复方丹参注射液对室性心律失常心内膜MAP的影响

作者：刘希秀 肖业伟 冯志强 钱知勉 盘强文    作者单位：1.泸州医学院生理教研室,四川 泸州 646000;2.山东滨州医学院人解与组胚教研室，山东 滨州

【摘要】  目的：探讨丹参注射液对室性心律失常时兔心内膜MAP的变化，试图揭示其抗心肌缺血致心律失常作用的机制。方法：2O只家兔，随机分为对照组和丹参组，在心肌缺血背景下致心律失常前后分别记录、检测各项观察指标，作前后对照和组间比较。结果：在心律失常前后，对照组平均心率均低于丹参组；与对照组比较，丹参组在心律失常前后，振幅差异不具有统计学意义，但二组自身心律失常前后比较具有统计学意义；对照组最大上升速度，高于自身心律失常后(P＜0.05)，丹参组差异不具有统计学意义；对照组与丹参组在心律失常前APD90均低于自身心律失常后(P＜O.05)，心律失常前，丹参组APD90略低于对照组，但无统计学意义，而在心律失常后，对照组APD90高于丹参组，具有统计学意义。结论：丹参能提高心内膜心肌耐受缺血的能力，起到了ATP敏感性钾通道开放剂效应，这可能是丹参对心肌缺血保护作用具有增强效应电生理基础。

【关键词】  丹参；室性心律失常；心内膜；MAP

丹参(Salvia Miltiorrhiza)系多年生草本唇形科鼠尾草属植物丹参干燥根的提取物，复方丹参注射液由丹参、降香组成，主要由丹参发挥药理作用，现代医学和现代药理学研究证实：丹参具有扩张冠状动脉，增加血流量，改善心肌缺血状态，提高心肌收缩力，增加心输出量；加速心肌修复，防护心肌缺血缺氧损伤。近来一些研究表明，丹参对改善心肌缺血及抗心律失常作用具有较显著的作用。本研究利用心内膜接触电极记录心内膜心肌单相动作电位(monophasic action potential，MAP)，观察丹参对心肌缺血致心律失常MAP的影响，来探讨其抗缺血性心律失常机制。

    1  材料

    1.1  动物  日本大耳白兔20只（泸州医学院实验动物中心提供），体重1.5kg，雌雄不拘，随机分为对照组和丹参组。

    1.2  药品  垂体后叶注射液(蚌埠市宏业生化制药厂，产品批号070503)，盐酸肾上腺素注射液(重庆迪康长江制药有限公司，产品批号070302)，复方丹参注射液（浙江正大青春宝药业有限公司生产，批号：0704112，基质为注射用水，每1ml相当于丹参1.5g，）

    1.3  主要设备  RM6240微机系统和心内膜引导电极（成都仪器厂）

    2  方法

    2.1  模型制备  日本大耳白兔20只，雌雄不拘，随机分成正常对照组和丹参组(3g·kg-1)，（前期已作丹参不同剂量预实验）。丹参组复方丹参注射液用生理盐水稀释至10ml后静脉注射，对照组静脉注射等容积生理盐水，每日1次，连续用药12天，于第13天用20％乌拉坦(5ml·kg-1)麻醉固定，行气管插管，分离右侧颈外静脉，穿双线，远心端结扎。将备好的记录电极行右侧颈外静脉插管至右心室，记录心内膜MAP；插入针型电极模拟人体肢体II导联记录心电图[1]。待图形稳定后同步记录心内膜MAP、ECG 5min，作为正常对照。静脉注射垂体后叶素2V·kg-1，在ECG出现缺血改变时，再注射肾上腺素0.1mg·kg-1。动态观察记录ECG及MAP的变化，从ECG观察心律失常发生率、类型等；观察心肌MAP的形态、振幅、最大除极速度（Vmax）、MAPD90(monophasic action potential duration，MAPD)。

    观察心内膜电活动与心律失常的关系。

    2.2  MAP参数设置  采集频率为10kHz，扫描速度为80ms/div，灵敏度5mV，时间常数0.2s，滤波频率100Hz。

    3  结果

    3.1  心律失常类型  在心律失常前，对照组和丹参组MAP形态类似。心内膜MAP形态同跨膜动作电位类似，较为“圆润”。对照组10只家兔均出现心律失常，90%发室性早搏二联律或三联律，10%最终出现室颤死亡；心律失常发生后，对照组心率减慢、心律失常持续时间长，MAP形态恢复不易；形态多样，且呈动态变化。有“峰和圆顶”样形态，也有圆顶样和三角样变，三角样变较多，振幅和Vmax降低，时限和间期长短不等，并伴频发室性早搏二联律或三联律；丹参组10只家兔均出现心律失常，主要为室性早搏二联律且持续时间较短，较快恢复至正常时MAP形态，但不能完全恢复。

    3．2  复方丹参注射液对心内膜MAP的影响  闭胸记录心内膜MAP，对照组平均心率在心律失常前后分别为（256.14±19.36）次/分和（133.47±21.55）次/分；振幅分别为（13.51±3.83）mv和（9.31±3.64）mv；APD90分别为（112.14±12.93）ms和（133.52±17.27）ms；最大上升速度分别为（1952.18±529.09）mV/s和(1283.59±325.72)mV/s。平均心率、振幅、最大上升速度降低，APD90增加，P＜0.05具有统计学意义。

    丹参组平均心率在心律失常前后分别为（352.04±16.32）次/分和（191.45±49.55）次/分；振幅分别为（12.57±2.49）mv和（9.66±3.09）mv；APD90分别为（107.84±15.82）ms和（113.05±10.11）ms；最大上升速度分别为（1551.75±499.83）mV/s和(1211.77±359.15)mV/s。平均心率、振幅在心律失常后降低，两者前后自身对照比较P＜0.05均具有统计学意义。最大上升速度心律失常后低于心律失常前，但P＞0.05，差异无统计学意义；APD90心律失常后降低，P＞0.05，也不具有统计学意义。

    与对照组比较，丹参组在心律失常前后，平均心率均高于对照组；而振幅差异不具有统计学意义；心律失常前，丹参组APD90略低于对照组，但无统计学意义，而在心律失常后，对照组APD90高于丹参组，具有统计学意义；最大上升速度在心律失常前，丹参组低于对照组，具有统计学差异，在心律失常后，二者无明显统计学差别。 表1  各组心律失常前后心内膜MAP振幅、APD90、最大上升速度

　　4  统计学处理

    统计学方法：用SPSS统计软件对数据进行统计处理。检测结果以均数±标准差(x±s)表示，心律失常前后采用配对t检验，方差不齐时进行数据转换，P＜0．05为差异有统计学意义。

    5  讨论

    MAP记录的是群细胞的平均胞外电位，可以在在体高保真重复跨膜动作电位除极1～3相的时程及构型[2]。MAP的振幅（MAPA），定为从0期上升最高点到达基线的垂直距离。MAPD90为复极化达到90％的一点到MAP上升支的水平距离。振幅、最大上升速度主要反映的是快钠通道开放的程度以及Na+内流的速度。

    我们的实验证实心肌缺血所致心律失常后，对照组MAPA、最大上升速度在心律失常后也降低，说明Na+通道开放的概率也降低。丹参组振幅、最大上升速度低于心律失常前，但最大上升速度无明显差别。与对照组相比，在心律失常前后振幅差异不明显；对照组在心律失常前最大上升速度明显高于丹参组，而在心律失常后无明显差异，提示我们丹参注射液对心内膜心肌细胞钠通道的影响是有限的，和丹参对心外膜心肌细胞影响则不同（详见另文）。具体原因尚待后续深入研究。

    在心肌缺血所致心律失常后，对照组和丹参组自身比较，平均心率在心律失常后降低，APD90在心律失常后延长，但丹参组差异不明显。有学者认为平均心率和MAPD呈线性相关[3]。与对照组比较，丹参组在心律失常前后平均心率均高与对照组；而APD90在心律失常前后均低于对照组，但心律失常前不具明显统计学意义，这种现象提示我们丹参在抗心内膜心肌缺血时所产生的保护效应是缺血后才出现。这与其他学者实验结果有不同之处，高渊[4]等证实在兔冠脉结扎前后缺血区心室肌单相动作电位时程缩短；但也有学者对跨膜动作电位研究发现缺血后有的心肌细胞动作电位时间缩短，有的明显延长；有的部分地或完全地丧失电活动[5]。而王腾[6]等研究发现模拟缺血液灌流后心肌细胞APD90缩短，模拟缺血液加丹参灌流后，心肌细胞APD90缩短更加明显。钾离子通道是引起心肌细胞动作电位复极的主要电流，钙离子通道主要影响平台期时程。因此APD90在很大程度上主要取决于钾离子复极电流。在本研究中，丹参组电极记录部位心肌细胞群的钾离子通道恢复较快；丹参组在心律失常前后均比对照组明显缩短，说明丹参能产生类似心肌缺血预适应的病理生理过程，起到了ATP敏感性钾通道开放剂效应，随着钾离子外流，动作电位复极加速，心输出量增加，减轻心脏的自身负荷，从而使缺血心律失常后心功能得到改善[6]，也可能是丹参抑制了钙离子内流，复极化加速，从而丹参组APD90时程比对照组缩短。因此，丹参能使钾通道开放，抑制了钙离子内流，这可能是其抗心肌缺血以及缺血性心律失常的机制之一。也有文献对丹参治疗心律失常的机制认为是[7]：丹参对心肌细胞膜的稳定作用，心肌在发生缺血等损伤时，心肌细胞膜首先受到损伤，心肌细胞膜电位发生改变，从而引起心律失常；丹参还有促进能量产生和利用；改善血液循环和心肌缺血缺氧，以及调节自主神经功能，降低交感神经的过度兴奋等，从而减少心律失常的发生。

    在实验过程中，对对照组动物采用1g/kg,2g/kg,3g/kg不同剂量的丹参注射液，其对心律失常的心率，心内膜MAP的振幅、最大上升速度及心律失常后恢复正常心律的时间等效果不同。经过大量的预实验，我们发现3g/kg丹参的效果较前两者好，当然，是否丹参对改善心律失常的发生及心内膜MAP的影响呈剂量依赖关系，还需进一步实验证实。有学者曾用丹参酮ⅡA磺酸钠（丹参酮ⅡA是丹参的提取物）对兔在体心室电生理及实验性心律失常的影响中证实［8］：小剂量丹参酮ⅡA磺酸钠对心室电生理无明显的影响，大剂量则能明显延长心室的相对不应期，有效不应期，室颤阈；且能降低BaCl2、氯仿肾上腺素等诱发的心律失常。因此，丹参注射液对室性心律失常时兔心内膜MAP的影响显著，起到对心肌细胞的保护作用。

【参考文献】  1 余微.冯志强.崔泽中等.室性快速性心律失常时心肌单相动作电位变化［J］.泸州医学院学报，1995，18（1）：19-21.

2 李翠兰，胡大一．单相动作电位技术及临床应用[J]．中国心脏起搏与心电生理杂志，2002，16(5)：326.

3 宋艳丽.单相动作电位及临床应用［J］.上海铁道大学学报，1998，19（1－2）：162－164.

4 高渊.郑强荪.雷靖袢等KATP通道阻断剂对兔缺血心室肌跨壁离散度的影响［J］.心脏杂志2007，19（2）：139－142.

5 Karagueuzian HS，Fenoglio JJ，Weiss MB，et al．Coronary occlusion and reperlusion：Effects on subendocardial cardiac fibers［J］．Am J Physio1．1980，238：H581.

6 王腾.唐其柱.江洪等.丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流变化的影响［J］.武汉大学学报(医学版)，2005，26（6）：696－699.

7 许晓兵，慈书平.丹参治疗老年人心律失常疗效观察［J］.心脏杂志2002，14（6）：555-556.

8 张长翼，邱汉婴.丹参酮ⅡA磺酸钠对兔在体心室电生理及实验性心律失常的影响［J］.汕头大学医学院学报2008,21(1):34-36.