米诺环素局部用药对牙周炎患者龈沟液中NO水平的影响
发表时间：2011-11-30 浏览次数：531次
作者：李贵洪,陈翠萍,张辉 作者单位：包钢医院口腔科，内蒙古包头 014010
【摘要】目的观察应用米诺环素软膏治疗前后牙周炎患者临床指标及龈沟液中一氧化氮(NO)水平的变化。方法：成人牙周炎患者40例，随机分成米诺环素治疗组和非米诺环素治疗组。米诺环素治疗组常规牙周治疗加用米诺环素软膏，非米诺环素治疗组仅给予常规牙周治疗，对照组为门诊非牙周炎病例20例，记录各组牙龈指数(GI)、牙周探诊深度(PD)、附着丧失(AL),并用硝酸还原酶法检测各组龈沟液NO水平。结果：米诺环素治疗组牙龈指数(GI)、牙周探诊深度(PD)均明显低于对照组(P<0.05，P<0.01);而非米诺环素治疗组与对照组比较，上述指标未见显著差异。牙周炎患者龈沟液NO水平与对照组比较显著增高(P<0.05)，而加用米诺环素软膏治疗后，牙周炎患者龈沟液NO恢复至对照组水平。结论：米诺环素局部用药可显著降低牙周炎患者牙龈指数(GI)、牙周探诊深度(PD),并恢复龈沟液NO水平。
【关键词】 米诺环素;牙周炎;牙龈缝液;NO
NO具有广泛而重要的生物学功能，参与许多生理和病理过程，近年来广受关注[1]。体内高出生理浓度的NO是由诱导型一氧化氮合酶催化体内L-精氨酸与氧反应合成的。牙周炎是细菌感染性的慢性病变，治疗时需常规应用抗生素，选择敏感药物和合适剂型尤为重要。盐酸米诺环素是一种新型半合成四环素(二甲胺四环素)，对多种牙周致病菌具有较高的抗菌活性，是当前牙周炎抗菌药物治疗的理想药物。但局部应用盐酸米诺环素对牙周炎患者龈沟液中NO水平有何影响尚不清楚。本研究旨在评价盐酸米诺环素牙周袋内给药对成人牙周炎(AP)患者的临床疗效以及对龈沟液中NO水平的影响。
1 对象与方法
1.1 病例选择 本院口腔门诊确诊为成人牙周炎患者40例，其中男26例，女14例，年龄25～62岁，平均33.5岁。纳入标准：1≤牙龈指数(gingivalindex,GI)≤5;3mm≤牙周探诊深度(pro bingdepth,PD)≤6mm;1mm≤附着丧失(attachmentlevel,AL)≤5mm。近1年内未接受牙周治疗且近3个月未使用过抗生素及非甾体类抗炎药，平时不使用含抗菌、抑菌、抗炎药物的漱口水，全身健康，妇女未怀孕或哺乳。对照组为口腔科非牙周炎患者20例。
1.2 方法 选择患者左右象限中的1侧1颗牙的近中颊位点作为受试牙位点,选择对侧一颗牙同一位点为对照牙位点，要求两位点的GI、PD、AL接近，相差不超过1mm。患者1周前行龈上洁治，对受试牙行龈下刮治根面平整术，牙周袋内药物使用方法是将注射器的尖端放于近袋底的部位轻轻注入，直至袋口有糊剂溢出，1周后再给药1次，对照侧不给任何药物，第4周复查。
1.3 龈沟液采集 去除龈上菌斑后，用棉纱卷隔湿，微风吹干牙面，将无菌滤纸条(2mm×8mm)轻轻插入至龈沟底，停留30秒后取出纸条，放入微离心管中，用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH7.4)按1∶100稀释，振摇5分钟，离心10分钟，取上清液保存于冰箱中待检。
1.4 龈沟液NO水平测定 采用硝酸还原酶法。NO试剂盒购自南京聚力生物医学工程研究所。按说明书操作步骤操作，标准管内加入100μmol/L标准液100μL，空白管加入双蒸水100μL，测定管加标本100μL。然后，各管加0.1mL试剂Ⅰ，靠近液面上方加50μL试剂Ⅱ，混合器充分混匀。置37℃水浴1小时，加0.5mL试剂Ⅲ和0.5mL试剂Ⅳ，混匀置室温10分钟，540nm波长，0.5cm比色杯空白管调零，752紫外光栅分光光度计(上海第三分光仪器厂)测各样本试管消光值，按说明书上公式算出组织内NO含量。
1.5 统计学分析 所得各组值采用方差分析多个样本均数两两比较。
2 结果
米诺环素治疗组牙龈指数(GI)、牙周探诊深度(PD)均明显低于对照组(P<0.05，P<0.01);而非米诺环素治疗组与对照组比较，上述指标未见显著差异。非米诺环素治疗组牙周炎患者龈沟液NO水平与对照组比较显著增高(P<0.05),而加用米诺环素软膏治疗后，牙周炎龈沟液NO恢复至对照组水平。治疗前后两组牙周临床指标及NO含量的变化与对照组相比，*P<0.05,**P<0.01
3 讨论
研究表明，引起牙周炎的最常见原因是细菌。牙菌斑的细菌毒素、酶和代谢产物在炎症发生的初期具有重要作用[2]。在炎症过程中，促炎的胞质运动和细菌的菌壁成分促使诱导型一氧化氮合酶产生NO。来自革兰阴性菌的脂多糖(LPS)，以及TNF-α、IL-1和INF-γ已经被证实是产生NO的诱发物[3]。本实验证实，牙周炎患者龈沟液中NO增加，可以推测在牙周炎的损伤中LPS引起巨噬细胞、中性多形核白细胞、淋巴细胞和成纤维细胞产生过量的NO，NO是一种半衰期极短的氮代谢产物，被认为在多种组织的细胞内及细胞外活动中发挥重要作用，同时NO与多种炎症和自体免疫疾病的发病机制有关。因此，可以推测NO是一种普遍存在的分子，并且对与牙周疾病的发病机制有关的多种生物学功能起关键性作用，这些功能包括神经传递、血管舒张、细胞毒素和免疫调控等。
龈沟液中NO水平随牙周组织炎性破坏的加重而明显增高，与牙周临床指标GI、AL、PD呈显著正相关[4]。说明NO水平可作为牙周炎症病变的临床参考指标。米诺环素是广谱的抑菌剂，能抑制大部分牙周炎病原菌，体外实验证明米诺环素的抑菌效果优于其它抗菌药物。近年来，牙周炎治疗中局部用药有替代全身用药的趋势。本研究表明，局部应用盐酸米诺环素糊剂作为牙周炎治疗的辅助方法可显著改善牙周炎的临床指标，提高牙周炎的治疗效果，同时降低了龈沟液中NO水平。其作用机制可能与盐酸米诺环素在杀灭牙周袋局部病原菌的同时改善了牙周炎症有关。
【参考文献】
[1] 薛永志，章国良，步秀云.选择性iNOS抑制剂氨基胍减缓小鼠BCG免疫性肝损伤造成的P450降低[J].基础医学与临床，2004，24(8)：385-387.
[2] 张凤秋，吴织芬，万玲.牙周优势菌内毒素的生物学活性及与牙周炎相关的发病机制[J].牙体牙髓牙周病学杂志，2003，13(3)：166-169.
[3] 薛永志，章国良，步秀云.抑制NO诱生对BCG免疫性肝损伤中CYP1A2表达的影响[J].世界华人消化杂志，2004，12(8)：1948-1950.
[4] 谢敏，黄世光，吕芳丽.大鼠实验性牙周炎牙龈组织中一氧化氮含量改变的研究[J].实用口腔医学杂志，2006，22(5)：688-691.
