高血压病人血浆同型半胱氨酸等活性物质浓度的变化及其意义

　　作者：赵燕平,王中英　　作者单位：菏泽医学专科学校内科教研室，山东 菏泽市 274000

　　【摘要】目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、肾上腺髓质素(ADM)、降钙素基因相关肽(CGRP)与血栓素B2(TXB2)等血管活性物质与原发性高血压(EH)的关系。方法：随机选取未经治疗的EH病人42例作为研究组，按高血压分级标准分为3个亚组,对照组由20例同期健康体检的正常人组成。采受试者空腹静脉血，用荧光法定量检测Hcy，以放射免疫法检测ADM、CGRP与TXB2。结果：(1)研究组血浆Hcy 、ADM、TXB2三者浓度明显高于对照组，而CGRP水平明显下降，有显著性差异(P均<0.01);(2) 研究组三个亚组1级组、2级组和3级组Hcy 、ADM、TXB2水平随着血压分级升高而升高，CGRP随血压分级升高而降低，组间差别有显著性(P<0.01);(3)研究组血浆Hcy与ADM浓度呈显著正相关(r=0.941， P<0.01)， 与CGRP呈负相关(r=-0.480，P<0.01);其余相关性均不显著。结论：血浆同型半胱氨酸、肾上腺髓质素、降钙素基因相关肽与血栓素的含量变化与高血压病的血压升高有紧密联系，提示它们参与了高血压的发生与发展。

　　【关键词】 高血压,同型半胱氨酸,肾上腺髓质素;降钙素基因相关肽

　　Changes of plasma homocysteine，adrenomedulin, calcitonin|gene|related peptide and thromboxane B2 in patients with essential hypertension and their roles in pathogenesis/ZHAO Yan|ping，WANG Zhong|ying//Chinese Journal of Cardiovascular Rehabilitation Medicine,2008,17(5):473

　　Abstract：Objective:To detect the levels of plasma homocysteine class(Hcy),adrenomedullin(ADM),calcitonin gene related peptide(CGRP) and thromboxane B2(TXB2) in essential hypertension(EH) patients and investigate whether they are involved in the EH pathogenesis.Methods:The 42 EH patients no received medication were randomly divided into 3 subgroups(class 1,class 2,class 3),20 healthy volunteers were enrolled as control group.The level of plasma Hcy was measured by means of fluorometric method while the levels of ADM, CGRP and TXB2 were determined by the method of radioimmunity.Results:(1) The levels of plasma Hcy,ADM and TXB2 were higher,whereas the level of plasma CGRP was lower in EH patients than those of normal controls(P<0.01).(2)The levels of Hcy,ADM and TXB2 increased,the CGRP level decreased in order in class 1 group, class 2 group and class 3 group and there were statistical differences between any two of the groups (P<0.01).(3)The plasma Hcy was positively correlated with plasma ADM(r=0.941， P<0.01), but negatively correlated with plasma CGRP(r=-0.480,P<0.01) in EH group.Conclusion:The change of plasma Hcy，TXB2 and CGRP level in EH patients suggest they that may be involved in the genesis and developmemt of hypertension.

　　Author′s　address：Department of Cardiology, Heze Medical College，Heze,Shandong,274000,China

　　Key words：Hypertension;Homocysteine;Adrenomedulin;Calcitonin|gene|related peptide

　　目前，对原发性高血压发病机制的研究已深入至分子水平，发现生物活性物质参与了高血压的发生、发展。同型半胱氨酸(Hcy)、肾上腺髓质素(ADM)、降钙素基因相关肽(CGRP)以及内皮素、心钠素等这些物质以自分泌/旁分泌的方式构成极其复杂的调节网络，在血管局部发挥其调节血管舒缩、细胞增殖、迁移和分泌等复杂的生物学作用[1]。本研究旨在阐明ADM、CGRP和血栓素(TXB2)等血管活性物质之间的相互关系以及它们在高血压发病中的作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 主要仪器、器械

　　SANYO医用低温冰箱(日本三洋电机株式会社);Fingli高速离心机LDZ5-2型(北京医用离心机厂);DFM-96型多管放射免疫计数器(众成机电技术公司);XLJ-Ⅱ型离心沉淀机(南京第一医疗器械厂);HITACHI低温高速离心机(日本日立工机株式会社);XW-80A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂);721型分光光度计(上海第三分析仪器厂);1 000μl、200μl、10μl微量移液器及吸头，玻璃试管、PP塑料管、EP管等。

　　1.2 主要试剂

　　Hcy荧光法测定试剂盒购自上海杏恩生物科技有限公司, ADM、CGRP、TXB2放射免疫试剂盒购自中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所。

　　1.3 研究对象

　　随机选取2005年2月～2005年6月在青岛大学医学院附属医院门诊初次确诊为高血压未采取任何药物治疗的病人42例作为研究组，排除继发性高血压。研究组男22例，女20例，年龄28～70，平均(48.71±10.12)岁，。根据2004年《中国高血压防治指南》确定的分级标准分为三个亚组：1级(轻度)组14例，男7例，女7例;2级(中度)组14例，男8例，女6例;3级(重度)组14例，男7例，女7例。选取我院健康查体人员20例，进行对照实验，其中男10例，女10例，年龄29～63，平均(46.40±11.14)岁。

　　1.4 检测方法

　　采受试者空腹静脉血，使用酶转换法定量测定血液中Hcy的总浓度，用放射免疫法检测ADM、CGRP与TXB2。

　　1.5 统计学方法

　　采用SPSS 11.5统计软件包，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间分析用t检验和Pearson相关分析，P<0.05为差异有显著性。

　　2 结 果

　　2.1 血浆Hcy、ADM、TXB2和CGRP的含量

　　研究组Hcy、ADM、TXB2水平明显高于正常对照组(P<0.01)，并且随高血压分级的升高而升高;研究组CGRP水平明显低于正常对照组(P<0.01);并且随高血压分级的升高而降低。

　　2.2 研究组血浆Hcy含量与ADM、CGRP间的关系

　　一元相关分析表明，血浆Hcy与ADM呈正相关， (r=0.941，P<0.01);与CGRP呈负相关(r=-0.480，P<0.01)。

　　3 讨 论

　　Hcy具有引起内皮细胞肥大、受损，内皮下水肿及纤维组织积聚，血管弹性膜断裂及紊乱，中层平滑肌细胞肥大、增生等作用，已经成为血管病的一个独立危险因素。ADM与CGRP则可扩张血管，抑制血管平滑肌的增生，与血栓素互有相关性，可能起到相互拮抗的作用，以保护血管的功能，维持血压平衡。本研究结果显示高血压患者血浆ADM、血栓素含量升高，而CGRP血浆浓度降低。

　　Hcy与高血压：Hcy是一种含硫分子的氨基酸,为蛋氨酸的中间代谢产物,即体内蛋氨酸经脱甲基等一系列反应生成[2]。在体内Hcy以氧化形式与一般蛋白质结合，并循环于血液中。本试验结果显示，Hcy水平研究组明显高于对照组(P<0.01)。其升高可能由遗传和环境因素共同引起。Hcy在血管中的作用可能与以下机制有关：(1)Hcy升高致内皮损伤，使动脉僵硬度增加：内皮依赖性舒张功能受损，血管可扩张性降低;并且血中Hcy升高可促进弹力纤维降解和胶原纤维的合成，血管中层弹性蛋白/胶原比例下降，进一步使大动脉可扩张性下降，僵硬度增加;(2)促进血管平滑肌细胞(VSMC)增殖，导致血管重构，1994年Tsai等[3]在大鼠主动脉VSMC培养基加入不同浓度的Hcy，发现其它可使细胞周期素D1和A(cyclinD1 A)的mRNA的表达增加，细胞DNA合成增加，促进VSMC增殖，且有剂量依赖性。另外，Hcy还可作用于低密度脂蛋白，影响到血脂的代谢，引起胞内胆固醇堆积[4]，损害肾脏功能等。

　　ADM与高血压：ADM作为一种新发现的血管活性多肽，与高血压、冠心病、心力衰竭等有密切关系。其主要生物活性：(1)舒张动脉、降低血压: ADM舒血管作用是通过NO实现的，ADM作用于血管内皮细胞，引起血管内皮细胞释放NO，NO再激活VSMC内鸟苷酸环化酶，使细胞内环鸟苷酸(cGMP)水平增加，导致血管平滑肌舒张;(2)抑制VSMC迁移、增殖和钙化：ADM通过cGMP信号传导抑制VSMC增殖，剂量依赖性抑制血小板衍生生长因子诱导的VSMC迁移，延缓高血压的发展，间接拮抗动脉粥样硬化，在人体观察到ADM是通过刺激血中cGMP浓度升高来传递信息，阻止VSMC迁移和增殖[5，6];(3)排钠利尿，维持体内钠水平衡;(4)抑制儿茶酚胺的合成;(5)抑制心肌肥厚;(6)拮抗胰岛素抵抗。据报道自发性高血压大鼠血ADM高于正常对照大鼠，与本研究ADM浓度明显高于对照组的结果相符，ADM与肾上腺升压素和内皮素间相互作用，参与了高血压的发病机制[7]。

　　CGRP、血栓素与高血压：CGRP是由Amera等于1982年通过分子生物学技术发现的多肽类物质，具有舒张外周血管，扩张冠脉血管，调节微血管通透性，促进新生血管形成，抑制VSMC增殖的作用。

　　血栓素A2是主要由血小板微粒体合成并释放的一种产物，具有强烈促进血管收缩和血小板聚集的生物活性物质，由于血栓素A2性质极不稳定，目前难以测定，而测定TXB2则可反映血栓素A2的水平。

　　本实验显示，高血压病人出现Hcy、ADM、CGRP和TXB2等物质的代谢紊乱，且以重度高血压病人最明显，其中Hcy与CGRP呈负相关，与血栓素和ADM呈正相关。在遗传因素和环境因素共同作用下，Hcy与血栓素等物质合成增多，为达到新的平衡，机体代偿性的合成ADM等物质增多。王晓红等人观察到，ADM、CGRP可呈浓度依赖性地抑制VSMC的蛋白激酶(PKC)活性分布和/或总活性发生改变，而抑制VSMC的增殖[8]。

　　有研究证明，缩、扩血管物质、促进和抑制血管增殖的物质存在着相互制约和相互促进的关系。因此，TXB2的合成和分泌增多，导致内皮受损，血管收缩，血流阻力增加;同时刺激VSMC增殖，使血管壁肥厚，血流切应力增大，血流搏动增强。在高血流切应力的作用下，机体为维持自稳态而反馈调控内皮功能，使ADM mRNA高度表达，ADM以时间依赖方式产生和释放增加。机体通过增加ADM的合成和释放，拮抗缩血管物质的增加，促VSMC增殖的有害作用，从而使机体达到平衡，维持血压至正常范围。当ADM等扩血管因素的增加不足以抗衡缩血管因素的作用时，就会发生高血压。因此，提高肾上腺髓质素、降钙素基因相关肽在体液中的表达，降低血浆血栓素浓度，将是有效地控制血压和预防动脉粥样硬化的一种新方法。

　　【参考文献】

　　[1]唐朝枢，齐永芬.血管活性肽与微循环[J].微循环学杂志，2004，14(3):1-4.

　　[2]Feikelsteine JD.The metabolism of homocysteine：pathways and regulation[J].Eur J Pediatr，1998，157(Suppl 2)：S40.

　　[3]Tsai JC，Perrella MA，Yoshizumi M，et al.Promotion of vascular smooth muscle cell growth by homocysteine：a link to atherosclerosis[J].Proc Natl Acad Aci USA，1999;91(14)：6369.

　　[4]Fryer RH，Wilson BD，Gubler DB，et al.Homocysteine，a risk factor for premature vascular disease and thrombosis，induces tissue factor activity endothelial cells[J].Arterioscler and Thromb，2000，13(9)：1327.

　　[5]Kohno M,Yokokawa K,Yasunari K, et al. Induction by lysophosphosphatidylcholine,a major phospholipid component of atherogenic lipoproteins, of human coronary artery smooth muscle cell migration[J].Circulation,1998,98(4):353-359.

　　[6]Kohno M, Yokokawa K, Kano H, et al. Adrenomedullin is a potent inhibator of angiotensin Ⅱ-induced migration of human coronary artery smooth muscle cells[J].Hypertension,1997,29(6):1309-1313.

　　[7]李俊芳，傅增伴，胡 建.原发性高血压患者胰岛素抵抗与肾上腺髓质素的关系[J].心血管康复医学杂志，2005，14(3)：218-219，223.

　　[8]Suan C， Louis M， Fouseca V. Hyperhomocysteinemia:An emerging and important risk factor for thromboembolic and cardiovascular disease[J].Clin chem,1996,106:709 722.