全血标本放置时间对血氨检测的影响

　　氨(NH3)是蛋白质代谢终产物，体内代谢产生的氨及消化道吸收的氨进入血液，形成血氨。正常情况下，氨的来源与去路处于相对稳定平衡状态，血液浓度在47～65μmol/L之间。氨具有一定毒性作用，特别是脑组织对氨的作用尤为敏感，当肝脏出现病变时，NH3因不能得到有效清除，常导致其在血中的水平升高，此时，患者易出现呕吐、厌食、间歇性共济失调、嗜睡甚至昏迷等肝性脑病症状。此外血氨项目测定还可运用于检测和诊断儿科Reye′s综合征及某些先天性代谢紊乱，如鸟氨酸循环相关酶的遗传性缺陷。由此可见，血氨测定对于临床诊断有着重要意义。笔者主要分析、阐述全血放置时间对血氨测定结果的影响，旨在观察血氨测定的标本是否会随着放置时间的延长，其结果会受到影响。现报告如下。

1　材料与方法

1.1　标本来源：记录1周内送检的血氨标本46份，男性29份，女性17份。按实验要求测定后，及时记录实验数据。1.2　试剂和仪器：FUJIFILM Corporation生产的FUJIDRICHEM100及配套测试片。1.3　方法：室温下利用干化学法将每天送至的每一份标本即时测定，按照15min、30min、60min、120min的要求放置，再测定4个时间点的血氨浓度，计算各时间测定结果的平均值，并与即时检测的数值对比。

2　结果

不同放置时间对血氨水平测定的影响：在室温下，全血标本放置时间在30min内，对血氨的测定影响不大，无统计学意义(P>0.05);而当放置时间超过30min以上，血氨的测定结果明显偏高，有统计学意义(P<0.01)，详见表1。

3　讨论

血氨的检测方法主要有动力学法、微量扩散法、离子交换层析法、氨电极法、酶法和干化学法等[1]，而目前大多实验室使用干化学法，该法具有简便、特异、快速又准确可靠等优点，适合急诊使用。血氨测试片是一张由多层扩散层组成、片上涂有测试性物的干燥性干片，全血样品滴加上干片后均匀地向四周及往下层扩散，大分子成分被过滤分离，低分子物质则和水一起扩散渗透到反应层。在反应层内，液体中以氨离子形式存在的氨变成气态氨，透过透气层，到达检测层，与该层中黄色溴酚蓝作用产生绿色或蓝色物质，其颜色变化量与血液中氨浓度成定量关系。干化学法无需特定比色杯具、管道系统，整个试验过程未用去离子水冲洗和其他配制试剂，所涉及的全部反应均在一张测试片上完成，这可避免标本与试剂的结果影响，有利于试验的标准化、规范化。然而，在实际工作中，血氨测定常因不能及时检测放置过久和操作不当而导致其结果失真，原因主要有：红细胞内氨的浓度是胞外的2.8倍，若全血标本久置，细胞本身的代谢会使氨从胞内逸出或细胞部分溶血氨直接流到外环境;此外，血液离体后血中的 γ-GGT、转氨酶可水解多肽、谷氨酰酶等物质而释放出氨[2]。这些因素都能升高氨在血液中的浓度，可导致高血氨症。氨是一种对机体有毒性作用的含氮化合物，在正常个体内含量甚微，主要由肝脏代谢去除。肝组织受损破坏或有严重疾病时，其解毒功能下降甚至消失，血液又可经门静脉侧枝循环绕过肝脏的生化作用，或鸟氨酸循环某一关键酶缺乏时，氨得不到及时清除，可引起血氨浓度升高而出现高血氨症。高血氨时，脑组织中过量的氨可干扰脑的能量代谢，致使高能磷酸化合物浓度降低，还能抑制乙酰CoA和乙酰胆碱的生成，干扰三羧酸循环，ATP产量减少，导致大脑因供能不足而致各种功能障碍。氨进入脑组织后，可与脑中α-酮戊二酸结合生成谷氨酸，后者再与氨进一步结合成谷氨酰胺，因此高浓度氨又可使谷氨酸及谷氨酰胺增多，最终导致脑渗透压升高而出现水肿。此外，氨还通过抑制细胞膜上Na-K-ATP酶的活性，影响神经细胞膜上钠、钾离子的正常分布，可导致神经传到活动异常。所以，通过及时和合理的血氨测定分析获得真实的结果，对诊断和处理肝性脑病等疾病尤为重要，一定程度上可降低误诊疾病的概率。综上所述，精确、及时地测定血液中氨的浓度对检测和处理相关疾病极其重要。在检测分析血氨水平时，应严格按照说明规范操作，使用测试片时从冰箱取出所需数量，防止干片暴露在外界环境太久，有研究发现，干片试剂置于室温7天以上可使血氨测定值有明显上升趋势[3]。另外，由于人体会释放氨气，尤其多汗时，释放的NH3会明显增加，在此情况下测定时，该测试片测得结果可能会偏高。因此，为了避免受人体释放出的氨的干扰以及久置标本的影响，采集后应当即刻进行检测。

4　参考文献[1]　陈正炎.临床生物化学和生物化学检验[M].北京：人民卫生出版社，2001：159-160.

[2]　全国卫生专业技术资格考试专家委员会[M].临床技术(师).北京：人民卫生出版社，2010：369.

[3]　郭丽洁，邹大伟，赵　明.Amon试剂在Vitros250干化学仪器内放置时间对其血氨测定的影响[J].中国实验诊断学，2008，12(4)：539.

[收稿日期：2013-10-28　编校：徐强]