血细胞分析仪计数血小板结果偏低原因分析

　　作者：魏少军,尤举铭　　作者单位：汉中市中心医院，陕西 汉中 723000

　　【关键词】 血细胞分析仪,显微镜,血小板计数

　　全自动血细胞分析仪以方便、工作效率高、准确度高、精密度好为人们所公认。但我们在实际工作中常遇到临床反映血小板结果偏低问题，就此我们对血小板计数结果偏低原因进行了分析。

　　1 材料与方法

　　1.1 仪器

　　日本SYSMEX公司生产的sysmex五分类血细胞分析仪XT1800i，自装机效准后仪器一切运转正常，并定期效准，室内及室间质控各项数据均在控;显微镜;一次性使用负压储血管EDTAK2血常规化验。

　　1.2 试剂

　　由SYSMEX公司提供的sysmex五分类血细胞分析仪XT1800i配套试剂。血小板稀释液按第二版《全国临床木检验操作规程》草酸铵溶液配制。

　　1.3 标本及方法

　　标本选自2006年6月至8月病房及门诊患者，采血量以(2.0±0.1)ml为准，标本混匀30 min后，血细胞分析仪计数血小板在20×109/L～90×109/L，仪器提示血小板直方图异常、血小板凝集的标本39人份(对其中4例进行了重新采血，重新采集的标本血细胞分析仪血小板直方图分布正常，血小板计数结果在120×109/L～180×109/L);随机抽取血细胞分析仪血小板计数在正常范围、直方图分布正常的标本26人份。每筛选一份标即取血样20 μl加入0.38 ml草酸铵稀释液内混匀，待充分溶血后充入计数池静置15 min后人工计数，重复计数两次取均值。以后分别在2 h、3 h、4 h、5 h、6 h血细胞分析仪和手工计数复检标本。

　　2 结果

　　3 讨论

　　3.1 sysmex五分类血细胞分析仪XT1800i

　　检测红细胞及血小板基于电阻抗/鞘流方法，电场中稀释样品从样品喷嘴被前鞘液试剂包围通过小孔中央(产生阻抗)进入圆锥形池，通过小孔中央能提供精确的细胞信号，其幅直与细胞大小直接相关，鞘流机制使细胞计数的精确性和重复性得到提高;血小板的计数阈在2 fl～24 fl，只要血小板直方图分布在3 fl～20 fl以内，分析仪计数血小板的结果与临床基本吻合，依据分析仪计数原理，体积超过24 fl的细胞不能被纳入血小板计数范围。在采血标本时，如止血带扎的过紧过久(>1 min)，或穿集后未能及时来回颠倒(3次～4次)使抗凝剂与血液混匀，凝血系统激活;EDTAK2与Ca++有很大的新和力，与Ca++螯合，EDTAK2有抑制血小板聚集的作用，阻止血小板进一步不可逆性的聚集，避免血小板变性释放出ADP、PF;血小板一旦发生不可逆聚集就不可能再解聚而形成均匀分布的单个血小板;凝血与抗凝血，结果标本中出现肉眼不可见的微小凝集。血小板凝集体积增大，体积大于24 fl不能纳入血小板计数范围，致使血小板计数结果偏低，MPV值增大。血细胞分析仪提示血小板异常直方图、血小板凝集的39例标本，我们在6 h不同时间段分析仪血小板计数结果与人工显微镜计数结果差别有极显著性意义，在显微镜下可见到三五成群凝聚的血小板;我们对4例血小板计数结果偏低直方图明显异常的，重新采血(确保穿刺顺利，及时颠倒混匀)，重新仪器分析，血小板计数结果在正常范围，直方图分布正常可以进一步说明。

　　3.2 血小板的特点

　　是易于粘附和聚集，抗凝血标本静置时间过长后，血小板容易聚集成较大的颗粒，这种可逆聚集的血小板在血标本重新混匀后重新建立平衡，大约需30 min左右可逐渐解聚而能够形成均匀分布的单个血小板[1]。我们采用的EDTAK2负压储血管是玻璃试管内装0.1 ml的EDTAK2溶液可有效抗凝2 ml全血，液体抗凝剂粘附储血管内壁保持湿润易与进入储血管的血流充分混匀，降低对血凝系统激活概率，玻璃试管硅化处理好不易造成血小板粘附试管壁，使血液细胞成分能够保存较长时间不发生形态学改变。我们随机抽取的26例血小板直方图分布正常的标本在6 h内不同时间段，分析仪与人工计数血小板结果差别无显著性意义，分析仪检测MPV值结果差别无显著性意义。我院住院患者血液标本是在早上7点左右采血，大约9点～10点才能集中检验，从前面的分析可以看出，导致血小板计数结果偏低的原因并非在采血2 h～3 h后检测而造成。

　　3.3 导致血细胞分析仪血小板计数结果偏低的原因

　　血液标本采集后如颠倒混匀时用力过猛过大，使血小板溶解破裂，致使血小板计数结果偏低。妊娠、恶性肿瘤、心脑肾疾病的患者血液中会出现较多的大血小板，体积过大超过24 fl时，超出了血小板的计数阈，不能纳入血小板的计数范围而使血小板计数偏低[2]。血小板体积过小超过2 fl也不能纳入血小板计数范围。采血量过少标本被稀释(EDTAK2一次性使用负压储血管是液体抗凝管)超出了允许误差范围，使计数结果偏低。此外分析仪吸取标本量不足分析仪周围环境(剧烈震荡、噪音、电磁辐射等)都可影响血小板计数。

　　3.4 加强工作人员技术，提高检验质量

　　因此我们在工作中做了如下规定：首先要求工作人员要有熟练的操作技术，避免因操作不当而导致血细胞分析仪检测结果的异常，如血细胞分析仪检测结果出现下列情况之一均要求人工复检：血红蛋白、红细胞、白细胞、血小板某一项过高或过低;白细胞无分类或分类某一细胞结果比例严重异常;白细胞可凝或异常信息及散点图异常;血小板可疑信息或异常信息及直方图异常;红细胞异常信息;临床要求人工检验的标本[3]，以保证血细胞分析仪分析结果的准确性，提高检验质量。

　　【参考文献】

　　[1]李胜发，程大林.血小板可逆聚集在全血细胞分析中的影响[J].临床检验杂志，2003，1：37.

　　[2]林宝顺.郑德柱.刘文星，等.大血小板检测及临床意义探讨[J].临床检验杂志，2003，1：17.

　　[3]孙芾，子厚芳，于俊峰，等.血细胞显微镜复检标准的制定及临床应用[J].中华检验医学杂志，2005，28：155157.