相差显微镜和血细胞分析仪联合检测鉴别血 尿来源
发表时间：2011-08-01 浏览次数：712次
作者：李永祥,吴华军,邵平扬,张黎霞 作者单位：314000 浙江省嘉兴市第一医院
血尿是泌尿系统疾病中较多见的一种临床疾病，根据血尿来源可以分为肾小球性和非肾小球性。作者利用相差显微镜观察尿中红细胞的畸形率、畸形红细胞种类，同时使用血细胞分析仪的稀释模式测定尿中红细胞平均体积(MCV)及红细胞体积分布宽度(RDW)，以探讨其在鉴别血尿患者红细胞来源中的价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
2003年9月至2005年11月本院住院的血尿患者157例，男73例，女84例;年龄11～69岁，平均47.1岁。其中72例经详细的病史、血、尿生化和免疫学检测及肾活检等证实为肾小球性疾病，包括急性肾炎21例，肾病综合征16例，紫癜性肾炎9例，糖尿病肾病9例，慢性肾炎7例，隐匿性肾炎5例，狼疮性肾炎3例，其他肾小球性疾病2例。非肾小球性疾病85例，其中包括肾结石23例，前列腺炎19例，输尿管结石17例，膀胱炎16例，肾盂肾炎3例，外伤3例，膀胱肿瘤2例，肾结核2例。血液红细胞对照组60例，均为在本院进行健康体检的人群，选择常规血细胞分析中，红细胞直方图分布正常的样本。
1.2 方法
留取患者随机新鲜尿液20ml左右，分装于2只试管中，1500r/min离心10min，去上清液，两管各留取沉渣0.5ml，混匀待用。(1)取1～2滴尿沉渣于洁净玻片上，加盖玻片，用OLYMOUS BX41相差显微镜的高倍镜观察并分计数尿沉渣中200～500个红细胞，分别记录各种形态红细胞的数量。正常形态红细胞，相差显微镜下大小均匀，细胞完整，血红蛋白充盈，呈圆盘状;畸形红细胞以细胞膜、血红蛋白、大小、形态发生改变为主，常见形态有芽孢状、草莓状、戒指样、面包圈样、靶形、花环状、锯齿状、棘状、月牙形、星形及红细胞碎片等，各种畸形红细胞之和占红细胞总数的百分率即为红细胞畸形率。在镜检中记录畸形红细胞的种类数及尿沉渣中红细胞、白细胞、上皮细胞、结晶等有形物质的数量。(2)根据相差显微镜观察结果，尿沉渣中红细胞<35/HP或白细胞、上皮细胞等其他有形物质数量>10/HP的患者，不做尿红细胞MCV与RDW检测，其余患者的尿沉渣取0.5ml，使用美国雅培CELL-PYN 3700血细胞分析仪的稀释模式及配套试剂进行红细胞MCV与RDW测定，所有检测在留尿后1h内完成[1]。(3)抽取血液红细胞对照组静脉血2ml，用150g/L的EDTA-K2抗凝剂20μl抗凝，先行常规血细胞分析，选择红细胞直方图分布正常的样本，然后取上述抗凝全血5μl加入到5ml生理盐水中，混合均匀，测定红细胞MCV与RDW，检测方法与尿沉渣MCV和RDW检测相同。
2 结果
相差显微镜下畸形红细胞常见形态有：棘形、环状、芽孢状、草莓样、花环状红细胞及红细胞碎片等。157例血尿患者尿中红细胞的畸形率、畸形红细胞种类，结果见表1。9例血尿患者因为尿中红细胞数量较少，12例血尿患者因为尿中存在较多的白细胞、上皮细胞、结晶等其它有型物质干扰检测，未取得满意的尿红细胞MCV及RDW结果，将另外136例血尿患者及60例血液对照组红细胞的MCV与RDW进行比较，结果见表2。表1 157例血尿患者尿中红细胞畸形结果比较(略)注：与非肾小球性比较*P<0.05表2 血尿患者及血液对照组红细胞MCV与RDW比较(略)注：与非肾小球性比较*P<0.05;与血液对照组比较#P>0.05
3 讨论
3.1 肾小球性血尿红细胞通过有病变的肾小球基底膜时，受到机械性切割、挤压，同时受到肾小管内不同pH、渗透压和代谢产物的影响，发生外形及大小多样化变化，结果使其体积偏小，大小不匀;非肾小球性血尿，主要指肾小球以下部位和泌尿通路上的出血，红细胞没有通过肾小球基底膜，其体积、形态无明显改变[2]。作者利用相差显微镜观察尿中红细胞的形态，计算尿中红细胞的畸形率，并记录畸形红细胞的种类，两组比较差异有显著性，与文献报道[3，4]基本一致(见表1)。以红细胞畸形率≥75%，且畸形红细胞种类>2种，作为诊断肾小球性血尿的指标，本组实验诊断的特异性为91.0%(61/67)，灵敏度为84.7%(61/72)，诊断符合率为89.2%(140/157)。值得指出的是，用相差显微镜观察尿中红细胞形态，操作者需具备一定的临床经验，否则结果容易受不同操作者的影响，临床医生则要综合分析尿中红细胞的畸形率、畸形红细胞的种类、红细胞体积的均一性等指标，才能得出较为可靠的结论。
3.2 红细胞MCV是体积大小的指标，RDW是红细胞体积异质性的指标。尿液标本检测红细胞MCV与RDW，检测结果可靠性受到尿中红细胞数量的影响，同样尿中白细胞、上皮细胞、结晶等有形成分也会干扰检测结果[5，6];本次实验中有21例血尿患者因为尿中红细胞数量较少，或者存在较多白细胞、上皮细胞、结晶等其它有形物质，未取得可靠的尿红细胞MCV及RDW检测结果。肾小球性血尿与非肾小球性血尿组比较，MCV<非肾小球组，而RDW>非肾小球组，两组差异有显著性。非肾小球性血尿组与血液对照组比较，红细胞MCV与RDW结果差异无显著性(见表2)。以MCV<75fl，且RDW>20%，作为诊断肾小球性血尿的指标, 本组实验诊断的特异性为82.6%(57/69)，灵敏度为93.4%(57/61)，诊断符合率为88.2%(120/136)。值得注意的是，某些疾病如地中海贫血、缺铁性贫血等合并血尿时，由于自身血液中红细胞MCV偏小，RDW增大，可导致尿中红细胞MCV与RDW检测结果出现异常，临床上要注意鉴别诊断，必要时可测定患者血液中红细胞的MCV和RDW与尿中红细胞进行比较。
3.3 联合应用尿中红细胞的畸形率及畸形红细胞的种类，同时测定尿中红细胞的MCV与RDW，不但可以了解尿中红细胞的畸形情况，而且对尿中红细胞的大小及是否为均一性红细胞，较以往根据显微镜下所见进行描述有了更加客观的指标，各指标间有一定的互补作用，对肾小球性血尿与非肾小球性血尿的鉴别具有重要价值。该方法操作简单，费用低，患者还可避免一些创伤性检查，值得临床推广应用。
【参考文献】
1 陈巧林,胡嘉波,顾可梁,等.不同防腐剂对尿沉渣检测结果影响的初探.江西医学检验杂志,2002,20(6):339.
2 王海燕.肾脏病学.第2版. 北京:人民卫生出版社,1996.282～287.
3 陈巧林,顾可梁,胡嘉波,等.相差显微镜和UF-100联合检测鉴别血尿来源.临床检验杂志,2005,23(4):281.
4 李荣藻，叶任高，岳少,等.改进的光镜检查尿红细胞形态在血尿诊断中的价值.中国实用内科杂志,1999,19(8):475.
5 潘扬.血细胞分析仪检测尿红细胞MCV的可行性探讨.中国血液流变学杂志,2005,15(1):151.
6 王全会,屈引婷.血尿中白细胞对尿红细胞MCV和直方图的影响.现代检验医学杂志,2005,20(2):57.
