乙肝“两对半”8种不同模式的标志物分析

　　作者：张永先,付俊娇,张博,马朋均　　作者单位：陕西省西安济仁医院检验科

　　【摘要】 目的：通过乙肝“两对半”不同模式标志物的分布，提高对HBV病毒的鉴别认识。方法：采取ELISA法检测“两对半”，并对不同模式做出诊断。结果：不同模式出现与各种亚型的共同抗原a环上主要氨基酸残基变异或部分变异逃逸免疫系统的攻击，造成抗原检测时出现假阴性或抗原抗体S基因变异并存有关。结论：对乙肝“两对半”少见模式应仔细分析，定期随访，以减少误差。

　　【关键词】 乙肝系列;抗原抗体;变异性;氨基酸残基

　　慢性乙型肝炎由于病毒持续感染，导致机体免疫功能紊乱，致使病情迁延不愈，治疗非常困难。当前有许多治疗乙型肝炎病毒的药物，如干扰素、抗乙肝核糖核酸、拉米呋啶等，这些药物的联合应用使体内氨基酸残基变异，出现了许多不同形式。“两对半”诊断乙型肝炎病毒(HBV)标志物技术已广泛地应用于临床，对各种形式乙型肝炎早期诊断、早期治疗提供了有效的科学依据。本文回顾性分析ELISA方法检测出的不同形式的乙型肝炎，报告如下。

　　1 试剂与方法

　　1.1 一般资料：2001年～2007年检测8 030例，其中择录少见形式的8种乙肝病例，见表1。

　　1.2 “两对半”检测：均为ELISA法，试剂由英科(厦门)新创科技有限公司提供，使用仪器为北京航天一板式酶标仪，严格按试剂说明书要求操作，设置空白孔，阳性、阴性孔各两孔对照，按酶标仪要求严格操作。

　　2 讨论

　　乙型病毒性肝炎简称乙型肝炎，由HBV感染引起，通过血液传播，具有慢性携带状态，临床表现多样化，容易发展为慢性肝炎和肝硬化，少数病例可转为原发性肝细胞癌。此病在我国广泛流行，人群感染率达60%，HBsAg阳性率达10%～15%，是当前危害人民健康最严重的传染病。携带者以男性居多，其原因未明。完整的HBV分为包膜与核心两部分，在肝细胞内合成，大量释放到血液循环中。本身并无传染性，核心部分含有环状双股DNA、DNA聚合酶(DNAP)、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)，是病毒复制的主体。表1 不同形式的乙肝病例

　　有些药物能抑制乙肝病毒并转录酶和DNA聚合酶的作用，能快速降低血清HBV-DNA水平伴肝功能好转、肝组织改善，但不能清除肝细胞核内病毒的cccDNA，停药后可能病毒再度复制，随着病毒变异产生上述不同模式的出现。

　　乙肝病毒标志物(HBVm)以前俗称“两对半”，现指的乙肝病毒标志物已远远超过原来的范畴，乙肝标志物包括很多指标，各项指标临床意义错综复杂，这些指标组合成许多阳性模式。患者感染HBV，经过一段时间求医治疗后，体内产生抗-HBs，而抗-HBs为保护性抗体，能和血清中的HBsAg形成免疫复合物。HBsAg有不同的亚型，各型的共同抗原为a，此外还有二组互相排斥的亚型抗原决定簇d或y和w或r。按不同的组合形成，HBsAg存在于Dane氏颗粒表面小球型和长杆颗粒。亦含有HBsAg，WHO把HBsAg分为10个亚型常见有4种重要的亚型，adw、ayw、ady、ayr,又因为w决定簇的抗异质性，HBV就有了多种主要血清型。HBsAg亚型的分布有明显的地区差异，并与种族遗传有关。我国汉族以ady为主，HBV亚型不发生改变。

　　乙肝病毒HBsAg与HBsAb同时阳性。一般有急性乙肝趋向恢复时，HBsAg逐渐减少，HBsA开始产生且逐渐增多，用单克隆抗体做试剂，就可同时检出HBsAg和HBsAb。做进一步动态观察，HBsAg随后消失，而HBsAb增多，因此在追踪传染源时，进行亚型测定是有帮助的。此外几种抗-HBe(+)，抗HBc(+)，HBeAg(+), HBsAg(+),见于抗-HBs中针对a环，抗体占90%,a环上主要是氨基酸残基变异或部分变异，可逃逸免疫系统攻击，造成抗原检测时出现假阴性或抗原抗体(针对抗原决定簇)s基因变异并存。近几年出现HBsAg与HBsAb同时阳性，这种现象发生可能是由于HBV具有高度变异性，前s/s区基因多个点突变和少量缺失，这些突变可消弱或改变HBsAg的免疫抗原，使野生株产生抗-HBs、抗-HBe，与变异的HBsAg、HBeAg结合力下降，导致免疫逃逸。

　　HBsAg阴性不能排除乙型肝炎，约5%的乙型肝炎出现HBsAg阴性。考虑原因如下：①急性乙型肝炎HBsAg阴性，可能是抗-HBs出现的窗口期，即HBsAg消失，抗-HBs尚未出现之际。②乙肝病毒和丁肝病毒重叠感染，丁肝病毒大量复制，对HBsAg合成有抑制作用。③乙肝病毒的s基因变异，不表达HBsAg。④低水平的乙肝病毒感染，其HBsAg阴性是因为目前检测HBsAg的方法还不够灵敏。另外，即使HBsAg阳性，仍需澄清是否有其他肝炎病毒的混合感染。因甲型和乙型，乙型和丙型，乙型和丁型、戊型肝炎病毒均有双重感染的可能性。因在临床工作中对乙肝“两对半”中少见的模式应定期随访，并予以关注，认真对待，仔细分析，减少误差。