血脂康对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

　　作者：滕蕾,张雪娟,聂毛晓 作者单位：(青岛大学医学院附属医院心内科， 山东 青岛 266003)

　　【摘要】 目的 探讨血脂康对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 健康SD大鼠20只，随机分为缺血再灌注组(MIR组)及血脂康组。血脂康组行心肌缺血再灌注处理前每天每只大鼠灌喂血脂康胶囊0.09 g/kg，连续7 d，MIR组灌胃等量生理盐水;然后两组结扎冠状动脉左前降支，局部缺血30 min，后行120 min血液再灌注。实验结束前伊文蓝、四氮唑蓝染色，测定梗死心肌的面积;腹主动脉取血，测定肌酸激酶同工酶(CKMB)、肌红蛋白(MYO)及肌钙蛋白I(cTnI)的含量，同时检测血清白细胞介素18(IL18)、白细胞介素10(IL10)、C反应蛋白(CRP)的含量。结果 与MIR组相比，血脂康组心肌梗死面积明显减小，CKMB、MYO、cTnI、IL18、CRP水平明显降低，IL10水平显著增加，差异均有统计学意义(t=2.51～12.06,P<0.05)。结论 血脂康通过减轻炎症反应降低急性心肌缺血再灌注损伤大鼠的心肌梗死面积，对缺血再灌注损伤具有保护作用。

　　【关键词】 心肌;再灌注损伤;炎症;大鼠

　　PROTECTION OF XUEZHIKANG IN RATS WITH MYOCARDIAL ISCHEMICAL REPERFUSION INJURY TENG LEI, ZHANG XUEJUAN, NIE MAOXIAO (Department of Cardiology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China) ; [ABSTRACT] Objective To investigate the protection of Xuezhikang capsules in rats with acute myocardial ischemial reperfusion injury (AMIRI). Methods Twenty healthy SD rats were randomly divided into two groups: myocardial ischemia reperfusion group (MIR group) and Xuezhikang group: the rats in Xuezhikang group were treated with Xuezhikang (0.09 g/kg, gastric gavage) and those in MIR group were treated with the same amount of normal saline, for seven days. The rats of the two groups were subjected to 30 minutes of ischemia by ligating the left anterior descending branches and 120 minutes of reperfusion. Before completion of the experiment, the infarct area were assessed after dyeing with Evans blue and triphenyltetrazolium chloride. Blood samples were taken from the abdominal aorta, and MYO, CKMB, cTnI, IL10, IL18 and CRP were detected. Results Compared with MIR group, infarct area and the levels of serum MYO,CKMB,cTnI, IL18 and CRP in Xuezhikang group decreased and the level of IL10 increased significantly (t=2.51-12.06,P<0.05). Conclusion The protection of Xuezhikang capsulesagainst ischemial reperfusion injury of myocardium in rats is by lessening inflammatory reaction, decreasing the area of myocardial infarction.

　　[KEY WORDS] myocardium; ischemiareperfusion injury; inflammations; rats

　　组织血液灌注量下降可导致细胞发生缺血性损伤，尽早恢复组织血液灌注是减轻缺血性损伤的根本措施。但随着溶栓、动脉旁路移植术、经皮冠状动脉干预治疗、器官移植等方法的应用，组织获取血供的同时却出现再灌注损伤。研究表明，这与氧自由基生成增多、钙超载、心肌纤维能量代谢障碍、血管内皮细胞(VEC)功能紊乱、一氧化氮(NO)合成减少、中性粒细胞被激活、引发炎症反应及细胞凋亡等过程密切相关[1]。血脂康是从特制的中药红曲中提炼精制而成的，主要成分是他汀类[2]，能够使胆固醇合成下降，临床多用于高胆固醇血症的治疗。近期研究结果显示，他汀类药物有改善急性心肌缺血再灌注损伤的作用，其作用主要是通过抑制炎症反应实现的[3]。本实验旨在观察血脂康对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用，为临床治疗提供依据。现将结果报告如下。

　　1 对象与方法

　　1.1 实验动物及分组

　　普通级健康SD大鼠40只，雌雄各半,体质量(207.5±14.8)g，购自青岛市动物检疫所。所有大鼠实验前均在25 ℃恒温环境中饲养，充足供应饲料和饮水。随机分为缺血再灌注组(MIR组)及血脂康组。

　　1.2 主要仪器及试剂

　　生物功能实验系统(成都泰盟科技有限工程公司生产)，HX300动物呼吸机(北京亚泰科隆实验科技开发中心)，酶标仪(美国MD公司)，伊文蓝、四氮唑蓝(NBT)(上海源叶生物科技有限公司生产)，白细胞介素18(IL18)、白细胞介素10(IL10)(Adlittteram Diagnostic Laboratories 生产)，C反应蛋白(CRP)试剂盒(上海源叶生物科技有限公司)。

　　1.3 两组动物处理及缺血再灌注模型的建立

　　血脂康组行心肌缺血再灌注处理前每天每只大鼠灌喂血脂康(北京大学维信生物科技有限公司生产)0.09 g/kg，MIR组大鼠灌喂等量生理盐水，均连续7 d。然后，两组建立缺血再灌注模型，具体方法见文献[4]。以心电图J点抬高与高耸T融合呈弓背向上的单相曲线及心肌酶增高为造模成功标志。

　　1.4 检测指标

　　1.4.1 心肌酶的测定 再灌注后，打开腹腔从腹主动脉取血3～5 mL，放置1～2 h，然后2 000 r/min离心15 min，提取上清液，检测肌酸激酶同工酶(CKMB)、肌红蛋白(MYO)和肌钙蛋白I(cTnI)的水平。

　　1.4.2 心肌坏死面积的测定 实验结束前结扎左冠状动脉，以0.1 g/L的伊文蓝注入左心室内，取出心脏，用缓冲液冲洗，冷冻后将其横断面切成厚1 mm的切片，0.25 mmol/L的NBT染色10 min。测定伊文蓝未染区心肌组织质量，代表心肌缺血危险区质量;同时测定NBT区心肌组织质量，代表梗死区质量。以梗死区心肌与心肌缺血危险区心肌质量的百分比表示心肌梗死范围。

　　1.4.3 IL18、IL10和CRP的测定 自大鼠腹主动脉取血3 mL，放置0.5 h，然后以3 000 r/min离心5 min。取血清置于-20 ℃的冰箱备检。IL18、IL10、CRP检测采用酶联免疫吸附 (ELISA) 法。

　　1.5 统计学处理

　　应用SPSS 1.6及PPMS 1.5统计软件[5]进行统计处理，计量资料以±s表示，两组间比较采用t检验,P<0.05为差异有显著性。

　　2 结 果

　　2.1 两组心肌梗死面积及心肌酶的变化

　　与MIR组比较,血脂康组大鼠心肌梗死面积、MYO、CKMB及cTnI水平明显下降，差异有显著意义(t=2.51～12.06,P<0.05)。见表1。

　　2.2 两组IL10、IL18及CRP水平比较

　　与MIR组相比较，血脂康组大鼠IL10含量明显增加，IL18、CRP明显下降，差异均有显著意义(t=2.59～2.71,P<0.05)。见表2。表1 两组大鼠心肌梗死面积及MYO、CKMB及cTnI水平比较(±s)分 组心肌梗死面积表2 两组大鼠IL10、IL18及CRP水平比较

　　3 讨 论

　　本实验应用血脂康胶囊预处理大鼠7 d，然后实施在体缺血再灌注损伤。与MIR组相比,血脂康组心肌梗死面积缩小,差异具有显著性(P<0.01)，这表明血脂康胶囊有改善心肌缺血的作用。心肌酶是反映心肌缺血、低氧的敏感指标。cTnI、 CKMB及MYO是反映心肌梗死的监测指标，本实验观察到两组大鼠MYO、CKMB、cTnI水平增加，但应用血脂康胶囊预处理的大鼠cTnI、CKMB及MYO值升高幅度低于MIR组(P<0.05)，提示血脂康能减轻心肌再灌注损伤，对心脏有保护作用，其结果与他汀类其他药物的效果一致[6]。众多研究结果表明,缺血组织再灌注时会产生急性炎症反应,导致缺血组织、细胞的损伤,炎症细胞释放细胞因子通过不同的致炎和抗炎途径参与缺血再灌注损伤的病理过程[7]。CRP是炎症标志物，也是导致动脉粥样硬化(AS)及其发展的致病因子，IL10为公认的抗炎细胞因子,它可通过抑制多种细胞因子的合成及作用、调节细胞外基质重塑、抑制血栓形成等来增加AS斑块的稳定性，以阻止缺血再灌注损伤的发生，是降低AS形成危险的因子之一。同时，IL18是体内重要的促炎因子之一,其能够促进多种细胞因子参与的炎症级联反应，减弱心肌收缩功能，诱导心肌损伤[8]，在急性心肌梗死的早期炎症反应中起保护性作用[9]。本研究中,与MIR组相比，血脂康组IL18、CRP明显降低(P<0.05)，IL10显著增高(P<0.05)，与国内其他学者研究结果一致[10]，证明血脂康预处理可减轻炎症反应，预防心肌损伤。

　　综上所述，血脂康作为一种调脂药物，还可减少心肌缺血，减轻炎症反应，改善内皮功能。另外，血脂康副作用少，费用较低，病人容易接受，尤其适合农村贫困地区低收入病人，因此更值得推广应用于心血管疾病的高危人群中。

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