白细胞介素-1β 与Phoenix脓肿的临床相关性研究

　　作者：李莉 作者单位：马鞍山市中心医院湖东门诊部口腔科,安徽省马鞍山 243000

　　【摘要】 目的:比较Phoenix 脓肿和慢性根尖周炎渗出液中的IL-1β浓度;确定IL-1β浓度与临床及X线结果的相关性。方法:用标准纸尖法用于测量Phoenix 脓肿和慢性根尖周炎患者根管渗出液体积;用ELISA双抗体夹心法检测根管渗出液中的IL-1β浓度;以标准面积薄膜重量推算X线片根尖阴影面积。结果：Phoenix 脓肿组IL-1β浓度、渗出液体积、根尖阴影面积明显高于慢性根尖周炎组(P<0.0001);IL-1β浓度与根尖周炎临床参数中的肿胀、臭味密切相关(P<0.01)。结论：IL-1β主要参与根尖周炎急性期炎症反应，并在其病变过程中发挥重要作用。

　　【关键词】 Phoenix脓肿;渗出液;IL-1β

　　白细胞介素-1(interleukin 1，IL-1)作为一种多功能细胞因子，是重要的炎症介质，具有广泛的生物学活性，对它的研究正越来越引起众多学者的重视。现在已知存在两种不同的IL-1分子，IL-1α和IL-1β，它们是不同基因编码的多肽分子，能识别结合相同的受体并具有基本相同的生物学活性。IL-1β是在炎症反应和免疫应答中起重要调节作用的活性因子，近年来研究表明它参与了休克、关节炎、骨质疏松、白血病等多种疾病的发病过程，但有关根尖周炎方面的临床研究报道较少。本实验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测根尖周炎根管渗出液中IL-1β的含量，并探讨其与根尖周炎症的关系。

　　1对象与方法

　　1.1 病例选择随机选择日常门诊患者临床诊断为Phoenix脓肿[1](慢性根尖周炎急性发作)和慢性根尖周炎的恒牙各20颗，受试者年龄22～76岁，无全身性疾患，近3个月未用过抗生素或免疫抑制剂。

　　1.2X线检查X线片均用柯达E速双胶片，投照强度为70kV。根尖阴影面积的测量：用厚度一致的聚酯薄膜描记X线片根尖阴影面积，剪下后用分析天平(上海天平仪器厂，精确度0.1mg)称量薄膜重量，并以标准面积薄膜重量推算X线片根尖阴影面积。

　　1.3临床检查及诊断标准症状和体征：主要记录自发痛、咬合痛、叩痛、扪痛、根尖区红肿、窦道、牙齿松动度、牙髓活力和全身反应(有无低烧)等临床参数。诊断标准[1-2]:Phoenix脓肿：患牙有急性根尖周炎临床表现，X线片上根尖区有骨质破坏影像;慢性根尖周炎：患牙无明显自觉症状，有牙髓病史、反复肿痛史或牙髓治疗史，牙髓活力测验无反应，X线片上根尖区有骨质破坏影像。

　　1.4根管渗出液的收集无菌条件下常规干燥、隔湿，开髓，慢钻揭顶，扩大根管至#30，#30标准纸尖(德国Dentsply公司提供)插入根管达工作长度，累计吸液时间3min，记录每根纸尖的吸液长度，将纸尖湿润端剪入含有200μL 标本稀释液的无菌Eppendorf管中，4℃离心(4 000rpm,30min)，取上清，-70℃冻存。

　　1.5渗出液体积测量[3]制作#30标准纸尖吸液体积(所用液体为与渗出液相似的正常人血清)与湿润长度关系的标准曲线(图1)，求出回归方程，用此方程将纸尖湿润长度换算成渗出液体积。

　　图1 #30纸尖吸液体积与湿润长度关系曲线图(略)

　　1.6渗出液中IL-1β的检测仪器：全自动ELISA阅读计，美国Bio-Tek仪器公司生产。试剂：IL-1β试剂盒，深圳晶美生物工程有限公司进口分装产品。方法：ELISA双抗体夹心法。

　　1.7统计分析采用Sigmastat统计软件分析。病人按年龄分两组(≤35岁和>35岁);牙齿按前牙(切牙和尖牙)和后牙(前磨牙和磨牙)分为两组;X线根尖阴影分为小(直径<5mm)和大(直径≥5mm)两组[4]。

　　2结果

　　两组病人年龄、性别和牙位分布经χ2检验，P值分别为0.7897、 0.7518和0.7150，具有可比性。

　　经Mann-Whitney检验，Phoenix脓肿组与慢性根尖周炎组间IL-1β浓度、渗出液体积、根尖周炎阴影面积比较差异均有显著性(P<0.0001)，见表1。

　　表1两组根尖周炎渗出液中IL-1β及根尖阴影面积比较(略)

　　经逐步回归分析，渗出液体积与临床叩痛关系密切(P<0.01，bi为正);IL-1β的浓度与根尖区肿胀、臭味关系密切(P<0.01，bi为正);阴影面积的大小与根尖周炎临床症状中的叩痛、根尖区肿胀程度之间关系密切(P<0.01，bi为正)，见表2。

　　表2IL-1β浓度、渗出液体积、阴影面积影响因素的逐步回归分析(略)

　　*表示P<0.05， **表示P<0.01。

　　线性回归分析表明，Phoenix脓肿中IL-1β浓度与渗出液体积之间有明显相关关系(P=0.001)。阴影直径大的渗出液体积明显高于小阴影者(P<0.01)，见表3。

　　表3X线片根尖阴影直径与IL-1β浓度(略)

　　3讨论

　　本实验Phoenix脓肿组渗出液中IL-1β浓度、渗出液体积均明显高于慢性根尖周炎组，说明IL-1β与根尖周炎症的急性发作有关。动物实验表明，在根尖周炎的急性期，主要的炎症浸润细胞为中性多形核白细胞(polymorphonuclear leukocytes，PMNs)和巨噬细胞，而在炎症的慢性期，根尖周主要炎症细胞为淋巴细胞和浆细胞[5]。巨噬细胞和PMNs被认为是根尖周炎中IL-1β的主要分泌细胞[6]，故在根尖周炎症的急性期，根尖周组织分泌的IL-1β水平明显高于慢性期。

　　本研究显示，IL-1β浓度与根尖周炎临床症状的严重程度尤其是根尖区肿胀、臭味关系密切，表明IL-1β与炎症的进展有关。Phoenix脓肿组的IL-1β浓度为79.05±45.32pg/μL，高浓度IL-1β的出现可能是宿主炎症细胞与细菌产物相互作用所致。有研究表明，在细菌产物脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)的作用下，人单核细胞可快速表达mRNA产生IL-1β、TNF-α、IL-8等炎症细胞因子[7]。Phoenix脓肿中IL-1β浓度与渗出液体积之间有明显相关关系，提示根尖周炎症组织中IL-1β浓度越高，炎性渗出越多，IL-1β与炎性渗出关系密切。

　　IL-1β的浓度在根尖阴影大、小组间无差异，表明该因子浓度与根尖阴影的大小无关，这与以往的研究结果一致[4]。本实验Phoenix脓肿组的根尖阴影面积均值明显大于慢性根尖周炎组，且阴影面积的大小与根尖周炎临床表现中的叩痛、根尖区肿胀程度之间关系密切，提示随着根尖阴影面积的增大，根尖周炎症有加剧的危险。

　　本实验初步揭示了根管渗出液中IL-1β与根尖周炎的关系，但参与根尖周炎宿主反应的因子很多，深入研究渗出液中其它宿主调节因子与临床的关系有助于进一步了解根尖周炎症的发展规律。

　　【参考文献】

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　　[5] 于金华，俞未一，刘卫红，等.大鼠根尖周炎的细胞组成及其对药物治疗反应[J].口腔医学,2001,21:6-8.

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　　[8] Agarwal S, Piesco NP, Johns LP, et al. Differential expression of IL-1β, TNF-(, IL-6 and IL-8 in human monocytes in response to lipopolysaccharides from different microbes[J]. J Dent Res, 1995，74: 157-165.