非索伪麻缓释片在健康人体中的药代动力学

非索伪麻缓释片是由盐酸非索非那定(60mg)和盐酸伪麻黄碱(120mg)组成的复方缓释制剂,为双层片,其中伪麻黄碱为缓释。临床可用于季节性过敏性鼻炎的治疗,不仅可以缓解过敏性鼻炎的症状,而且可有效改善鼻充血引起的鼻塞症状。日前非索伪麻缓释片中非索非那定和伪麻黄碱缓释制剂的各自单方或与其他药物复方制剂的药代动力学均有文献报道[1-4],但非索伪麻缓释片的药代动力学国内未见报道。本文研究了中国健康志愿者单次和多次口服非索伪麻缓释片后,非索非那定和伪麻黄碱的药代动力学行为,为临床应用提供理论依据。

对象、材料与方法

1  药品与仪器

非索伪麻缓释片,规格:非索非那定60mg和盐酸伪麻黄碱120mg,批号:20071101,北京某制药有限公司生产,项目批件号:2004204636。

1100高效液相色谱仪,美国Agilent公司;Q-TRAP液相色谱一串联质谱仪,美国Applied Biosystem公司。

2  受试者选择

12名健康志愿者,男女各半,平均年龄为(21.8±1.22)岁,平均体重为(58.4±6.78)kg,体重指数为19~24kg·m-2。受试者在试验前经病史询问、生命体征、心电图及血常规、尿常规、肝肾功能等检查判定身体健康。受试者既往无急慢性病史,药物滥用史,相关药物的过敏史或重大过敏史及嗜烟、酗酒情况;女性受试者未在孕期或哺乳期;试验前2周内未服用其他药物,试验前3个月内未参加其它临床试验,试验前24h至试验期间禁止饮酒、茶及含有咖啡囚和醇类的饮料。试验方案获中国医科大学附属盛京医院伦理委员会批准,受试者签署知情同意书。

3  试验设计及血浆样品采集

12名受试者先后接受单次和多次口服非索伪麻缓释片。给药前1d晚上,入住I期临床试验病房,禁食不禁水10h过夜。单次药代动力学研究,试验日早晨所有受试者在室温条件下空腹口服非索伪麻缓释片1片,用温开水200mL送服。给药2h后可适量饮水,继续禁食4h后可进清淡饮食。分别于给药前(0h),给药后0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0,100,14.0,24.0,34,0,48.0h于上肢肘窝静脉取血4mL,收集于肝素抗凝试管中,350Or·min-1离心10min,离心分离血浆后,置-20℃冰箱待测。完成单周期单次药代动力学试验后,进行多次药代动力学试验,每次1片,每天1次(早7:OO),连续服药8d。在第1,5,6,7,8d服药前和第8d给药后0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0,10.0,14.0,24.0,34.0,48.0h分别采集前臂静脉血4mL,离心分离血浆后,置-20℃冰箱待测。

4  测定方法[1，5]

列非索非那定色谱和质谱条件  Agilent TC-C18色谱柱(4.6mm×150.0mm,5um),流动相为甲醇-10mmol·L-1乙酸铵一甲酸(70：30:0.3),流速为0.8 mL.min-1。用正离子方式检测,离子喷射电压2000Ⅴ,温度500℃,源内气体1、2压力均为414kh,气帘气体压力103.5kPa,多重反应监测(MRM)。非索非那定和内标的解簇电压分别为70,55V,碰撞能量分别为50,15eⅤ,离子反应分别为m/z502.1→m/z171.2、m/z256.3→m/z167.l。

伪麻黄碱色谱和质谱条件  ZORBAⅩSB-Aq-C18色谱柱(4.6mm×150.0mm,5um),流动相为甲醇-10mmo1·L-1乙酸铵-甲酸(45:55∶0.55),流速为0.8mL·min-1。用正离子方式检测,离子喷射电压2000Ⅴ,温度5O0℃,源内气体1、2压力均为414kPa,气帘气体压力103.5kPa,多重反应监测(MRM)。伪麻黄碱和内标的解簇电压分别为24，29Ⅴ,碰撞能量分别为17,41eⅤ,离子反应分别为m/z166.1→m/z 148.2、m/z264.1→m/z58.0。

非索非那定血浆处理方法  取血浆样品100uL,加人内标溶液100uL,用甲醇沉淀蛋白,取上清20uL进行分析。

伪麻黄碱血浆处理方法  取血浆样品100uL,加入内标溶液100uL,加人0.1mol·L -1Na2C03溶液1OO uL,混匀;用乙醚-二氯甲烷(3:2)进行液液萃取,取上层有机相于另一试管中,40℃氮气吹干,用流动相300uL溶解残留物,取样10uL进行分析。

5 方法学考察

特异性  非索非那定,苯海拉明的保留时间分别为3.35,3.02min;伪麻黄碱和曲马多的保留时间分别为2.71,3.77min,血浆中内源性物质不干扰测定。

标准曲线及最低定量限  非索非那定和伪麻黄碱的线性范围均在2~600ng·mL -1范围,非索非那定的标准曲线方程y=2.29×10-2x-2.77×1093(r=0.9997);伪麻黄碱标准曲线方程y=1.01×10-2-3.73×10-2(r=0.9995)。非索非那定和伪麻黄碱的最低定量限均为2ng·mL-1

精密度及回收率  非索非那定质控浓度为6.OO,60.O0,480.0Ong·mL-1,日内、日间精密度分别为5.53%,4.58%,2.81%和2.02%,5.85%,5.69%,提取回收率分别为89.3%,90.6%,91.2%。伪麻黄碱质控浓度为6.O0,60.00,480.OOng·mL -1,日内、日间精密度分别为2.97%,4.57%,3.88%和7.41%,4.98%,4.O3%,提取回收率分别为90.9%,90.0%,89.5%。

稳定性

血浆样品进行经处理后室温放置12h、-20℃冷冻-室温溶解反复3次及-20℃冰冻放置45d,结果测试值与添加值的相对误差均小于5%,表明非索非那定和伪麻黄碱血浆样品稳定。

6  统计学处理

用DAS2.1.1软件计算药代动力学参数,Cmax和tmax用实测值,AUC0-1用梯形法计算,不同剂量组间和性别间差异用SPSS13.0软件计算。服从正态分布的数据用莎检验,不服从正态分布的数据用Mann-Whitney检验。

结果

1  平均血药浓度-时间曲线

12名健康受试者单次和多次口服非索伪麻缓释片后,非索非那定和伪麻黄碱平均血药浓度一时间曲线,见图1。

2  药代动力学参数

12名健康受试者单次和多次口服非索伪麻缓释片后药代动力学参数,见表1。

3  性别影晌

单次口服非索伪麻缓释片后,非索非那定的tmax,t1/2,Cmax,AUC0-1,Vd/F均女性低于男性,伪麻黄碱的CL/F,Vd/F女性低于男性,cmax,AUC0-1女性高于男性,但仅伪麻黄碱的CL/F性别间差异有统计学意义,其它参数性别间均无显著性差异。多次口服非索伪麻缓释片后,非索非那定的cmax,AUC0-1女性明显低于男性,CL/F,Vd/F女性明显高于男性,但仅CL/F,AUC0-1性别间差异有统计学意义,其他参数差异均无统计学意义。男性和女性非索非那定和伪麻黄碱的药代动力学参数,见表2。

4  安全性评价

本试验无不良反应主诉,未见不良事件发生。有1例碱性磷酸酶(ALP)比正常值下限低7.75%和I例血红蛋白(HGB)比正常值上限高1.33%,判定无临床意义。治疗前与治疗后,男性的ALP、总胆红素(TBI1)差异有统计学意义(P<0.05),肌酐(CREA)、红细艴l(RBC)、HGB差异有究计学意义(P<0.01);女性的直接胆红素(DBIL)、HGB差异有统计学意义(P<0.05),TBIL、RBC差异有统计学意义(P<0.01),其它指标差异均无统计学意义。

讨论

本结果表明,单次口服非索伪麻缓释片(含非索非那定60mg)的非索非那定的药代动力学参数与刘茜[4]报告的盐酸非索非那定胶囊(含非索非那定120mg)的研究结果除tmax(2.55h)以外,均有一定的差异,复方中的非索非那定较单方吸收增加,消除速度减慢。两者的给药剂量为1：2,但Cmax的比值为1:1.17,AUC的比值1：1.26,复方的CI/F降低20%,t1/2增加1倍。单次口服非索伪麻缓释片(含盐酸伪麻黄碱120mg)的伪麻黄碱的药代动力学参数与邹建军[2]报告的西嗪伪麻缓释片(含盐酸伪麻黄碱120mg)的研究结果比较,两者的Cmax、AUC和CL/F相似,但前者的tmax和t1/2(分别为5.7和6.6)均高于后者的(分别为4.8和5.51h)。以上差异可能由化合物本身的物理化学性质、药物制剂、药物的相互作用、受试者种族差异等导致的,仍有许多未知因素是有待研究。

参考文献

[1]Ma M,Feng F,Sheng Y. Development and evaluation of an efficient HPLC/MS/MS method for the simultaneous determination of pseudoephedrine and cetirizine in human plasma:application to phase-Ⅰ pharmacokinetic study[J].J Chromatography B Analyt Technol Biomed Sci,2007.105-111.

[2]邹建军,谷祥富,朱余兵. 健康受试者口服西嗪伪麻缓释片后伪麻黄碱的药动学[J].中国医院药学杂志,2007.888-891.

[3]赵红光,张一飞,于景翠. 盐酸伪麻黄碱缓释片的人体药动学及生物等效性[J].中国医院药学杂志,2006.11-13.

[4]刘茜,刘翠,尚宏伟. 盐酸非索非那定胶囊药物动力学及人体相对生物利用度研究[J].药物分析杂志,2007.1707-1710.

[5]Yamane N,Tozuka Z,Sugiyama Y. Microdose clinical trial:Quantitative determination of fexofenadine in human plasma using liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry[J].J Chromatography B Analyt Technol Biomed Sci,2007.118-128.