胞癌），肿瘤停留在腺瘤阶段停止发展，无Ecad表达的TiplTag2小鼠B细胞瘤则较早地发生癌变。提示Ecad介导的细胞-细胞黏附在腺瘤向癌的演进过程中可能是一个限速步骤[7]。张金明等的研究表明结直肠癌Ecad膜表达缺失程度明显强于正常黏膜，且与结直肠癌的生长方式、分化程度、淋巴结转移和Dukes分期有关[8]。Brabletz T等研究发现，在分化较好且发生了转移的结直肠癌中，肿瘤中心部位的细胞膜上仍显示高水平的Ecad。相反，在肿瘤浸润正常组织的前沿部分Ecad表达丢失。在转移灶中有以上相同发现，提示Ecad丢失促进了肿瘤的浸润转移，该分子表达是可逆的，并受肿瘤环境的调节[9]。

    Ecad在结直肠癌表达缺失或下降的机制目前认为有以下几方面原因：①Ecad基因转录和翻译异常。②Ecad启动基因甲基化。Kanazawa等的研究表明：4条染色体上2p、5q、17p、18q的杂合性丢失与分化差的结直肠癌的发生有关。大多数上述癌Ecad表达缺失或下降，这种异常表达的部分原因在于Ecad基因启动子区域的甲基化[10]。③Ecad多肽酶降解。近来发现有因素可以调节Ecad在结直肠癌的表达。Muller报道：Smad 4可以诱导结直肠癌细胞Ecad的表达，并可能会重建上皮的正常形态。Smad 4诱导的Ecad能招募Cat到细胞膜并恢复细胞-细胞间的黏附[11]。Palmer等的研究显示：1a，25（OH）2维生素D3可以诱导结直肠癌细胞株SW480ADHEcad的表达，并促进βcat（βcatenin）从细胞核到细胞膜的定植，因而提高了结直肠癌的分化程度[12]。Tan等报道：在人类APC（－）结直肠癌细胞上，抑制ILK(整合素相关酶)可以促进Ecad的表达，抑制βcatLEF/TCF依赖的转录，提示对ILK的抑制可以控制结直肠癌或其他癌肿的发展。

【参考文献】　　[1] Nigam AK,Savage FJ,Boulos PB,et al.Loss of cellcell and cellmatrix adhesion molecules in colorectal cancer[J].Br Cancer,1993,68(3):507-514.

　　[2] Berx G,Staes K,VanHengel J,et al.Cloning and characterization of the humaninvasio suppressor gene Ecadherin(CDHI)[J].Genomics,1995,26(2):281-289.

　　[3] Shapirol L,Fannon AM,Kwong PD,et al.Structural basis of cellcell adhersion by cadherins[J].Nature,1995,374(6520):327-337.