妊娠期高血压病患者血清与胎盘IL-4水平的变化及意义

作者:华英英,冯导

【摘要】  目的 观察妊娠期高血压病患者血清与胎盘白介素4(IL-4)水平的变化，探讨这些变化与妊娠期高血压病的关系。 方法 本院37例妊娠期高血压病患者和32例正常孕妇（对照组），采用放射免疫分析法测定血清和胎盘组织提取液中IL-4浓度，比较妊娠期高血压病组与对照组血清、胎盘IL-4水平的差异。结果 与对照组比较，妊娠期高血压病组血清IL-4水平增高，差异有显著性(P<0.05)；妊娠期高血压病组胎盘IL-4水平高于对照组，差异接近但尚未达到显著性水平（P>0.05）。妊娠期高血压、轻度、重度子前期患者血清和胎盘IL-4水平差异均无显著性（P>0.05）。妊娠期高血压病组血清与胎盘IL-4水平均无显著相关性（P>0.05）。结论 血清IL-4水平增高是妊娠期高血压病的重要病理变化，可能在妊娠期高血压病的发生与变化发展过程中起了作用。

【关键词】  妊娠期高血压病 白介素4 胎盘 血清 细胞因子

   【Abstract】  Objective  To observe the change of IL-4 in both serum and placenta in hypertension disordercomplicating pregnancy and to explore their relationshiops. Methods  37 patients with hypertension disorder complicating pregnany and 32 normal pregnant woman were enrolled in this study , the concentration of their IL-4 in both their serum and placenta tissue extract were measured with radio immunoassay and the difference was statistically compared and analyzed . Results  Compared with that of control group ,the serum level of IL-4 of hypertension disordercomplicating pregnancy was significantly higher (P<0.05); the level of IL4 in placenta in hypertension disordercomplicating pregnancy was higher ,but the difference was not significant（P>0.05）.There was no significant difference in levels of of IL4 in both serum and placenta in hypertension disordercomplicating pregnancy of slight degree ,sever degree or eclampsism（P>0.05）. There was no correlation between the IL4 level in serum and placenta in hypertension disordercomplicating pregnancy group（Υ=0.145，P>0.05及Υ=0.122，P>0.05）. Conclusions  The rise in serum level of IL—4 is an important pathological change in hypertension disordercomplicating pregnancy,which may play a role in the and development of hypertension disordercomplicating pregnancy   【Key Words】  Hypertension disordercomplicating pregnary  IL-4  placenta  serum  cell factor  

　　妊娠期高血压病是严重危害母婴健康的妊娠晚期并发症，其病因与发病机制尚未阐明［１］；免疫学病因与发病机制是近年来国内外学者关注的重点，细胞因子与妊娠期高血压病的关系也引起了注意［２，３］。白介素4（IL-4）是一种Th2型细胞因子，在子宫内膜、蜕膜与胎盘组织中持续表达，正常妊娠时外周血单个核细胞（PBMC）IL-4表达增强，重度子前期时外周血单个核细胞中IL-4等Th2型细胞因子表达较正常妊娠降低；与PBMC中IL-4表达降低相反，Omu等［４］观察到重度子前期患者血清IL-4水平较正常妊娠增高，同时妊娠期高血压病患者胎盘IL-4表达变化的报道尚不多见。作者将本院37例患者观察报道如下。

  1  资料与方法

  1.1  一般资料  2003年11月至2005年1月本院住院行择期剖宫产的妊娠期高血压病患者37例，以排除产程对IL-4表达的影响；其中妊娠期高血压6例、子前期轻度6例，重度25例。按妊娠期高血压病发病孕周分组，不满32周10例，满32周而不满37周16例，满37周11例。妊娠期高血压病组纳入标准为：单胎妊娠，诊断为妊娠期高血压病，无其它妊娠合并症，无高血压史、肾病史与糖尿病史。妊娠期高血压病的诊断与分类标准参照《妇产科学》［１］。妊娠期高血压病组年龄18～45岁，中位年龄28.0岁；分娩孕龄33～41周，中位孕龄37周。以同期行择期剖宫产的32例正常孕妇作对照组，纳入标准为：单胎、足月妊娠，无妊娠并发症与合并症，新生儿体重正常、无窒息。对照组年龄23～36岁，中位年龄28.5岁；分娩孕龄38～42周，中位孕龄40周。

 1.2  方法  所有研究对象均空腹取静脉血3ml，分离血清后-20℃保存待测；剖宫产术胎盘娩出后立即取中间带一胎盘小叶，用预冷生理盐水充分漂洗，吸去多余水分，液氮速冻，-30℃保存备用。测定前取胎盘组织约0.4g，加1.0ml含蛋白酶抑制剂的Tris-HCl缓冲液（pH 7.4，20mmol/L Tris，150 mmol/L 氯化纳，1 mmol/L DDT，0.1mg/ml PMSF，1μg/ml Leupeptin），Fisher组织匀浆器匀浆30s，12000rpm、4℃离心20min，取上清液备用。IL-4测定采用放射免疫分析法，试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免研究所提供。以人血清白蛋白作标准品，采用Bradford法测定胎盘提取液中蛋白质浓度。血清IL浓度以ng/ml表示，胎盘组织IL-4浓度以pg/mg蛋白表示。以混合血清作为质量控制血清，计算批内、批间变异系数。  1.3  统计学处理  数据采用SPSS软件包。血清与胎盘IL-4浓度呈偏态分布，结果以中位数与四分位数表示；年龄和孕龄以中位数表示；新生儿出生体重和胎盘重量以(x±s)表示。两组间中位数比较采用Mann-Whitney检验，两组间均数比较采用t检验，三组间中位数比较采用Kruskal-Wallis检验。相关性分析采用Spearman等级相关。   2  结果

 IL-4测定的批内变异系数＜6%，批间变异系数＜9%。对照组与妊娠期高血压病组临床资料比较见表1。妊娠期高血压病组血清IL-4水平的变化见表2。妊娠期高血压病患者血清胎盘IL-4水平的变化见表3。妊娠期高血压病发病孕周与血清、胎盘IL-4水平见表4。 表1  临床资料  表2  妊娠期高血压病患者血清胎盘IL-4水平的变化　略　　　  表3  妊娠期高血压病病情与血清、胎盘IL-    表4  妊娠期高血压病发病孕周与血清、胎盘IL-4水平　略　 

3  讨论　

　　Omu等［４］采用ELISA测定了正常非孕妇女、不同孕期正常孕妇和重度子前期患者血清IL-4（Th2型细胞因子）与TNF-α(Th1型细胞因子)浓度，发现随着妊娠进展血清IL-4与TNF-α水平平行增高，重度子前期患者血清IL-4与TNF水平均显著高于同孕龄的正常孕妇，而TNF/IL-4比值显著降低。重度子前期患者血清IL-4水增显著增高与PBMC中IL-4低表达不一致，与Th2型细胞因子的生理作用（IL-4、IL-10等Th2型细胞因子对滋养细胞的生长、分化有利）相矛盾。Hayakawa等［５］发现Th1和Th2型免疫反应均可促使孕鼠胚胎吸收，并诱导孕鼠出现实验性重度子前期样症候群，为Omu提出的妊娠中Th2型细胞因子的双向作用提供了佐证。Hayakawa等给与BALB/c或C57B/L交配的BALV/C小鼠输注经IL-4或IL-12激活的BALB/C脾细胞，结果显示，输注IL-4或IL-12激活的脾细胞均可引起鼠胚胎吸收，并出现肾小球肾炎、高血压和蛋白尿等重度子前期样表现。据此，Hayakawa认为不适当的Th1型和Th2型免疫反应均可是导致胚胎吸收与实验性重度子前期。因此，IL-4水平增高是妊娠期高血压病的重要病理生理变化，可能与其发生与发展有关。   胎盘滋养细胞表达IL-4，妊娠期高血压病胎盘IL-4表达水平变化的文献报道不多［６］。本结果表明，妊娠期高血压病组胎盘IL-4表达高于对照组，差异接近但尚未达到显著性水平。这可能与本研究样本不太大以及胎盘IL-4表达的个体差异大有关。因此，妊娠期高血压病胎盘IL-4表达的变化与意义尚待进一步研究。循环细胞因子的来源是多样性的，除免疫细胞外，非免疫细胞如蜕膜细胞、滋养细胞也表达IL-4［６］。因此，妊娠期高血压病时血清细胞因子增高的原因及其来源也有待研究。

【参考文献】  1 乐杰主编.妇产科学.第6版.北京：人民卫生出版社,2003.99.2 Saito S ,Sakai M,Sasaki Y ,et al. Quantitative analysis of peripheral blood Th0,Th1,Th2 and the Th1:Th2 cell ratio during normal human pregnancy and preeclampsia. Clin Exp Immunol， 1999,117:550～555.

3 Yoneyama Y, Suzuki S, Sawa R, et al. Relation between adenosine and T-helper 1/T-helper 2 imbalance in women with preeclampsia.Obstet Gynecol, 2002,99:614～646.4 Omu AE, Al-Qattan F, Diejomaoh ME,et al. Differential levels of T helper cytokines in preeclampsia:pregnancy,labor and puerperium.Acta Obstet Gynecol Scand， 1999,78:675～680. 5 Hayakawa S, Fujikawa T, Fukuoka H, et al. Murine fetal resorption and experimental pre-eclampsia are induced by both excessive Th1 and The2 activation. J Reprod Immunol,2000,47:121～１38.　6 Saito S. Cytokine network at the feto-maternal interface. J Reprod Immunol,2000,47:87～103.